上海光學(xué)儀器廠,曾經(jīng)為發(fā)展民族工業(yè),填補(bǔ)國內(nèi)空白,奠定了國家光學(xué)工業(yè)的系列化, 并先后與德國蔡司-歐波同(ZEISS-OPTON)、徠卡(LEICA)等國際著名光學(xué)公司合作生產(chǎn)各類精密光學(xué)儀器。
人工顯微鏡檢查的重要性
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人工顯微鏡檢查的重要性
血細(xì)胞按所屬系列分六大系統(tǒng),即紅細(xì)胞系、粒細(xì)胞系、單核細(xì)胞系、淋巴細(xì)胞系、漿細(xì)胞系和巨核細(xì)胞系。紅細(xì)胞系可分為原紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞、中幼紅細(xì)胞、晚幼紅細(xì)胞、網(wǎng)織紅細(xì)胞、成熟紅細(xì)胞六個階段。有核紅細(xì)胞實際上是未成熟的紅細(xì)胞。正常人血片中不會出現(xiàn)有核紅細(xì)胞,成人外周血中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞均屬病理現(xiàn)象。可見于:①增生性貧血:最常見于各種溶血性貧血、急性失血性貧血、巨幼紅細(xì)胞性貧血、嚴(yán)重的低色素性貧血。以出現(xiàn)晚幼紅細(xì)胞或中幼紅細(xì)胞為多見。外周血中出現(xiàn)有核紅細(xì)胞表示骨髓中紅細(xì)胞系增生明顯活躍;②紅血病、紅白血?。汗撬柚杏字杉t細(xì)胞異常增生并釋放入血,以原紅細(xì)胞、早幼紅細(xì)胞為多見;③髓外造血:骨髓纖維化時,脾、肝、淋巴結(jié)等組織恢復(fù)胚胎時期的造血功能,這些組織因缺乏對血細(xì)胞釋放的調(diào)控能力,幼稚血細(xì)胞大量進(jìn)入外周血。各發(fā)育階段的幼紅細(xì)胞都可見到,并可見到幼稚粒細(xì)胞及巨核細(xì)胞;④其他:如骨髓轉(zhuǎn)移癌、嚴(yán)重缺氧等。
患者王某某,性別男,年齡24歲,因主訴高熱、畏寒3天,頭痛2天于2012年2月17日入院。既往個人史:5歲左右診斷為“地中海貧血”,行脾切除術(shù),14歲左右行扁桃體切除術(shù)。入院以來,共查過4次血常規(guī)。
該患者診斷為地中海貧血,鏡下可見較多晚幼紅細(xì)胞和中幼紅細(xì)胞。白細(xì)胞分類計數(shù)時,需通過白細(xì)胞校正值公式對白細(xì)胞進(jìn)行校正。白細(xì)胞校正值公式(Y為100個白細(xì)胞中有核紅細(xì)胞的數(shù)量):白細(xì)胞的校正值=100×校正前白細(xì)胞數(shù)/(100+Y)
血細(xì)胞分析儀對該患者標(biāo)本進(jìn)行分析時,錯把有核紅細(xì)胞當(dāng)作淋巴細(xì)胞,使白細(xì)胞假性增高,如果沒對白細(xì)胞進(jìn)行校正,可能會對臨床造成誤診。通過上述1例特殊病例分析, 在進(jìn)行自動血細(xì)胞分析儀的同時作顯微鏡檢查具有不可替代的重要性,因為目前國內(nèi)使用的血細(xì)胞分析儀都是根據(jù)細(xì)胞的體積大小分類,它不能深人到細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行分析, 故不能識別血細(xì)胞的異常結(jié)構(gòu),如異常細(xì)胞、中毒顆粒、瘧原蟲等, 因此建議在做血液自動分析時, 同時做顯微鏡檢查, 以保證結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性, 以免漏檢或誤診。
