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常見的微生物檢測方法_91化工儀器網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):865
核心提示:所以有必要介紹一下微生物生長情況的檢測方法。既然生長意味著原生質(zhì)含量的增加,所以測定的方法也都直接或間接的以次為根據(jù),而測定繁殖則都要建立在計(jì)數(shù)這一基礎(chǔ)上。微生物生長的衡量,可以從其重量,體積,密度,濃度,做指標(biāo)來進(jìn)行衡量。生長量測定法體積測量法:又稱測菌絲濃度法。通過測定一定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。方法是,取一定量的待測培養(yǎng)液(如10毫升)放在有刻度的離心管中,設(shè)定一定的離心時(shí)間(如5分鐘)和轉(zhuǎn)速(如5000rpm),離心后,倒出上清夜,測出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v

所以有必要介紹一下微生物生長情況的檢測方法。

既然生長意味著原生質(zhì)含量的增加,

所以測定的方法也都直接或間接的以次為根據(jù),而測定繁殖則都要建立在計(jì)數(shù)這一基礎(chǔ)上。

微生物生長的衡量,可以從其重量,體積,密度,濃度,做指標(biāo)來進(jìn)行衡量。

生長量測定法

體積測量法:又稱測菌絲濃度法。

通過測定一定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來反映微生物的生長狀況。方法是,取一定量的待測培養(yǎng)液(如10毫升)放在有刻度的離心管中,設(shè)定一定的離心時(shí)間(如5分鐘)和轉(zhuǎn)速(如5000 rpm),離心后,倒出上清夜,測出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v)/10。菌絲濃度測定法是大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長的一個(gè)重要監(jiān)測指標(biāo)。這種方法比較粗放,簡便,快速,但需要設(shè)定一致的處理?xiàng)l件,否則偏差很大,由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營養(yǎng)物,結(jié)果會有一定偏差。

稱干重法:

可用離心或過濾法測定。一般干重為濕重的10-20%。在離心法中,將一定體積待測培養(yǎng)液倒入離心管中,設(shè)定一定的離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速,進(jìn)行離心,并用清水離心洗滌1-5次,進(jìn)行干燥。干燥可用烘箱在

105℃或100℃下烘干,或采用紅外線烘干,也可在80℃或40℃下真空干燥,干燥后稱重。如用過濾法,絲狀真菌可用濾紙過濾,細(xì)菌可用醋酸纖維膜等濾膜過濾,過濾后用少量水洗滌,在40℃下進(jìn)行真空干燥。稱干重發(fā)法較為煩瑣,通常獲取的微生物產(chǎn)品為菌體時(shí),常采用這種方法,

如活性干酵母一些以微生物菌體為活性物質(zhì)的飼料和肥料。比濁法:

微生物的生長引起培養(yǎng)物混濁度的增高。通過紫外分光光度計(jì)測定一定波長下的吸光值,判斷微生物的生長狀況。對某一培養(yǎng)物內(nèi)的菌體生長作定時(shí)跟蹤時(shí),可采用一種特制的有側(cè)臂的三角燒瓶。

將側(cè)臂插入光電比色計(jì)的比色座孔中,即可隨時(shí)測定其生長情況,而不必取菌液。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長監(jiān)測。如我所使用

UNICO公司的紫外可見分光光度計(jì),在波長600nm 處用比色管定時(shí)測定發(fā)酵液的吸光光度值OD600

,以此監(jiān)控E.Coli的生長及誘導(dǎo)時(shí)間。菌絲長度測量法:對于絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養(yǎng)基上測定一定時(shí)間內(nèi)菌絲生長的長度,或是利用一只一端開口并帶有刻度的細(xì)玻璃管,到入合

(來源:上海甬能實(shí)業(yè)有限公司)

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