ELISA實驗樣本前期的處理方法是不一樣的，科研朋友一定要多加注意 點擊次數(shù)：19 發(fā)布日期：2019-6-13 來源：本站 僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)
 ELISA試劑盒檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。實驗樣本的處理可謂是ELISA實驗的關(guān)鍵步驟之一，所以科研朋友一定要多加注意。
一、均質(zhì)
    ①組織樣本：肉、肝食品類切細(xì)，用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎，混合均勻。
    ②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細(xì)，用均質(zhì)器均漿；原料表面較臟時,需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
    ③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。
    ④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。
二、振蕩提取
    將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中，振蕩，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部，提取待測組分。
    ①振蕩方式：振蕩器上進(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
    ②在組織樣本中加入有機(jī)溶劑之間提取時，應(yīng)邊加邊振蕩，防止組織凝結(jié)成團(tuán)，不利于提取。
三、濃縮
    由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干，再用復(fù)溶液溶解干燥殘留物。
    濃縮方式：氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
    請注意：
    ①在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質(zhì)干擾。
    ②在吹樣本時，針頭應(yīng)在液面上空，避免與樣本接觸，防止產(chǎn)生交叉污染。
    ③樣本吹干后應(yīng)立即取下，避免吹的時間過長，影響zui終檢測結(jié)果。
    ④不同的藥物，吹干后樣本的保質(zhì)期不同，提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
四、乳化現(xiàn)象
    在用有機(jī)溶劑提取過程中，如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，解決的方法有：
    ①用細(xì)頭輕輕的攪拌，破壞乳化后，再重復(fù)離心。
    ②再加入適量的提取劑，重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。
五、凈化
    經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程，我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是：液液分配法。
    比如：用復(fù)溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷，在加入正己烷和復(fù)溶液渦動后如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，可以60℃水浴加熱，至乳化現(xiàn)象消失或減弱后，加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。