一切肉眼看不見(jiàn)或看不清的微小生物,個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,通常要用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚的生物,統(tǒng)稱為微生物。微生物包括細(xì)菌、病毒、霉菌、酵母菌等。但有些微生物是肉眼可以看見(jiàn)的,像屬于真菌的蘑菇、靈芝等。下面就讓小編帶你了解一下微生物檢測(cè)常見(jiàn)的幾種傳統(tǒng)計(jì)數(shù)改良方法。
培養(yǎng)膜法
原理
由兩篇塑料膜組成的,上膜薄作為蓋,下膜厚作為培養(yǎng)基。
操作方法
檢樣稀釋,然后在膜正中間滴上1ml樣品液,蓋上膜,使用擴(kuò)展器壓成20cm兩圓圈,在溫度37度下培養(yǎng)24小時(shí),最后計(jì)數(shù)。
優(yōu)點(diǎn)
1.玻璃儀器、培養(yǎng)基得到節(jié)省。
2.培養(yǎng)基等試劑的配置滅菌、玻璃儀器的滅菌與清洗所花費(fèi)的時(shí)間、3.人力以及費(fèi)用得到節(jié)省。
4.計(jì)數(shù)因有顯色劑與小方格而非常方便。
5.沒(méi)有繁瑣的稀釋的工作。
6.致病菌能夠被快速測(cè)試出,使得大量的實(shí)驗(yàn)步驟省去了。
缺點(diǎn)
成本要稍高于傳統(tǒng)方法
在對(duì)細(xì)胞總數(shù)、大腸菌群、霉菌以及酵母菌進(jìn)行測(cè)試時(shí),它們的培養(yǎng)時(shí)間不能節(jié)省。
螺旋平板法
原理
在瓊脂的表面,樣品制備的菌懸液會(huì)形成阿基米德螺旋型軌跡。當(dāng)被用來(lái)分液的空心針從平板中央向邊緣移動(dòng)的時(shí)候,菌懸液的體積會(huì)變小,注入的體積與瓊脂半徑之間成指數(shù)關(guān)系。在培養(yǎng)時(shí)菌落沿著注液線生長(zhǎng)。和瓊脂表面不同區(qū)域相關(guān)的樣品量通過(guò)一計(jì)數(shù)的方格來(lái)校準(zhǔn)。將每個(gè)區(qū)域的已知的菌落數(shù)計(jì)數(shù)再計(jì)算出細(xì)菌濃度。
優(yōu)點(diǎn)
相比于傳統(tǒng)方法,稀釋梯度不需要,每個(gè)梯度倒兩個(gè)平板,使得大量的人力物力得到節(jié)省。
缺點(diǎn)
并沒(méi)有縮短檢測(cè)時(shí)間,依然需要培養(yǎng)48個(gè)小時(shí)的菌落總數(shù)。
人工技術(shù)會(huì)很麻煩,需要與自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀配合使用。
濾膜法
可過(guò)濾樣品的微生物檢測(cè)常用到濾膜法。
優(yōu)點(diǎn)
靈敏度大,菌落沒(méi)有擴(kuò)散情況,方便計(jì)數(shù)。
缺點(diǎn)
真空泵、多聯(lián)支架和一次性濾膜的購(gòu)買需要額外的支出。若抽濾過(guò)程中空氣的潔凈度不足,那么有可能引起二次污染,特別是如啤酒、澄清果汁、桶裝飲用水這樣對(duì)菌數(shù)要求特別嚴(yán)格的產(chǎn)品。