上海華盈生物醫(yī)藥科技有限公司（簡(jiǎn)稱，華盈生物），位于上海張江藥谷腹地（現(xiàn)為張江科學(xué)城），是一家集產(chǎn)品研發(fā) 技術(shù)服務(wù)為一體的醫(yī)學(xué)生物技術(shù)領(lǐng)域的特色高科技企業(yè)。華盈生物由生物芯片上海國(guó)家工程研究中心原副主任張慶華博士于2012年3月發(fā)起創(chuàng)建。公司核心團(tuán)隊(duì)由多名中科院博士后組成，2004年技術(shù)團(tuán)隊(duì)開始從事蛋白芯片相關(guān)技術(shù)的研發(fā)與對(duì)外服務(wù)工作，是國(guó)內(nèi)起初一批蛋白芯片行業(yè)的專業(yè)人才。

  華盈生物自2012年創(chuàng)建以來(lái)，以蛋白芯片和質(zhì)譜技術(shù)的研發(fā)與推廣為核心，與美國(guó)Full Moon、RayBiotech、CDI等國(guó)際專業(yè)公司結(jié)成戰(zhàn)略伙伴，與美國(guó)John Hopkins大學(xué)、上海交通大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)等知名院校展開緊密合作。先后引進(jìn)和開發(fā)了豐富的蛋白芯片、抗體芯片和質(zhì)譜技術(shù)平臺(tái)。華盈生物提供的產(chǎn)品可滿足信號(hào)通路、細(xì)胞因子、蛋白表達(dá)、蛋白修飾、蛋白相互作用、疾病標(biāo)志物篩選等大部分生物醫(yī)藥領(lǐng)域的科研需求。經(jīng)過(guò)多年穩(wěn)步發(fā)展，華盈生物現(xiàn)已成為國(guó)內(nèi)蛋白芯片行業(yè)的標(biāo)桿企業(yè)、上海市高新技術(shù)企業(yè)、上海張江生物醫(yī)學(xué)服務(wù)聯(lián)盟成員單位。

  華盈生物緊跟國(guó)際蛋白質(zhì)組學(xué)發(fā)展前沿，引進(jìn)和優(yōu)化了較早的蛋白質(zhì)譜技術(shù)，充分發(fā)揮 蛋白芯片 和 蛋白質(zhì)譜 兩大技術(shù)平臺(tái)的互補(bǔ)優(yōu)勢(shì)，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的實(shí)驗(yàn)方案和高質(zhì)量的服務(wù)體驗(yàn)。目前，華盈生物提供的蛋白芯片和質(zhì)譜技術(shù)方案已在國(guó)內(nèi)科研客戶群體中贏得廣泛的良好口碑，華盈人的專業(yè)和專注也已獲得業(yè)界普遍認(rèn)可。華盈人希望通過(guò)自身的不斷努力，為推動(dòng)高標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在國(guó)內(nèi)科研單位和生物醫(yī)藥企業(yè)中的廣泛應(yīng)用增添動(dòng)力。

膽汁酸研究介紹

 
  膽汁酸是膽汁中存在的一類膽烷酸的總稱，按結(jié)構(gòu)可分為游離型膽汁酸和結(jié)合型膽汁酸，游離型膽汁酸包括膽酸（CA）、去氧膽酸（DCA）、鵝去氧膽酸（CDCA）和少量的石膽酸（LCA）；結(jié)合型膽汁酸包括甘氨膽酸（GCA）、甘氨鵝去氧膽酸（GCDC）、?；悄懰幔═CA）和牛黃鵝去氧膽酸（TCDCA）等。按來(lái)源可分為初級(jí)膽汁酸和次級(jí)膽汁酸，包括CA和CDCA；次級(jí)膽汁酸包括去氧膽酸DCA和LCA。
 

  膽汁酸以膽固醇為原料在肝臟中合成，通過(guò)腸肝循環(huán)在腸道中進(jìn)行代謝，其不僅是脂類消化吸收過(guò)程中的重要物質(zhì)，也是調(diào)控糖脂及能量代謝的關(guān)鍵信號(hào)分子。膽汁酸牛磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)體（NTCP）、膽鹽輸出泵（BSEP）、膽酸轉(zhuǎn)運(yùn)體（ASBT）是膽汁酸的主要運(yùn)輸工具。由腸道重吸收的膽汁酸均由門靜脈進(jìn)入肝臟，在肝臟中游離型膽汁酸再轉(zhuǎn)變?yōu)榻Y(jié)合型膽汁酸，隨膽汁進(jìn)入腸腔。在膽汁酸因疾病在肝臟中出現(xiàn)淤積，從膽道排出發(fā)生障礙，會(huì)改從腎臟排出。
 

 
  膽汁酸與腸道菌群之間存在著交互作用。腸道菌群不僅促進(jìn)吸收食物營(yíng)養(yǎng)，還能產(chǎn)生大量代謝物并通過(guò)相應(yīng)宿主受體間接調(diào)控宿主代謝。肝臟將膽固醇轉(zhuǎn)化為初級(jí)膽汁酸排入小腸，腸道菌群可通過(guò)膽鹽水解酶（BSH）和膽固醇7-羥化酶（CYP7A1）將初級(jí)膽汁酸轉(zhuǎn)變?yōu)榇渭?jí)膽汁酸。而次級(jí)膽汁酸又進(jìn)一步通過(guò)核FXR核受體及TGR5膜受體等調(diào)控宿主的代謝通路。同時(shí)，膽汁酸也能夠直接或通過(guò)活化宿主小腸內(nèi)的先天性免疫因子調(diào)節(jié)腸道菌群的構(gòu)成。因此，在腸道菌群-宿主共代謝病中，膽汁酸與腸道菌群代謝組之間往往需要進(jìn)行聯(lián)合分析。
 

