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豬藍耳病毒天津株TJM-F92疫苗熒光PCR試劑盒_熒光PCR試劑盒-上海晅科生物科技有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):322
核心提示:更新時間:2019-05-09 11:00:2374 聯(lián)系我們時請說明是91化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝! 立即訂購 加入購物車 支付方式:支付寶 | 網(wǎng)上銀行更新時間:2018.10.121067 聯(lián)系我們時請說明是91化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝! 豬藍耳病毒天津株TJM-F92疫苗熒光PCR試劑盒針對豬藍耳病毒天津株基因高度保守區(qū)基因序列設計特異性引物和熒光探針。在反應體系中含豬藍耳病毒天津株基因組模板的情況下,PCR反應得以進行并釋放 熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應通道的信號

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豬藍耳病毒天津株TJM-F92疫苗熒光PCR試劑盒針對豬藍耳病毒天津株基因高度保守區(qū)基因序列設計特異性引物和熒光探針。在反應體系中含豬藍耳病毒天津株基因組模板的情況下,PCR反應得以進行并釋放 熒光信號。利用熒光定量PCR儀對PCR過程中相應通道的信號強度進行實時監(jiān)測和輸出,實現(xiàn)檢測結果的定性、定量分析。

豬藍耳病毒天津株TJM-F92疫苗熒光PCR試劑盒說明書

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:豬藍耳病毒天津株(TJM-F92)核酸擴增檢測試劑盒(PCR 熒光探針法)

Name :Nucleic acid amplification kit for detection of swine blue ear virus Tianjin strain (TJM-F92) (PCR fluorescence probe method)

【包裝規(guī)格】48T/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測全血等樣本中的豬藍耳病毒天津株,用于豬藍耳病毒天津株感染的輔助診斷,其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒用一對豬藍耳病毒天津株特異性引物,結合一條特異性探針,用熒光 PCR 技術對豬藍耳病毒天津株的核酸進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

名 稱 規(guī) 格

核酸提取液 1.5ml 2 管

酶液 50 l 1 管

YP 反應液 1.0ml 1 管

YP 陽性質控品 50 l 1 管

陰性質控品 250 l 1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件和有效期】

試劑盒保存于-20 5℃,有效期 12 個月;

避免反復凍融,凍融次數(shù)不超過 5 次;試劑開瓶后,在室溫條件下放置時間不

應超過 8 小時;運輸采用干冰(或者冰袋)保持低溫,運輸時間不應超過 4 天。試

劑盒生產(chǎn)日期見產(chǎn)品標簽。

【適用儀器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ

Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本要求】

標本采集:用注射器取血 5mL 至 EDTA-2Na 抗凝管

保存運輸:上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過

6 個月,標本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1樣本前處理

取抗凝血下層血細胞 50uL,加入 100uL 雙蒸水吹勻

1.2DNA 提取

1) 對上述處理好的標本加入等體積核酸提取液(固體標本加入50uL核酸提取液),

100℃恒溫處理 10 分鐘,13,000 rpm 離心 5 分鐘,取上清液轉移至新的 1.5ml

EP 管,-20℃保存;

2) DNA 的提取也可以采用上海晅科生物科技有限公司生產(chǎn)的 DNA 提取試劑

盒(離心柱提取法),請嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

根據(jù)待檢測樣本總數(shù),設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性

對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

試劑 YP 反應液 酶液

用量(樣本數(shù)為 N) 20 l 1 l

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1 提取的 DNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4 l,分別加入相應的反

應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴增(核酸擴增區(qū))

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

4.2 設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25ul;

熒光通道選擇: 檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)

NONE,請勿選擇 ROX 參比熒光。

4.3 推薦循環(huán)參數(shù)設置:

步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時間 收集熒光信號

1 1 cycle 95℃ 10min 否

2 40 cycle

94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

5. 結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲線出

現(xiàn)整體傾斜時,根據(jù)分析后圖像調節(jié) baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍

內調節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節(jié)),以及 Threshold 的 Value 值(上

下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

5.2結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值 35.0,且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線;

可疑:檢測通道 35.0 Ct 值 37,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35.0 Ct

值 37,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct 值 37 或無 Ct 值。

7. 質控標準

陰性質控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數(shù)生長期,且 Ct 值 32;

以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。

8. 產(chǎn)品性能指標

陰陽性參考品符合率:8 份陽性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合

率為 100%。

最低檢測限:2.0 102copies/ml。

精密度:批內、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(shù)(CV)均 3%。

公司優(yōu)勢:
1)質量:我司提供的的試劑為世界知名品牌
2)價格:價格實惠,量大從優(yōu)。
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