透射電鏡,全稱透射電子顯微鏡,是用于觀察組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的大型精密電子儀器,已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等各個(gè)研究領(lǐng)域,成為研究細(xì)胞生物學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)以及臨床病理診斷的重要工具之一。
一、開機(jī)程序
1、首先打開房間空調(diào),冷卻循環(huán)水房溫度21度,操作室25度;
2、開啟冷卻水循環(huán)裝置,一個(gè)獨(dú)立的小的控制器,先將開關(guān)打至ON,再將按下POWER鍵;
3、啟動(dòng)穩(wěn)壓電源,穩(wěn)定于220V,查看電壓箱供電指示燈亮;
4、用鑰匙啟動(dòng)主機(jī),從OFF檔位旋到START位,松開后鑰匙自動(dòng)回到ON位置。透射電鏡自動(dòng)抽真空,等待約40分鐘。
5、直至DP綠燈亮,HIGH綠燈亮,READY綠燈亮(若不亮的話,將LENS LIGHT打至ON檔位)。
二、電子槍合軸
1、確認(rèn)READY綠燈亮;
2、把樣品撥出,物鏡光欄撥出至0檔位;
3、加高壓:按下HT鍵后,依次按下40-60-80-100KV鍵,并注意觀察束流表是否正常,每次都要等電流表顯示穩(wěn)定之后再進(jìn)行下一步,一般調(diào)到80KV就行了。
4、加燈絲:將FILAMENT EMIISSION旋鈕緩慢旋至鎖定位置。
5、一般在SCAN(5300倍)條件下調(diào)節(jié),調(diào)節(jié)CONDENSER鈕,得到光斑。
6、SPOT SIZE調(diào)到3檔,調(diào)節(jié)CONDENSER鈕聚光,得到最小最亮光斑,然后用左右ALIGNMENT:TRANS(小的)將光斑拉至最中心位置(中心位置有一黑點(diǎn))。
7、SPOT SIZE調(diào)到1檔,調(diào)節(jié)CONDENSER鈕聚光,得到最小最亮光斑,然后用GUN ALIGNMENT:TRANS(X、Y)將光斑拉至中心位置。
8、再重復(fù)6、7步驟,使束流不偏離中心。
三、調(diào)燈絲相
1、透射電鏡在SCAN模式下,SPOT SIZE調(diào)到1檔。
2、將FILAMENT EMIISSION旋鈕稍稍往回調(diào),到看到燈絲欠飽和像,即車輪像(魚眼像),若車輪像不對(duì)稱,則進(jìn)行下面調(diào)節(jié)。
3、緩慢旋轉(zhuǎn)GUN ALIGNMENT:TILT(X、Y),使燈絲像對(duì)稱。
4、然后調(diào)節(jié)FILAMENT EMIISSION旋鈕至燈絲飽和(即剛好全亮,沒有陰影),并鎖定該位置。
四、粗對(duì)焦
1、透射電鏡關(guān)燈絲(FILAMENT EMIISSION旋鈕至OFF)后,插入樣品,插入物鏡光欄;
2、透射電鏡開燈絲(FILAMENT EMIISSION旋鈕至ON)后,放大光斑至滿屏(以免燒壞銅網(wǎng));
3、找到樣品,并選中一目標(biāo)為參照。
4、將IMAGE WOBBLER打至ON,此時(shí)看到樣品會(huì)有一定的晃動(dòng),調(diào)節(jié)FOCUS旋鈕(有大中小三個(gè),一般只用到中和小)至透射電鏡圖像清晰沒有重影。
五、聚光鏡對(duì)中調(diào)節(jié)
1、透射電鏡關(guān)燈絲后,撥出樣品,撥出光欄,開燈絲,縮小光斑,檢查是否在中心位置。
2、在SCAN模式,SPOT SIZE 1檔情況下,將COND ALIGNMENT打到ON,然后下面一WOBBLER鍵打到X,以調(diào)節(jié)光斑重合,同樣的方法進(jìn)行Y軸對(duì)中調(diào)節(jié),調(diào)節(jié)完畢之后打到中間OFF檔。
3、將IMAGE WOBBLER鍵打到ON,調(diào)節(jié)IMAGE WOBBLER旋鈕至重合。
六、電流中心調(diào)節(jié)
1、透射電鏡插入樣品,插入光欄,找到一樣品做為參照物,調(diào)節(jié)時(shí)放大倍數(shù)小于5萬倍。
2、用目鏡觀察,聚焦,找準(zhǔn)參照物,用FOCUS調(diào)焦至最清晰。
3、快速反復(fù)轉(zhuǎn)動(dòng)FOCUS旋鈕(以最清晰位置為中心前后旋轉(zhuǎn)),此時(shí)觀察參照物樣品的情況,如有放大縮小的情況(看到樣品是以某點(diǎn)為中心在旋轉(zhuǎn))那就是正常的,若是樣品有左右或者上下移動(dòng)的現(xiàn)象,就需要調(diào)節(jié)ALIGNMENT的大旋鈕,TILT鈕直至正常。
七、電壓中心調(diào)節(jié)
1、在第六步的基礎(chǔ)上,放大倍數(shù)(大于5萬倍)。
2、找到一參照物,調(diào)焦至最清晰。
