-半乳糖苷酶（ -GAL）測試盒 可見分光光度法
貨號：BC2580
規(guī)格：50管/24樣
測試方法：可見分光光度法

測定意義： 
    -GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，能夠催化 半乳糖苷化合物中 半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。 -GAL不僅可為植物的快速生長釋放儲存的能量，還能在正常的多糖代謝、細胞壁組分代謝以及衰老時細胞壁降解過程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。
 

測定原理：
    -GAL分解對-硝基苯- -D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算 -GAL活性。
 

自備用品：
    可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品內(nèi)容：

提取液：液體50mL 1 瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑 1 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入5mL 蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑仍-20℃保存。

試劑二：液體15mL 1 瓶，4℃保存。

試劑三：液體80mL 1 瓶，4℃保存。

標準液：液體1ml 1支，4℃保存，10 mol/ml對硝基苯酚溶液。

操作步驟：

一、 粗酶液提?。?/p>

1、 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次）；15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、 組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 提取液），進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

二、 測定步驟：

1、 分光光度計預熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至400nm，蒸餾水調(diào)零。

試劑名稱（ L）

測定管

對照管

標準管

試劑一

200

蒸餾水

200

試劑二

250

250

樣本

50

50

迅速混勻，放入37℃準確水浴30min

標準液

500

試劑三

1000

1000

1000

充分混勻，400nm 處測定吸光值A(chǔ)，計算 A=A 測定-A 對照。每個測定管需設(shè)一個對照管。

三、  -GAL 活性計算：

根據(jù)標準管的吸光度（x）和濃度（y，nmol/ml）建立標準曲線，將△A帶入標準曲線中，計算樣品生成的產(chǎn)物量（nmol/ml）。

（1） 按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每mg 組織蛋白每小時產(chǎn)生1nmol 對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

-GAL 活力(nmol/h /mg prot)=(y V 反總) (V 樣 Cpr) T

=20 y Cpr

需要另外測定，建議使用本公司BCA 蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。

（2） 按樣本鮮重計算：

單位的定義：每g 組織每小時產(chǎn)生1nmol 對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

-GAL 活力(nmol/h /g 鮮重)＝(y V 反總) (W V 樣 V 樣總) T

=20 y  W

（3） 按細菌或細胞密度計算：

單位的定義：每1 萬個細菌或細胞每小時產(chǎn)生1nmol 對-硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

-GAL 活力(nmol/h /104 cell)= (y V 反總) (500 V 樣 V 樣總) T

=0.04 y

Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；V 反總：反應(yīng)體系總體積，0.5mL；V 樣：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.05mL；V 樣總：加入提取液體積，1mL；W：樣本質(zhì)量，g； 500：細胞或細菌總數(shù)，500 萬；T：反應(yīng)時間，0.5h。

-半乳糖苷酶（ -GAL）測試盒 可見分光光度法訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

-半乳糖苷酶（ -GAL）測試盒 可見分光光度法運輸說明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶專用的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送至客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶專用冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶專用的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送至客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。