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模塊式植物表型分析技術(shù)方案——擬南芥UV脅迫的響應(yīng)機(jī)制——中國(guó)生物器材網(wǎng)

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-04-02  來(lái)源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):601
植物面對(duì)各種生物和非生物脅迫時(shí),會(huì)調(diào)整它們的響應(yīng)機(jī)制來(lái)優(yōu)化發(fā)育和適應(yīng)程序。UV輻射作為一種環(huán)境因子,會(huì)影響植物的光合過(guò)程并觸發(fā)細(xì)胞死亡。華沙生命科學(xué)大學(xué)的Anna Rusaczonek評(píng)估了紅/遠(yuǎn)紅光感受器光敏色素A和光敏色素B在擬南芥UV脅迫響應(yīng)中的作用。通過(guò)測(cè)量相關(guān)突變株的CO2同化、葉綠素?zé)晒猓ò晒獯銣鐒?dòng)力學(xué)曲線和OJIP快速熒光動(dòng)力學(xué)曲線)、活性氧積累等,他發(fā)現(xiàn)UV脅迫干擾了光系統(tǒng)II,并增加了相關(guān)突變體的死亡率。   圖1. UV處理的擬南芥野生型及突變株 CO2同化速率反映了光合作用整個(gè)過(guò)程的最終結(jié)果,而葉綠素?zé)晒鈩t直接反映光合作用光反應(yīng)部分的光系統(tǒng)電子傳遞過(guò)程變化。因此最理想的情況是能夠同步測(cè)量這兩類數(shù)據(jù)。本研究中就使用了光合儀和光合聯(lián)用型FluorCam葉綠素?zé)晒獬上駜x,同步測(cè)量了光合作用光響應(yīng)曲線和CO2相應(yīng)曲線。       圖2. 左:光響應(yīng)曲線;右:CO2相應(yīng)曲線 為了進(jìn)一步驗(yàn)證光系統(tǒng)II受損的機(jī)理過(guò)程,除了葉綠素?zé)晒獯銣鐓?shù)以外,本研究還使用封閉式FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)測(cè)量了OJIP快速熒光動(dòng)力學(xué)曲線。封閉式FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)是目前國(guó)際上唯一可以進(jìn)行葉片OJIP成像測(cè)量的商用儀器。在不需要成像圖的情況下,也可以使用FluorPen葉綠素?zé)晒鈨x測(cè)量OJIP曲線及相應(yīng)參數(shù)。   圖3. OJIP快速熒光動(dòng)力學(xué)參數(shù) 在測(cè)量SOD過(guò)氧化物歧化酶時(shí),需要對(duì)樣品進(jìn)行暗處理和光處理進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)。SL3500 智能LED光源以其高光強(qiáng)、高純度、精確調(diào)控,成為了這一實(shí)驗(yàn)的不二之選。如果使用培養(yǎng)配備SL3500光源的FytoScope植物生長(zhǎng)箱同步調(diào)控光照和溫度,數(shù)據(jù)精度還能進(jìn)一步提高。   圖4. 不同型號(hào)、光質(zhì)的SL3500 智能LED光源  同時(shí)為了確定在微觀尺度,單個(gè)葉綠體的變化,還需要進(jìn)行顯微葉綠素?zé)晒鉁y(cè)量。很遺憾的是,因?yàn)樽髡叩臈l件所限,只能使用普通的熒光顯微鏡。而普通的熒光顯微鏡因?yàn)椴痪邆涿}沖調(diào)制功能,因此只能測(cè)量一個(gè)實(shí)時(shí)的平均熒光強(qiáng)度,根本無(wú)法進(jìn)行真正的葉綠素?zé)晒獯銣鐪y(cè)量。FKM(Fluorescence Kinetic Microscope)多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)是目前國(guó)際上唯一可進(jìn)行亞細(xì)胞級(jí)PAM脈沖調(diào)制葉綠素?zé)晒鉁y(cè)量的儀器,是研究植物/藻類細(xì)胞、葉綠體微觀光合能力必不可少的。無(wú)論是成像質(zhì)量還是測(cè)量真正有意義的光合表型參數(shù),F(xiàn)KM系統(tǒng)都要遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于普通熒光顯微鏡。   圖5. 本研究中使用普通熒光顯微鏡獲得的葉綠素?zé)晒獬上駡D及平均熒光強(qiáng)度   圖6. Nature Plants發(fā)表文章:使用FKM系統(tǒng)測(cè)量秋海棠特異葉綠體熒光成像圖及Fv/Fm最大光化學(xué)效率(Jacobs,2016) 模塊式植物表型分析技術(shù)方案推薦:
基礎(chǔ)方案:LCi T便攜式光合儀+光合聯(lián)用型FluorCam葉綠素?zé)晒獬上駜x+FP110手持式葉綠素?zé)晒鈨x+SL3500 智能LED光源  進(jìn)階方案:LCPro T 全自動(dòng)便攜式光合儀+光合聯(lián)用型FluorCam葉綠素?zé)晒獬上駜x+封閉式FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)(配備OJIP成像功能)+FytoScope植物生長(zhǎng)箱 高級(jí)方案:LCPro T 全自動(dòng)便攜式光合儀+光合聯(lián)用型FluorCam葉綠素?zé)晒獬上駜x+封閉式FluorCam葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)(配備OJIP成像功能)+FytoScope植物生長(zhǎng)箱+FKM多光譜熒光動(dòng)態(tài)顯微成像系統(tǒng)
Rusaczonek A, et al. 2015. Role of phytochromes A and B in the regulation of cell death and acclimatory responses to UV stress in Arabidopsis thaliana. Journal of Experimental Botany DOI: 10.1093/jxb/erv375 Jacobs M, et al. 2016. Photonic multilayer structure of Begonia chloroplasts enhances photosynthetic efficiency. Nature Plants, doi:10.1038/nplants.2016.162
 
關(guān)鍵詞: 熒光 葉綠素 測(cè)量 光合 成像
 
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