中美貿(mào)易戰(zhàn)打響，相較美國Sigma產(chǎn)品，民族品牌翊圣生物為節(jié)省科研人員經(jīng)費(fèi)而努力?。?！

翊圣生物提供高成功率糖尿病建模用STZ：純度 98%（HPLC測定）。

廠家

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規(guī)格

促銷價(jià)（元）

廠家貨期

翊圣生物

Streptozocin 鏈脲佐菌素

60256ES60

100mg

156.00

現(xiàn)貨，庫存數(shù)＞30個(gè)

翊圣生物

Streptozocin 鏈脲佐菌素

60256ES76

500mg

386.00

現(xiàn)貨，庫存數(shù)＞50個(gè)

翊圣生物

Streptozocin 鏈脲佐菌素

60256ES80

1g

676.00

現(xiàn)貨，庫存數(shù)＞80個(gè)

Sigma

Streptozocin 鏈脲佐菌素

S0130

100mg

694.66

國內(nèi)現(xiàn)貨

Sigma

Streptozocin 鏈脲佐菌素

S0130

500mg

1872.09

國外調(diào)貨（庫存來自Sigma網(wǎng)站）

Sigma

Streptozocin 鏈脲佐菌素

S0130

1g

3214.56

國內(nèi)現(xiàn)貨

截止到12月31號，訂1g STZ就送 25g檸檬酸 和25g檸檬酸鈉。

文章包含以下知識點(diǎn)

1. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)SOP

2. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型建模效果評估指標(biāo)

3. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的失敗原因解析

4. STZ誘導(dǎo)小/大鼠死亡率高的原因解析

5. 糖尿病建模的影響因素

6. STZ建模方法思路梳理

7. 高建模成功率STZ使用指南

絕大多數(shù)由化學(xué)藥物誘導(dǎo)的動(dòng)物疾病模型具備標(biāo)準(zhǔn)化思路，是用一定劑量的某種化學(xué)藥物借助某種手段抵達(dá)正常組織/器官，并在處理一段時(shí)間后評估疾病指標(biāo)。下面就從幾個(gè)方面梳理建立鏈脲佐菌素（Streptozocin，STZ）誘導(dǎo)的糖尿病疾病模型的思路。

1.STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)SOP

1.1 動(dòng)物的準(zhǔn)備

盡量選用雄性動(dòng)物，雌性含有激素影響建模效率。有研究顯示，雌性動(dòng)物成模率差，而且可能會(huì)比雄性出現(xiàn)更高死亡率，尤其是I型。

I型糖尿病（Type I diabetes）一般按照體重選擇即可，推薦大鼠170-200g，小鼠17-22g，適應(yīng)性喂養(yǎng)1~2周后空腹注射STZ，成模率相對理想。

II型糖尿?。═ype II diabetes）對于大鼠（比如SD/Wistar），選取4-5周齡，體重在90-100g，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達(dá)240-280g。 對于小鼠（比如C57/ICR/昆明小鼠），選取4-5周齡，體重在16-20g，高脂（高糖）飼料喂養(yǎng)4-6周體重約達(dá)30-35g。 對于新購入動(dòng)物或更換飼養(yǎng)環(huán)境需要先用普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周，然后再選擇適合周齡/體重動(dòng)物轉(zhuǎn)用高脂高糖飼料繼續(xù)喂養(yǎng)。從模型建立成功率來看，大鼠推薦用SD，小鼠推薦C57。

1.2 造模前的喂養(yǎng)

造膜前的喂養(yǎng)，Ⅰ型糖尿病模型成模比較快，通常大鼠在普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)2周后即可開始造模；Ⅱ型糖尿病模型：高脂飲食誘導(dǎo)加小劑量STZ。造模前喂以高脂(高糖)飼料，誘發(fā)出胰島素抵抗。

1.3 試劑的準(zhǔn)備

①高脂(高糖)飼料

高脂(高糖)飼料成分：其中含10%蔗糖，10%豬油，5%膽固醇

由基礎(chǔ)鼠飼料加蔗糖、煉豬油和蛋黃按質(zhì)量比搭配制作高脂高糖飼料：其比例為豬油18 % ,蔗糖20 % ,蛋黃3 % ,基礎(chǔ)飼料59 %。

②STZ溶劑 檸檬酸鈉緩沖液的配制

A液和B液的配制：稱取檸檬酸(FW:210.14) 2.1g加入雙蒸水100mL中配成A液；稱取檸檬酸鈉(FW:294.10) 2.94g加入雙蒸水100mL中配成B液。

檸檬酸鈉緩沖液的配制：將A、B液按一定比例混合（1：1.32也有按1:1的），pH計(jì)測定pH值，調(diào)節(jié)pH值到4.2-4.5，即是所需檸檬酸鈉緩沖液。

1.4 注射前準(zhǔn)備

配制STZ注射液前，STZ凍干粉放置于干燥滅菌瓶內(nèi)，外用鋁箔紙或錫紙包好，與檸檬酸鈉緩沖液一起置于冰浴預(yù)冷，帶到動(dòng)物房備用。

注意：STZ凍干粉從 20 C冰箱取出后，于室溫干燥避光放置10min左右，使其徹底解凍（很重要）。

1.5 配制注射液

大鼠過夜禁食（不禁水）后稱重并測血糖濃度。對大鼠進(jìn)行分組，以便按照動(dòng)物數(shù)目和注射劑量來準(zhǔn)備STZ注射液。以1%濃度（w/V）溶解STZ，過濾消毒，切記STZ完全溶解。

