逆轉(zhuǎn)錄病毒服務(wù)簡介
逆轉(zhuǎn)錄病毒是一種RNA病毒,其最基本特征是:在生命過程中,該病毒有一個從RNA到DNA的逆轉(zhuǎn)錄過程。逆轉(zhuǎn)錄病毒在感染宿主細胞時,會將自身基因組及其攜帶的外源基因整合入宿主基因組中,因此可以介導(dǎo)外源基因穩(wěn)定、長期的表達。逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA的整合是病毒RNA復(fù)制的必經(jīng)階段。只有當受感染的細胞處于細胞分裂期時,逆轉(zhuǎn)錄病毒的DNA基因組才能接觸到宿主細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)。因此,逆轉(zhuǎn)錄病毒只能在分裂中的細胞中復(fù)制。
輝駿生物使用的逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體基于莫洛尼鼠白血病病毒(MMLV),其基本骨架是pMXs,并帶有多種可選的篩選標記。逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞為Plat-E,其內(nèi)含有病毒包裝組分,因此只需轉(zhuǎn)入單一的病毒表達載體即可包裝出攜帶外源基因的病毒顆粒,操作更加方便。
但是需要注意的是,Plat-E包裝出的逆轉(zhuǎn)錄病毒只能感染攜帶Slc7a受體的細胞, 因此僅適用于大鼠、小鼠的細胞系;若宿主細胞為其它物種的細胞,則需要首先用攜帶Slc7a受體基因的病毒感染該細胞系,使其攜帶Slc7a受體, 然后再用帶有外源目的基因的病毒感染相應(yīng)細胞系。
輝駿生物逆轉(zhuǎn)錄病毒技術(shù)服務(wù)項目
表1 逆轉(zhuǎn)錄病毒服務(wù)項目及內(nèi)容
(2)逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝FG303過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建套餐目標基因的模板(1)構(gòu)建載體
(2)逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝
(3)建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株
特別提醒:
(1)基因過表達逆轉(zhuǎn)錄病毒服務(wù)適用于目標基因長度為2000bp以下的片段,2000bp以上的請具體咨詢;
(2)輝駿生物亦可進行基因釣取和WB檢測服務(wù),但費用不包含在總套餐之內(nèi),需根據(jù)實際情況收費;
(3)輝駿生物一般提供的病毒滴度在1 106~1 107 TU/mL之間,規(guī)格為1mL;
(4)Plat-E包裝出的逆轉(zhuǎn)錄病毒只能感染攜帶Slc7a受體的細胞, 因此只適用于大鼠、小鼠的細胞系。
實驗結(jié)果提交
實驗結(jié)束后,輝駿生物會提交完整的實驗結(jié)果,包括:
1. 客戶定制的相應(yīng)載體、病毒液或穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株;
2. 逆轉(zhuǎn)錄病毒液滴度測定報告單;
3. 逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的測序結(jié)果和峰圖、引物序列、載體圖譜;
4. 全部實驗圖片;
5. 詳細實驗報告。
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