亚洲欧美日本韩国_久久久久亚洲AV片无码V_亚洲AV片不卡无码一_H漫全彩纯肉无码网站

 
 
當前位置: 首頁 » 新聞資訊 » 廠商 » 正文

甲基化檢測-91化工儀器網(wǎng)

分享到:
放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):437
核心提示:上海吉真生物科技有限公司是一家致力于分子生物學檢測方法與技術(shù)的推廣普及,集基因分型、基因表達量檢測、表觀遺傳學分析、精準醫(yī)療為一體的高科技企業(yè)。公司立足于現(xiàn)代人類基因組學、營養(yǎng)基因組學、藥物基因組學、腫瘤基因組學研究的Z前沿,歷經(jīng)多年的市場調(diào)查、技術(shù)準備和產(chǎn)品研發(fā)。公司技術(shù)力量雄厚,具有科學研發(fā)、產(chǎn)品設(shè)計、生產(chǎn)銷售、基因檢測、健康管理、精準醫(yī)療、技術(shù)服務(wù)為一體的運營體系。公司擁有多項核心技術(shù)成果,產(chǎn)品市場需求旺盛,是一家高速成長型企業(yè)。公司的工作宗旨是將具有實際用途的科學研究成果高效地轉(zhuǎn)化為能夠為廣大人群

上海吉真生物科技有限公司是一家致力于分子生物學檢測方法與技術(shù)的推廣普及,集基因分型、基因表達量檢測、表觀遺傳學分析、精準醫(yī)療為一體的高科技企業(yè)。

公司立足于現(xiàn)代人類基因組學、營養(yǎng)基因組學、藥物基因組學、腫瘤基因組學研究的Z前沿,歷經(jīng)多年的市場調(diào)查、技術(shù)準備和產(chǎn)品研發(fā)。公司技術(shù)力量雄厚,具有科學研發(fā)、產(chǎn)品設(shè)計、生產(chǎn)銷售、基因檢測、健康管理、精準醫(yī)療、技術(shù)服務(wù)為一體的運營體系。公司擁有多項核心技術(shù)成果,產(chǎn)品市場需求旺盛,是一家高速成長型企業(yè)。

公司的工作宗旨是將具有實際用途的科學研究成果高效地轉(zhuǎn)化為能夠為廣大人群服務(wù)的產(chǎn)品,推向市場,推進高科技成果的產(chǎn)業(yè)化,縮短科學研究回報社會的時間與距離,讓每位消費者感受到高科技為個人健康帶來的成效,積極為促進國民健康做貢獻!


介紹

  DNA甲基化是zui早發(fā)現(xiàn)的基因表觀修飾方式之一,真核生物中的甲基化僅發(fā)生于胞嘧啶,即在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5 -端的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)? -甲基胞嘧啶。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質(zhì)結(jié)構(gòu)、DNA構(gòu)象、DNA穩(wěn)定性及DNA與蛋白質(zhì)相互作用方式的改變,從而控制基因表達。DNA甲基化通常抑制基因表達,去甲基化則誘導了基因的重新活化和表達。這種DNA修飾方在不改變基因序列前提下實現(xiàn)對基因表達的調(diào)控。CpG位點在基因組是不常見的,主要密集于接近基因啟動子的位置,統(tǒng)稱為CpG島CpG島大約含有500多個堿基,位于基因的啟動子區(qū)或*個外顯子區(qū)。脊椎動物DNA的甲基化狀態(tài)與生長發(fā)育調(diào)控密切相關(guān),比如在腫瘤發(fā)生時,抑癌基因CpG島以外的CpG序列非甲基化程度增加,CpG島中的CpG則呈高度甲基化狀態(tài),導致抑癌基因表達的下降。

甲基化特異性PCR(MSP)

     Herman 等( 1996 )在使用重亞硫酸鹽處理的基礎(chǔ)上新建的一種方法。該方法敏感性高,主要用于作定性研究。用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變;隨后設(shè)計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產(chǎn)物,如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到擴增片段,則說明該位點存在甲基化;反之,說明被檢測的位點不存在甲基化。 

 特點:適用范圍廣,能夠檢測特異位點是否發(fā)生甲基化。

流程

﹡ 樣品用Qiagen試劑盒進行基因組 DNA 提取與重亞硫酸鹽處理(包括純化和脫磺基反應(yīng))。

﹡ 用甲基化引物設(shè)計相關(guān)軟件在甲基化區(qū)域設(shè)計 甲基化特異性的引物( primer Ⅰ )或非甲基化的引物( primer Ⅱ ) 引物 2 對。

﹡ 進行特異性的 PCR 擴增,只有結(jié)合完全的甲基化或非甲基化特異性引物的片段才能擴增出產(chǎn)物。

﹡ 檢測 MSP 擴增產(chǎn)物,如果用針對處理后甲基化 DNA 鏈的引物能擴增出片段,則說明該被檢測的位點存在甲基化;若用針對處理后的非甲基化 DNA 鏈的引物擴增出片段,則說明被檢測的位點不存在甲基化。