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特種物鏡
上述物鏡基礎(chǔ)上,為達(dá)到某些特定觀察效果而制造的物鏡。如:相差物鏡,帶校正環(huán)物鏡,帶視場光闌物鏡,無應(yīng)變物鏡,無熒光物鏡,無蓋片物鏡,長工作距離物鏡等。帶校正環(huán)物鏡:在物鏡的中部裝有環(huán)裝的調(diào)節(jié)環(huán),當(dāng)轉(zhuǎn)動調(diào)節(jié)環(huán)時,可調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)透鏡組之間的距離,從而校正由蓋玻片厚度不標(biāo)準(zhǔn)引起的覆蓋差.調(diào)節(jié)環(huán)上的刻度可從0.11 .023,在物鏡的外殼上也標(biāo)科有此數(shù)字,表明可校正蓋玻片從0.11-0.23mm厚度之間的誤差。
帶視場光闌物鏡:在物鏡鏡筒內(nèi)的上部裝有虹彩光闌,外方也可以旋轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)環(huán),轉(zhuǎn)動時可調(diào)節(jié)光闌孔徑的大小,這種結(jié)構(gòu)的物鏡是高級的油浸物鏡,它的作用是在暗視場鏡檢時,往往由于某些原因而使照明光線進(jìn)入物鏡,使視場背景不夠黑暗,造成鏡檢質(zhì)量的下降.這時調(diào)節(jié)光闌的大小,使背景變黑,使被檢物體更明亮,增強(qiáng)鏡檢效果.另一作用是當(dāng)縮小光闌時。物鏡的有效直徑也隨之縮小,改變孔徑角,從而相應(yīng)地起到降低數(shù)值孔徑而增大焦深的作用。
無應(yīng)變物鏡:這種物鏡在透鏡組的裝置中克服了應(yīng)力的存在,是專門作為透射式偏光鏡檢用的物鏡,能達(dá)到更佳的偏光鏡檢效果。在物鏡外面常常標(biāo)有PO或POL的字樣。
無熒光物鏡:是專門用于落射式熒光顯微鏡上的物鏡。這種物鏡即使受到很強(qiáng)烈的激發(fā)光源也不發(fā)出熒光。因此背景不發(fā)熒光,可以得到清晰明亮的圖像。這種鏡頭外表面標(biāo)記有UVFL的字樣。
無蓋片物鏡:有些被檢物體,如涂抹制片等,上面不能加用蓋玻片,這樣在鏡檢時應(yīng)使用無蓋片物鏡,否則圖像質(zhì)量將明顯下降,特別是在高倍鏡檢時更為明顯。這種物鏡的外殼上常標(biāo)刻NC,同時在蓋玻片厚度的位置上沒有0.17的字樣,而標(biāo)刻著“0”。
長工作距離物鏡:這種物鏡是倒置顯微鏡的專用物鏡, 它的焦距大于普通物鏡,是為了滿足組織培養(yǎng),懸浮液等材料的鏡檢而設(shè)計這種物鏡。相差物鏡:這種物鏡是由于相差鏡檢術(shù)的專用物鏡,其特點(diǎn)是在物鏡的后焦平面處裝有相板。筒長無限的顯微物鏡有一種所謂筒長無限的顯微物鏡,這種物鏡的后方一般帶有輔助物鏡(也叫補(bǔ)償物鏡或鏡筒物鏡),被觀察物體位于物鏡前焦點(diǎn)上,經(jīng)過物鏡以后,成像在無限遠(yuǎn),再經(jīng)過輔助物鏡成像在輔助物鏡的焦平面上.在物鏡和輔助物鏡之間是平行光,所以中間距離比較自由一些,可以加入棱鏡等光學(xué)元件。
物鏡的識別
