南京康佰生物科技有限公司是一家專業(yè)提供，進(jìn)口細(xì)胞，科研試劑，生命科學(xué)研究服務(wù)外包，生物大數(shù)據(jù)庫(kù)的綜合型公司。公司在多年的發(fā)展歷程中，整合資源，悉心研發(fā)逐步建立起 全國(guó)較大腫瘤細(xì)胞庫(kù) ， 全球較大STR鑒定比對(duì)信息庫(kù) 等專業(yè)平臺(tái)，同時(shí)開發(fā)了分子生物學(xué)、蛋白工程、病毒包裝、抗體工程、細(xì)胞工程、藥物研發(fā)等一系列平臺(tái)，與上海張江藥谷、蘇州納米園、南京高新區(qū)及其他知名企業(yè)均建立了穩(wěn)定的合作關(guān)系。

反轉(zhuǎn)錄PCR

反轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse Reaction，RT-PCR）又稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR。其原理是：提取組織或細(xì)胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。

價(jià)格與周期：

實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目/片段長(zhǎng)度

小于1000bp

1000-2000bp

2000-3000bp

mRNA抽提

600元

600元

600元

反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈

200元

400元

800元

PCR擴(kuò)增雙鏈cDNA

300元

500元

1000元

純化PCR產(chǎn)物，克隆PCR產(chǎn)物到標(biāo)準(zhǔn)載體測(cè)序

200元

300元

500元

亞克隆到其他表達(dá)載體(可選)

1000元

1200元

1500元

全部實(shí)驗(yàn)依據(jù)實(shí)驗(yàn)難度一般需要2-4周的時(shí)間

服務(wù)流程：

1、mRNA抽提

2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈

3、PCR擴(kuò)增雙鏈cDNA

4、純化PCR產(chǎn)物,克隆PCR產(chǎn)物到標(biāo)準(zhǔn)載體測(cè)序

5、亞克隆到其他表達(dá)載體(可選)

樣品要求：

1、 樣品可提供組織、細(xì)胞、RNA、cDNA中的一種,對(duì)于提供樣本的大致原則如下：組織樣本,盡可能提供2 2 2mm3體積或以上,新鮮組織可直接提供，不需處理；對(duì)于細(xì)胞樣本，盡可能提供3 10^6個(gè)細(xì)胞左右,加適量Trizol處理即可，確保樣品適于RNA抽提。RNA、cDNA含量根據(jù)同等細(xì)胞數(shù)量的細(xì)胞抽提和逆轉(zhuǎn)錄大致界定, 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。

2、客戶提供盡可能詳細(xì)的背景信息；物種信息，擴(kuò)增目的基因的NCBI登錄號(hào)等。

3、由于材料的個(gè)體差異及PCR過程中會(huì)產(chǎn)生突變等原因，我們不保證獲取的基因與參考序列的堿基完全一致。

4、運(yùn)輸要求，液氮或干冰保存寄送。

注：樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。

提交的產(chǎn)品和資料：

1.測(cè)序圖譜，酶切位點(diǎn)圖；

2.含有目的基因的質(zhì)粒及穿刺菌；

3.反轉(zhuǎn)錄PCR完整的實(shí)驗(yàn)步驟、使用儀器、軟件設(shè)置參數(shù)等。