亞硫酸氫鹽測序法(BSP)

亞硫酸氫鹽修飾后測序法( BSP ) Frommer 等( 1992 )提出的研究 DNA 甲基化方法,此方法可靠性及精確度高,能明確目的片段中每一個 CpG 位點的甲基化狀態(tài)。

用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設(shè)計BSP引物進行PCR,在擴增過程中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶,zui后對PCR產(chǎn)物進行測序就可以判斷CpG位點是否發(fā)生甲基化,稱為BSP-直接測序法。將PCR產(chǎn)物克隆至載體后進行測序,可以提高測序成功率,這種方法稱為BSP-克隆測序法。

 特點:精確度高,能夠準確檢測出甲基化的程度百分比。

流程

﹡ 樣品用Qiagen試劑盒進行基因組 DNA 提取與亞硫酸鹽處理(包括純化和脫磺基反應(yīng)),使 DNA 中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶脫氨基轉(zhuǎn)變成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不變。

﹡ 用甲基化引物設(shè)計相關(guān)軟件在甲基化區(qū)域兩端設(shè)計引物。

﹡ 進行基因擴增及 PCR 產(chǎn)物回收。

﹡ PCR 產(chǎn)物直接測序或克隆測序(定量分析),分析每個 CpG 島甲基化情況 。

﹡ 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。與未甲基化的 DNA 樣本進行比對。

樣本要求

■ DNA樣品:濃度 100ng/ul、體積 20ul的總DNA樣品,DNA抽提:血液20元/樣本;新鮮組織30元/樣本;石蠟包埋組織50元/樣本

■ 血液樣品:請?zhí)峁?500ul抗凝血;采用標準的采樣管, EDTA 抗凝或枸椽酸鈉抗凝

■ 組織樣品:請?zhí)峁┳懔康慕M織樣品( 300mg)

■ 細胞( 106 )

■ 甲基化位點信息:免費提供甲基化島分析

提供結(jié)果

MSP:引物序列、實驗報告、包括MSP產(chǎn)物的電泳圖片

BSP:引物序列、測序峰圖、陽性克隆質(zhì)粒和實驗報告

 

 
關(guān)鍵詞: 甲基化 引物 胞嘧啶 擴增 基因
 
打賞
[ 新聞資訊搜索 ]  [ 加入收藏 ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 違規(guī)舉報 ]  [ 關(guān)閉窗口 ]
免責聲明:
本網(wǎng)站部分內(nèi)容來源于合作媒體、企業(yè)機構(gòu)、網(wǎng)友提供和互聯(lián)網(wǎng)的公開資料等,僅供參考。本網(wǎng)站對站內(nèi)所有資訊的內(nèi)容、觀點保持中立,不對內(nèi)容的準確性、可靠性或完整性提供任何明示或暗示的保證。如果有侵權(quán)等問題,請及時聯(lián)系我們,我們將在收到通知后第一時間妥善處理該部分內(nèi)容。
 

甲基化檢測-91化工儀器網(wǎng)二維碼

掃掃二維碼用手機關(guān)注本條新聞報道也可關(guān)注本站官方微信賬號:"xxxxx",每日獲得互聯(lián)網(wǎng)最前沿資訊,熱點產(chǎn)品深度分析!
 

 
0相關(guān)評論

 
人妻体体内射精一区二区| 欧洲vat一区二区三区| 丰满的少妇xxxxx青青青| 久久国产欧美日韩精品| 在线亚洲午夜理论av大片| 亚洲日韩欧美一区、二区| 欧美人与性动交α欧美精品| 青青草原亚洲| 国产精品国产三级在线...| 午夜无码国产理论在线| 在线精品亚洲一区二区动态图| 在教室伦流澡到高潮h麻豆| 免费大黄网站| 久久久久亚洲精品男人的天堂| 国内精品视频一区二区三区| 人妻少妇精品无码专区二区| 蜜臀av999无码精品国产专区| 国色天香中文字幕在线视频| 色五月激情五月| 国产精品亚洲精品久久精品| 在线亚洲欧美日韩精品专区| 中文人妻熟妇乱又伦精品| 国产又猛又黄又爽| 综合偷自拍亚洲乱中文字幕| 国产在线拍揄自揄拍无码| 欧美极品色午夜在线视频| 成年免费视频黄网站zxgk| 天堂а在线中文在线新版| 福利一区二区三区视频在线观看| 亚洲xxxx做受欧美| 亚洲国产精品成人无码区| 亚洲日韩av无码一区二区三区人 | www插插插无码视频网站| 国产精品亚洲色婷婷99久久精品| 亚洲精品无码专区久久久| 亚洲视频一区| 国产裸体歌舞一区二区| 精品香蕉久久久爽爽| 国产精品国产三级国产av′| 国产又黄又大又粗的视频| 日日鲁鲁鲁夜夜爽爽狠狠视频97|