注意：①STZ不穩(wěn)定，易失活，快速稱取后剩余試劑仍要求干燥避光，推薦用干燥鋁箔(或錫箔)紙包裹。②注射時(shí)若操作不熟練，切忌不可一次性溶解完STZ。建議根據(jù)操作熟練度，分組溶解STZ，比如10只或15只鼠/組。③亦可提前將STZ按動(dòng)物分組的所需量稱重，分裝。

1.6 注射

按動(dòng)物空腹體重腹腔或尾靜脈注射。如果注射操作技術(shù)不熟練，應(yīng)兩組交替注射，注射應(yīng)在30分鐘內(nèi)完畢。注意：注射大多要求快速注射。

注意：①Ⅰ型糖尿病模型：大鼠劑量為70～65mg/kg

Ⅱ型糖尿病模型：高糖高脂喂養(yǎng)1～2 個(gè)月的大鼠,STZ 劑量在25～40mg/kg。

1.7 注射后

注射完STZ后要給予動(dòng)物足夠的水、食物（糖尿病鼠的基本生活特征），需每日換墊料，保持鼠籠干燥。飼養(yǎng)時(shí)，注意避免強(qiáng)日光照射。盡可能勤消毒。

注意：STZ造模后，明顯血糖水平波動(dòng)呈現(xiàn)3個(gè)時(shí)相，一時(shí)性高血糖（1-2h）、短暫低血糖（6-10h）、持續(xù)高血糖（ 72h）。必須適當(dāng)補(bǔ)給胰島素和葡萄糖。

2. STZ誘導(dǎo)糖尿病模型建模效果評估指標(biāo)

與對照組對比，統(tǒng)計(jì)以下指標(biāo)：

2.1 一般性指標(biāo)：出現(xiàn)多飲、多食、多尿現(xiàn)象，體重下降；

2.2 其他指標(biāo)：空腹血糖、空腹血清胰島素水平、血清胰島素水平、胰島素敏感性、糖耐量等；

2.3 血清生化指標(biāo)：T-Cho、TG、HDL-C、LDL-C、CR、BUN、Alt等。

2.4 病理切片：胰腺組織病理切片

3.STZ誘導(dǎo)糖尿病模型的失敗原因解析

3.1 STZ的品質(zhì)是關(guān)鍵，建模用STZ純度應(yīng)不低于98%（HPLC檢測）。

3.2 STZ失效：應(yīng)干燥保存，避免受潮。粉末避免長時(shí)間室溫放置，溶解的STZ是非常不穩(wěn)定的，在中性pH值的半衰期為15分鐘。注意用酸性pH值溶解STZ，蕞好放在冰浴里。（了解更多STZ的使用，可查看：h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002 ）

3.3 腹腔注射是否注射到腸子等臟器。

模型不達(dá)標(biāo)者，建議，再觀察3天，還是不成模型的話，重新注射一次。

4.STZ誘導(dǎo)小/大鼠死亡率高的原因解析

4.1 鼠的體重過低；

4.2 一定要保證足夠的飲水量(飲水量不足容易導(dǎo)致死鼠);

4.3 高血糖和低血糖都會(huì)造成死鼠，避免死鼠可以通過注射胰島素或暫時(shí)補(bǔ)糖，兩種途徑： ①常見為血糖過高。補(bǔ)胰島素法，補(bǔ)一些中效胰島素。例如給諾和靈n或NPH(中性魚精蛋白鋅胰島素),每次2-3個(gè)單位，過了3-5天，大鼠一般死亡率就低了；②補(bǔ)糖法，禁食后的鼠，注射的時(shí)候已經(jīng)處于低血糖狀態(tài)，造模4小時(shí)后腹腔注射20%的葡萄糖，可避免因注射時(shí)血糖過低死鼠；

4.4 防止動(dòng)物自相殘殺。食物缺乏和供水不足的情況下，會(huì)互相撕殺、啃食同類，所以食物和飲水要供應(yīng)充足，蕞好是兩路供應(yīng);

4.5 防止感染。糖尿病大鼠尿量多，墊料潮濕，需要勤換墊料，所以糖尿病大鼠較其他大鼠容易出現(xiàn)感染，特別是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血測血糖等侵入性操作前后，要注意消毒工作。如每次采血測血糖后可用四環(huán)素(或金霉素眼藥膏)局部涂抹處理傷口預(yù)防感染。

5.糖尿病建模的影響因素

糖尿病疾病模型的影響因素包括STZ建模試劑的質(zhì)量、動(dòng)物狀況及給藥方式等。其中，試劑主要性能為純度、穩(wěn)定性、溶解特性等，動(dòng)物狀況主要包括遺傳背景，雌雄，性別，體重，飼養(yǎng)環(huán)境，飲食結(jié)構(gòu)等，給藥方式包括給藥時(shí)間、給藥間隔和給藥途徑。差異化的因素帶來差異化的建模效果。

6.STZ建模方法思路梳理

影響因素標(biāo)準(zhǔn)化是實(shí)現(xiàn)建模目的及建模穩(wěn)定性的保證。理論上，所有的動(dòng)物建模實(shí)驗(yàn)均要求預(yù)實(shí)驗(yàn)。

以STZ誘導(dǎo)糖尿病模型而言，實(shí)驗(yàn)時(shí)STZ的給藥量應(yīng)參照預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，盡量不要盲目按照文獻(xiàn)上或他人的給藥量來直接使用，鼠均重和空腹(低糖狀態(tài))抗藥力、禁食時(shí)長、注射選時(shí)、以及之前飼養(yǎng)過程、測糖選時(shí)等都不相同，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)來確定符合自己實(shí)驗(yàn)鼠的給藥計(jì)量，才是蕞科學(xué)的。

7.高建模成功率STZ使用指南

STZ保存、溶解、分裝等使用注意事項(xiàng)，詳見h/t/t/ps://w/w/w.yeasen.c/o/m/products/detail/1002