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檢測(cè)原理黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書
試劑盒采用雙抗體夾心、、。往預(yù)先包被黃瓜花葉病毒（CMV）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、樣本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃瓜花葉病毒（CMV）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），判斷樣品是否含有黃瓜花葉病毒（CMV）。
樣品收集、處理及保存方法 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書 酶標(biāo)儀（450nm） 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 37℃恒溫箱 操作注意事項(xiàng) 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書
試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋，直接取10 L加樣即可。 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。 所有液體組分使用前充分搖勻。 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書試劑盒組成
試劑的準(zhǔn)備
20 洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20 洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350 L，浸泡1min，洗板5次。
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50 L； 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10 L，再加樣本稀釋液40 L； 隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100 L，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。 每孔加入底物A、B各50 L，37℃避光孵育15min。 每孔加入終止液50 L，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 結(jié)果判斷
1. 試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值 1.00；
陰性對(duì)照孔OD值平均值 0.15。
2. 臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性
4. 陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽(yáng)性
試劑盒性能
準(zhǔn)確性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值 1.00；陰性對(duì)照孔OD值平均值 0.15，說明試驗(yàn)結(jié)果有效。 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。 有效期：6個(gè)月 免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
試劑盒采用雙抗體夾心、、。往預(yù)先包被黃瓜花葉病毒（CMV）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、樣本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的黃瓜花葉病毒（CMV）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），判斷樣品是否含有黃瓜花葉病毒（CMV）。
樣品收集、處理及保存方法 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書 酶標(biāo)儀（450nm） 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 37℃恒溫箱 操作注意事項(xiàng) 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書
試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。 預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋，直接取10 L加樣即可。 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。 所有液體組分使用前充分搖勻。 黃瓜花葉病毒（CMV）ELISA檢測(cè)試劑盒說明書試劑盒組成
試劑的準(zhǔn)備
20 洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20 洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。 自動(dòng)洗板機(jī)：每孔注入洗液350 L，浸泡1min，洗板5次。
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。 設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔，陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50 L； 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10 L，再加樣本稀釋液40 L； 隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100 L，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。 每孔加入底物A、B各50 L，37℃避光孵育15min。 每孔加入終止液50 L，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 結(jié)果判斷
1. 試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值 1.00；
陰性對(duì)照孔OD值平均值 0.15。
2. 臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
3. 陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性
4. 陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽(yáng)性
試劑盒性能
準(zhǔn)確性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值 1.00；陰性對(duì)照孔OD值平均值 0.15，說明試驗(yàn)結(jié)果有效。 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。 有效期：6個(gè)月 免責(zé)聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)，本公司概不負(fù)責(zé)。
2. 嚴(yán)格按照說明書操作，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
