受激損耗顯微鏡、基態(tài)損耗（GSD）和飽和結構照明技術都基于非線性光學技術，需要應用多個高強度脈沖激光，利用特定調制濾波器控制激發(fā)光束的幾何形狀（被稱為點擴散函數(shù)工程學）。STED設備利用光柵掃描成像，與單光子共聚焦顯微鏡相似。與之對比，隨機光學重建顯微鏡（STED）是一種單分子成像方法，它憑借整個分子群體中少數(shù)分子的激活，依次成像，實現(xiàn)單個發(fā)射分子的定位。這個教程展示了STED和STORM技術的異同。

教程中，兩個虛擬細胞在窗口分別顯示了細胞核（深灰色）和周圍的細胞質（淺灰色）。細胞中的光轉換熒光基團好似綠色的小星球。操作時，請點擊Auto按鈕和調整速度控制按鈕。當STED細胞被激發(fā)激光、損耗激光一同掃描時，STORM細胞中的熒光分子被依次光活化、定位和光漂白。請注意STED是一個掃描技術，而STORM隨機為少數(shù)單個分子成像。