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苯丙氨酸解氨酶-公司動態(tài)-青島捷世康生物科技有限公司

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-09-02  來源:儀器信息網  作者:Mr liao  瀏覽次數:127
核心提示:苯丙氨酸解氨酶(Phenylalnine ammonialyase,PAL)試劑盒分光光度法50管/48樣注意:正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。測定意義:PAL(EC4. 3 1 5)廣泛存在于各種植物和少數微生物中,是植物體內苯丙烷類代謝的關鍵酶,與一些重要的次生物質如木質素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關,在植物正常生長發(fā)育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。測定原理 PAL催化 L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在 290nm處有zui大吸收值,通過測定吸光值升高
主營產品: Elisa試劑盒,國產elisa試劑盒,白介素Elisa試劑盒,豬ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,國產稀釋劑,實驗室耗材批發(fā),化學試劑批發(fā)


苯丙氨酸解氨酶(Phenylalnine ammonialyase,PAL)試劑盒 分光光度法 50管/48樣

注意:正式測定之前選擇 2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

PAL(EC4.  3 1  5)廣泛存在于各種植物和少數微生物中,是植物體內苯丙烷類代謝的

關鍵酶,與一些重要的次生物質如木質素、異黃酮類植保素、黃酮類色素等合成密切相關,

在植物正常生長發(fā)育和抵御病菌侵害過程中起重要作用。

測定原理

PAL催化  L-苯丙氨酸裂解為反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在 290nm處有zui大吸收值,

通過測定吸光值升高速率計算 PAL活性。

所需的儀器和用品

紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1  mL石英比色皿、研缽、冰

和蒸餾水。

試劑的組成和配制

提取液:液體 60mL 1瓶,4℃保存。

試劑一:液體 40mL 1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑 3 瓶,4℃保存。臨用前每瓶加入 4mL  蒸餾水水充分溶解待用;用不完的試劑 4℃保存;

試劑三:液體 2.5mL 1瓶,4℃保存。

粗酶液提取

按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL

提取液),進行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

試劑名稱( L)

測定管

對照管

樣本

20

 

試劑一

700

800

試劑二

200

200

混勻,30℃ 準確水浴  30min

試劑三

40

40

 

混勻,靜置10min后,290nm處記錄測定管吸光值A1和對照管吸光值A2,△A=A1-A2。

注意:對照管只要做一管

PAL活性計算

(1)按蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白在每mL反應體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個酶

活性單位。

PAL(U/mg prot)= A V反總 (Cpr V樣) 0.1 T =17.3 A Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每mL反應體系中每min使290nm下吸光值變化0.1為一個酶活性單位。

PAL(U/g鮮重)= A V反總 (W V樣 V樣總) 0.1 T =17.3 A W

V反總:反應體系總體積,1.04mL;V樣:加入樣本體積,0.02mL;V樣總:加入提取液

體積,1 mL;T:反應時間,30 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;

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