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植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)ELISA檢測試劑盒說明書——中國生物器材網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-07-24  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):677
本試劑盒只能用于科學(xué)研究,不得用于醫(yī)學(xué)診斷
植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)ELISA檢測試劑盒
使用說明書植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)ELISA檢測試劑盒
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入陰性對照、陽性對照、樣本、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),判斷樣品是否含有植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)。
樣品收集、處理及保存方法
1.  血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.  細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)ELISA檢測試劑盒說明書 酶標(biāo)儀(450nm) 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 37℃恒溫箱 操作注意事項植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)ELISA檢測試劑盒說明書
  試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。   實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。   預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10 L加樣即可。   嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。   所有液體組分使用前充分搖勻。 試劑盒組成
試劑的準(zhǔn)備
 20 洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20 洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

  手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。   自動洗板機:每孔注入洗液350 L,浸泡1min,洗板5次。
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50 L; 待測樣本孔先加待測樣本10 L,再加樣本稀釋液40 L; 隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100 L,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。 每孔加入底物A、B各50 L,37℃避光孵育15min。 每孔加入終止液50 L,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。 結(jié)果判斷
1.  試驗有效性:陽性對照孔OD值平均值 1.00;
  陰性對照孔OD值平均值 0.15。
2.  臨界值(Cut off)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
3.  陰性判斷:樣品OD值<臨界值(Cut off),樣品為陰性
4.  陽性判斷:樣品OD值>臨界值(Cut off),樣品為陽性
試劑盒性能
準(zhǔn)確性:陽性對照孔OD值平均值 1.00;陰性對照孔OD值平均值 0.15,說明試驗結(jié)果有效。 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。 有效期:6個月 免責(zé)聲明
1.  試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān),本公司概不負(fù)責(zé)。
2.  嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
植物羽狀斑駁病毒(SPFMV)ELISA檢測試劑盒說明書
 
關(guān)鍵詞: 斑駁 植物 檢測 病毒 試劑盒
 
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