定量膽汁酸全譜分析平臺(tái)

 
  華盈生物靶向代謝組學(xué)平臺(tái)能夠定量檢測(cè)61種膽汁酸，利用超高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜（UPLC-TQMS）進(jìn)行復(fù)雜樣品中膽汁酸的分離和譜峰面積采集，利用膽汁酸全譜標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算每種膽汁酸在樣品中的濃度，利用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)NIST血清校準(zhǔn)批次樣品間的準(zhǔn)確性。在確保61種膽汁酸定性的同時(shí)，所獲得的膽汁酸濃度值也可以與文獻(xiàn)中相關(guān)研究的膽汁酸數(shù)據(jù)進(jìn)行橫向比較。
 

 技術(shù)路線

樣品采集 樣品檢測(cè) 標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量 差異統(tǒng)計(jì) 生物信息

 樣品要求

技術(shù)平臺(tái)：LC-MS/MS

優(yōu)異的耐用性，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜基質(zhì)中低含量分析物的重現(xiàn)性檢測(cè)

采用高速采集速率，可靠定量更多分析物

快速極性切換可涵蓋單次進(jìn)樣中的正負(fù)模式下離子化化合物

配備Xtended Dynamic Range檢測(cè)器，超高靈敏度

可同時(shí)獲取全掃描（MS）和MRM（MS/MS）數(shù)據(jù)，揭示樣品復(fù)雜性

經(jīng)典案例分析

肝臟膽汁酸失調(diào)推動(dòng)肝癌的發(fā)生（PMID: 27273788）

  肝癌是全世界較常見的惡性腫瘤，除了肝臟炎癥引起的慢性肝損傷外，有研究證實(shí)，一些膽汁酸可以作為肝癌發(fā)生的啟動(dòng)子，特別是高疏水性的次級(jí)膽汁酸，很容易造成DNA損失和細(xì)胞凋亡。
 

  研究人員利用潛在致癌物鏈脲霉素聯(lián)合高脂飲食（STZ-HFD）誘導(dǎo)小鼠，觀察小鼠模型從非酒精性脂肪肝炎（NASH）向肝細(xì)胞性肝癌（HCC）轉(zhuǎn)化的全過(guò)程。發(fā)現(xiàn)小鼠在6周時(shí)即出現(xiàn)脂肪肝，8周時(shí)出現(xiàn)脂肪性肝炎，12周內(nèi)全部發(fā)生肝纖維化，到16 周時(shí)開始形成肝癌，20周全部出現(xiàn)肝癌。
 

  進(jìn)一步，利用定量膽汁酸全譜分析體系對(duì)STZ-HFD誘導(dǎo)的肝癌演化模型各階段的小鼠血漿、肝組織和糞便，進(jìn)行膽汁酸定量分析。發(fā)現(xiàn)隨著肝臟脂肪累積和肝損傷的演變，總膽汁酸水平以及一些疏水性的膽汁酸：DCA、TCDCA、TCA、GCA、TDCA、TLCA和TUDCA顯示明顯的伴隨性增加。
 

  由于腸道菌群與膽汁酸代謝密切相關(guān)，研究人員利用16S rDNA測(cè)序技術(shù)分析了各階段小鼠糞便中的腸道菌群譜（宏基因組），并與膽汁酸等進(jìn)行了相關(guān)性分析。研究發(fā)現(xiàn)Clostridium spp.，Bacteroides spp.，Atopobium app.和 Desulfovibrio spp. 幾種細(xì)菌隨著肝癌發(fā)病進(jìn)展逐漸變成優(yōu)勢(shì)菌屬，并且與總膽汁酸代謝水平成顯著正相關(guān)。
 

  為了進(jìn)一步確定膽汁酸在肝癌發(fā)展中的作用，我們?cè)贖FD飼料中添加消膽胺（陰離子交換樹脂），以清除腸道中的疏水性膽汁酸，發(fā)現(xiàn)消膽胺能夠顯著降低肝臟中膽汁酸的淤積，并預(yù)防肝癌的發(fā)生。
 

  上述研究可以顯示膽汁酸在肝癌發(fā)生演變中起著關(guān)鍵作用，可以作為未來(lái)疾病治療的靶點(diǎn)，而腸道菌群參與了膽汁酸代謝調(diào)控與肝癌發(fā)生。利用華盈生物定量平臺(tái)，研究人員可以獲得較穩(wěn)定的膽汁酸檢測(cè)數(shù)據(jù)，為科學(xué)研究提供強(qiáng)有力的技術(shù)保障。
 

相關(guān)文獻(xiàn)：

Xie G, Wang X, Ping L, et al. Distinctly altered gut microbiota in the progression of liver disease.Oncotarget. 2016 Apr 12;7(15):19355-66.

Xie G, Wang X, Huang F, et al. Dysregulated hepatic bile acids collaboratively promote liver carcinogenesis. Int J Cancer. 2016 Oct 15;139(8):1764-75.

Ferslew B C, Johnston C K, Tsakalozou E, et al. Altered morphine glucuronide and bile acid disposition in patients with nonalcoholic steatohepatitis. Clin Pharmacol Ther. 2015 Apr;97(4):419-27.

Wang X, Xie G, Zhao A, et al. Serum Bile Acids Are Associated with Pathological Progression of Hepatitis B-Induced Cirrhosis. J Proteome Res. 2016 Apr 1;15(4):1126-34.