Hank s液是生物醫(yī)學試驗中常見的平衡鹽溶液(BSS)之一,簡稱HBSS。主要用于配制培養(yǎng)液,稀釋劑和細胞清洗液,而不能單獨作為細胞,組織培養(yǎng)液。D-Hank s與Hank s的一個主要區(qū)別在于前者不含有鈣和鎂離子,因此D-Hank s常用于配制胰酶溶液。
Hanks液的配制
原液A
NaCl
160g
MgSO4 7H2O
2g
KCl
8g
Mg Cl2 6H2O
2g
CaCl2
2.8g
溶于1000ml雙蒸水
原液 B
(1)
Na2HPO4 12H2O
3.04g
KH2PO4
1.2g
葡萄糖
20.0g
溶于800ml雙蒸水
(2)
0.4%酚紅溶液:取酚紅0.4g,置玻璃研缽中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,約加0.1N NaOH 10ml。將溶解的酚紅吸入100ml量瓶中,用雙蒸水洗下研缽中殘留酚紅液,并入量瓶中,后補加雙蒸水至100ml。
將(1)液和(2)液混合,補加雙蒸水至1000ml,即為原液B。
應用液
原液A
1份
原液B
1份
雙蒸水
18份
混合后,分裝于200ml小瓶中,10磅高壓蒸氣滅菌15分鐘,臨用前用無菌的5.6% NaHCO3調(diào)pH至7.2~7.6
注意事項:
1.BSS的pH值應確定為7.2-7.4之間。
2.如配制的Hanks液高壓滅菌后液體變混濁,則可將100 mL的CaCl2與含有其他成分的液體分別裝瓶高壓滅菌之后,再在無菌條件下配制,定容。這樣可以避免高壓滅菌后液體變混。
3.胰酶受熱易失活,所以盡量避免盛夏配制,并且在配制過程中溫度應始終保持在4℃左右。
4.胰酶研磨要充分,否則在過濾時會將較大的顆粒過濾掉,不能達到真正的濃度。
5.胰酶分裝時盡量分裝成多瓶,并遵守3次左右用完和只裝2/3體積的原則。因為冷凍保存時體積會膨脹,而多次使用同一瓶胰酶反復凍融會降低消化效果并可能造成污染。
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