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人鼻病毒(HRV)熒光定量PCR核酸檢測試劑盒適用于檢測的咽拭子標(biāo)本等標(biāo)本中人鼻病毒 RNA,適用于人鼻病毒感染的輔助診斷。其檢測結(jié)果僅供參考。
本試劑盒用一對人鼻病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術(shù)對人鼻病毒 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學(xué)診斷。
人鼻病毒(HRV)熒光定量PCR核酸檢測試劑盒說明書
【產(chǎn)品名稱】
商品名稱:人鼻病毒(HRV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR 熒光探針法)
Name :Diagnostic Kit for Human Rhinovirus RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】48 份/盒
【預(yù)期用途】
本試劑盒適用于檢測的咽拭子標(biāo)本等標(biāo)本中人鼻病毒 RNA,適用于人鼻病毒感
染的輔助診斷。其檢測結(jié)果僅供參考。
【檢驗原理】
本試劑盒用一對人鼻病毒特異性引物,結(jié)合一條特異性熒光探針,用一步法熒
光 RT-PCR 技術(shù)對人鼻病毒 RNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測,用于臨床上對可疑感染者的
病原學(xué)診斷。
【試劑組成】
名 稱 規(guī) 格
酶液 50 l 1 管
HRV 反應(yīng)液 1.0ml 1 管
HRV 陽性質(zhì)控品 50 l 1 管
陰性質(zhì)控品 250 l 1 管
說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。
0431霍亂弧菌(O139)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0421霍亂弧菌(O1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0411霍亂弧菌(VC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0311志賀氏菌(SH)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0211沙門氏菌(Spp)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0171致病性大腸桿菌(EPEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0161產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0151侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0141粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0131出血性大腸桿菌(EHEC)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T【儲存條件及有效期】
-20℃ 5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融少于 5 次,
有效期 12 個月。
【適用儀器】
ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ
Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測儀。
【標(biāo)本采集】
采集病人的咽拭子標(biāo)本,應(yīng)使用專用采樣拭子,適度拭抹咽后壁和兩側(cè)扁桃體部
位,應(yīng)避免觸及舌部;迅速將拭子放入標(biāo)本采集管中,旋緊管蓋并密封,以防干燥。
【保存和運(yùn)輸】
上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標(biāo)
本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。
【使用方法】
1. 樣品處理(樣本處理區(qū))
1.1樣本前處理
取 100uL 拭子標(biāo)本于 1.5mL 滅菌離心管中。
4. PCR 擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
4.1將待檢測反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi);
4.2設(shè)置好通道、樣品信息,反應(yīng)體系設(shè)置為 25ul;熒光通道選擇:
檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,請勿
選擇 ROX 參比熒光。
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時間 收集熒光信號
1 1cycle 42℃ 20min 否
2 1 cycle 95℃ 10min 否
3 40 cycle
94℃ 15sec 否
55℃ 30sec 是
1.2RNA 提取
推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 RNA 提取試劑盒(離心柱提取
法),請按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。
2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性
對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 HRV 反應(yīng)液 酶液
用量 20 l 1 l
3. 加樣(樣本處理區(qū))
將步驟 1 提取的 RNA、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4 l,分別加入相應(yīng)的反
應(yīng)管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。
5. 結(jié)果分析判定
5.1結(jié)果分析條件設(shè)定
設(shè)置 baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲
線出現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) baseline 的 start 值(一般可在 3~15
范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold 的 Value
值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結(jié)果。
1011難難梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0911金黃色葡萄球菌(SA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0811副傷寒桿菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0711傷寒桿菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0611甲型副傷寒沙門氏菌(SPA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0511副溶血性弧菌(VP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T0441霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T7. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
陰性質(zhì)控品:無明顯擴(kuò)增曲線或無 Ct 值顯示;
陽性質(zhì)控品:擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值 32;
以上條件應(yīng)同時滿足,否則實驗視為無效。
8. 產(chǎn)品性能指標(biāo)
陰陽性參考品符合率:5 份陽性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合率
為 100%。
最低檢測限:5.0 102copies/ml。
精密度:批內(nèi)、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(shù)(CV)均小于等于 3%。
人鼻病毒(HRV)熒光定量PCR核酸檢測試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
1921肉毒桿菌(E/F型)1911肉毒桿菌(A/B型)1811空腸彎曲菌(CJ)1711產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌(CP)1611創(chuàng)傷弧菌(VV)1511溶藻弧菌(VA)1411嗜水氣單胞菌(AH)1311小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌(YE)1211蠟樣芽孢桿菌(BC)1111單增李斯特菌(LM)以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),91化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
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