3、HVWOBBLER置于ON,若參照物不偏離中心而四周同心振動(dòng),則電壓中心良好,反之,若參照物有漂移,則用左右ALIGNMENT:TILT調(diào)節(jié)。
八、光欄的調(diào)節(jié)
1、聚光鏡光欄調(diào)節(jié):判斷透射電鏡光欄是否在中間位置,調(diào)節(jié)CONDENSER時(shí),光斑不在中間,放大時(shí)會(huì)有很大陰影(電子束被東西擋住),移動(dòng)樣品時(shí)也沒有改變,此時(shí)可以斷定是光欄位置不正確,通過調(diào)節(jié)光欄上兩個(gè)旋鈕,使光欄回到中心位置。
2、物鏡光欄調(diào)節(jié):打開FUNCTION:SADIFF(控制臺(tái)D區(qū),與SCAN一排的一個(gè)按鈕),調(diào)節(jié)SA/HD DIFFRACTION:CAMERA LENGTH(控制臺(tái)B區(qū))和物鏡光欄上的兩個(gè)旋鈕,使得中間最亮點(diǎn)周圍的一圈較暗的光斑變得對(duì)稱即可。
九、聚光鏡像散調(diào)節(jié)
透射電鏡在沒有放入樣品的情況下:插入聚光鏡光欄(2檔),SPOT SIZE調(diào)至3檔,調(diào)節(jié)CONDENSER鈕至光斑最小最亮,再調(diào)節(jié)COND STIGMATORX、Y旋鈕,使得光斑變得最圓,即完成聚光鏡像散調(diào)節(jié)。
十、物鏡像散調(diào)節(jié)
1、在完成以上調(diào)節(jié),即確認(rèn)透射電鏡對(duì)中狀態(tài)良好,電壓中心對(duì)中,無聚光鏡像散,光欄位置正確的情況下進(jìn)行物鏡像散調(diào)節(jié)。
2、插入物鏡光欄,在觀察樣品的時(shí)候調(diào)節(jié),在高倍下(大于10萬倍)找到一樣品作為參照,改變焦距,觀察樣品邊沿系統(tǒng)是否均勻,若有像散,則進(jìn)行以下操作。
3、配合調(diào)節(jié)OBJ STIGMATOR:X、Y旋鈕(控制臺(tái)E區(qū))和FOCUS旋鈕,消除像散。
十一、樣品裝卸操作
1、確認(rèn)樣品裝卸時(shí)透射電鏡狀態(tài):放大倍數(shù)調(diào)至較小倍數(shù),燈絲發(fā)射至OFF。
2、右邊的旋轉(zhuǎn)手柄有四個(gè)檔位:空檔位、SET、AIRLOCK、ENG,觀察樣品的時(shí)候一定在SET檔位,ENG檔位用來換樣品,當(dāng)需要打開左邊的樣品室時(shí),一定要放置在AIRLOCK檔位,空檔位只是做一個(gè)過渡。
3、左邊的樣品室旋轉(zhuǎn)手柄上有兩種標(biāo)識(shí),一種是數(shù)字(1-6),另外間于數(shù)字中間的是一些點(diǎn),當(dāng)數(shù)字對(duì)正時(shí),可以用右邊的旋轉(zhuǎn)手柄把相應(yīng)的樣品從樣品室中取出。當(dāng)需要打開樣品室換下一批樣品時(shí),要保證所有的樣品都留在樣品室,這樣就要讓數(shù)字中間的點(diǎn)對(duì)正,再將右邊的旋轉(zhuǎn)手柄拉出。
4、當(dāng)右邊旋轉(zhuǎn)手柄置于AIRLOCK檔位時(shí)可以打開樣品室,左邊有一能上下扳動(dòng)的把手。
十二、關(guān)機(jī)程序
1、放大倍數(shù)降至小于1萬倍,光斑滿屏。
2、退燈絲至OFF。
3、退高壓,可直接按下20KV按扭,再按高壓鍵HT(燈滅)。
4、鑰匙旋至OFF,等待約15分鐘,透射電鏡面板上所有的燈都熄滅,機(jī)械泵停止工作,關(guān)冷卻水裝置,關(guān)穩(wěn)壓電源,關(guān)電源開關(guān)。
透射電鏡是利用高能電子束充當(dāng)照明光源而進(jìn)行放大成像的大型顯微分析設(shè)備,透射電鏡是一種具有高分辨率、高放大倍數(shù)的電子光學(xué)儀器,被廣泛應(yīng)用于材料科學(xué)等研究領(lǐng)域。
03-19
透射電鏡的電子衍射是透射電鏡的一個(gè)重要應(yīng)用,而透射電鏡廣泛應(yīng)用于斷裂失效分析、產(chǎn)品缺陷原因分析、鍍層結(jié)構(gòu)和厚度分析、涂料層次與厚度分析、材料表面磨損和腐蝕分析、耐火材料的結(jié)構(gòu)與蝕損分析中。
03-19
透射電鏡是一種綜合性大型分析儀器,在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的研究開發(fā)工作中被廣泛地使用。透射電鏡工作原理是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進(jìn)行觀察。
03-19
透射電鏡是一種高分辨率、高放大倍數(shù)的顯微鏡,是材料科學(xué)研究的重要手段,能提供極微細(xì)材料的組織結(jié)構(gòu)、晶體結(jié)構(gòu)和化學(xué)成分等方面的信息。透射電鏡的分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數(shù)為幾萬~幾十萬倍。
03-19