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過(guò)氧化氫酶（CAT）檢測(cè)試劑盒 分光光度法
CAT（EC 1.11.1.6）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是Z主要的 H 2 O 2 清除酶，在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。H2O2在 240nm下有特征吸收峰，CAT 能夠分解 H2O2，使反應(yīng)溶液 240nm 下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降，根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出 CAT 活性。 【詳細(xì)說(shuō)明】
過(guò)氧化氫酶(CAT)檢測(cè)試劑盒 分光光度法
產(chǎn)品簡(jiǎn)介 ：
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是主要的 H 2 O 2 清除酶，在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。
H2O2在 240nm下有特征吸收峰，CAT 能夠分解 H2O2，使反應(yīng)溶液 240nm 下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降，根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出 CAT 活性。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
產(chǎn)品內(nèi)容 ：
提取液：60mL 1 瓶，4℃保存；
試劑一：60mL 1 瓶，4℃保存；
試劑二：100 uL 3 瓶，4℃保存。
操作步驟 ：
一 、 粗酶液提取 ：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備
收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 200 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 400 L 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20%，超聲 3 秒，間隔 10 秒。重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
稱(chēng)取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。
二 、CAT 測(cè)定操作
1、CAT 檢測(cè)工作液的配制：用時(shí)在每瓶試劑二（100 uL）中加入 20mL 試劑一，充分混勻，作為工作液。
2、測(cè)定前將 CAT 檢測(cè)工作液 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其他物種）水浴 10min。
3、取 1mLCAT 檢測(cè)工作液于 1mL 石英比色皿中，再加入 35 L 粗酶液，混勻；室溫下立即測(cè)定 240nm 下的初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2。計(jì)算 ?A=A1-A2
三 、CAT 活性計(jì)算 ：
1、血清（漿）CAT 活力的計(jì)算:
單位的定義：每升血清（漿）在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1umol H 2 O 2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。
CAT（U/L）＝反應(yīng)總體積（1035ul） 樣本體積（35ul） 反應(yīng)時(shí)間（1min） H 2 O 2 消光系數(shù)（43.6 10 -3 ） ?A=678 ?A
2、組織 CAT 活力計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H 2 O 2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。
CAT（U/mg prot）＝反應(yīng)總體積（1035ul） 樣本體積（35ul） 反應(yīng)時(shí)間（1min） H 2 O 2 消光系數(shù)（43.6 10 -3 ） ?A 蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）=678 ?A 蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每 g 組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H 2 O 2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。
CAT （U/g mass） ＝反應(yīng)總體積 （1035ul） 樣本體積 （35ul） 反應(yīng)時(shí)間 （1min） H 2 O 2 消光系數(shù) （43.6 10 -3 ） A 樣本鮮重（g/mL）=678 ?A 樣本鮮重（g/mL）
3、細(xì)菌或細(xì)胞中 CAT 活力計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H 2 O 2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。
CAT（U/mg prot）＝反應(yīng)總體積（1035ul） 樣本體積（35ul） 反應(yīng)時(shí)間（1min） H 2 O 2 消光系數(shù)（43.6 10 -3 ） ?A 蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）=678 ?A 蛋白質(zhì)濃度（mg/mL）
3.2 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H 2 O 2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。
CAT（U/10 4 cell）＝反應(yīng)總體積（1035ul） 樣本體積（35ul） 反應(yīng)時(shí)間（1min） H 2 O 2 消光系數(shù)
（43.6 10 -3 ） ?A 細(xì)胞密度（10 4 cell /mL）=678 ?A 細(xì)胞密度（10 4 cell /mL）
過(guò)氧化氫酶(CAT)檢測(cè)試劑盒 分光光度法訂購(gòu)說(shuō)明：
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
過(guò)氧化氫酶(CAT)檢測(cè)試劑盒 分光光度法運(yùn)輸說(shuō)明：
1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶專(zhuān)用的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送至客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶專(zhuān)用冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶專(zhuān)用的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送至客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
*驗(yàn)證碼: = 請(qǐng)輸入計(jì)算結(jié)果（填寫(xiě)阿拉伯?dāng)?shù)字），如：三加四=7