物鏡通常都標(biāo)有表示物鏡光學(xué)性能和使用條件的一些數(shù)字和符號。如“40/0.65”和“160/0.17”。此處的40表示它的放大倍數(shù)(有的寫成40×或40:1);0.65表示它的“數(shù)值孔徑”(有的寫成N.A.0.65或A. 0.65);160表示使用該物鏡時,顯微鏡的機(jī)械筒長應(yīng)為160mm(所謂機(jī)械筒長是指取下物鏡和目鏡以后,所剩下的鏡筒長度。顯微鏡的機(jī)械筒長現(xiàn)已統(tǒng)一規(guī)定為160mm);0.17表示使用該物鏡時,蓋玻片的厚度應(yīng)為0.17mm。有些低倍物鏡,在有、無蓋玻片的情況下都可以使用,所以不標(biāo)0.17 而代之以橫線“-”,如果標(biāo)記的是0,則表示不需要加蓋玻片。有些油鏡上標(biāo)有“油(或oil)”字。
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查看詳細(xì)激光顯微切割技術(shù)及其在醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用
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用于激光顯微切割的植物組織制片技術(shù)的改進(jìn):激光顯微切割技術(shù)最初是從醫(yī)學(xué)中發(fā)展起來的。而植物細(xì)胞與動物細(xì)胞相比有很大的差異,植物細(xì)胞具有的細(xì)胞壁和液泡,尤其是多年生木本植物,存在細(xì)胞壁的次生加厚生長,更增加了組織樣品制備的難度。而組織制備必須兼顧組織學(xué)和生物化學(xué)上的特性,既要使組織在視覺形態(tài)上盡可能完好,且同時能最大限度地回收核酸和蛋白質(zhì)。近期有研究表明,對激光顯微切割技術(shù)的參數(shù)作少許改變,就可以成功地應(yīng)用于植物研究,從而在組織甚至細(xì)胞水平上革新對植物的組織、細(xì)胞的分子生物學(xué)研究。雖然最初的組織制備過程和切割條件的優(yōu)化會是一個艱巨而復(fù)雜的過程,但對于植物學(xué)研究來說,這幾乎是保證后續(xù)的DNA、RNA和蛋白質(zhì)分析最為關(guān)鍵的步驟。
1.切片方法的選擇與優(yōu)化
一般顯微切割技術(shù)的樣品采用快速的冰凍制片法。該方法整個過程簡便、耗時短,只需將組織用固定液固定之后再用包埋劑(例如OCT或者水等)包埋,最后在冰凍切片機(jī)上完成切片。冷凍組織提供了高質(zhì)量可回收的大分子,故激光顯微切割技術(shù)是切割動物組織時優(yōu)先選用冰凍制片法。但是冰凍切片法也存在一些缺點(diǎn),如頻繁的冷凍會使組織內(nèi)產(chǎn)生大的冰晶從而破壞了組織學(xué)特征,增加了形態(tài)辨認(rèn)的難度。植物樣品比動物樣品的含水量要大得多,成熟的植物細(xì)胞中央大液泡可占據(jù)細(xì)胞體積的90%以上,其中的水分在樣品的冷凍過程中極易形成冰晶,從而破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。因此常規(guī)冰凍切片法容易造成植物切片卷曲或斷裂及細(xì)胞破碎等問題。
若對常規(guī)冰凍制片方法加以改進(jìn),使組織在制片過程中保持完好,則冰凍制片法就可以適合植物切片。如快速冷凍法能使水分在毫秒或者更短的時間內(nèi)結(jié)晶,由于結(jié)晶的過程非常迅速,致使細(xì)胞內(nèi)外的介質(zhì)變得更為黏稠,無法形成較大的冰晶,因而植物樣品能保持良好的形態(tài)結(jié)構(gòu)。另外,還可以采用添加冷凍保護(hù)劑的方法。冷凍保護(hù)劑的作用機(jī)理是保護(hù)劑與組織細(xì)胞中的水分結(jié)合,降低細(xì)胞內(nèi)溶液的冰點(diǎn),使形成冰晶或較大冰晶的機(jī)會減小,從而減輕細(xì)胞內(nèi)冰晶對細(xì)胞及其組分的損傷。根據(jù)以上特性,陳丹等人以蔗糖作為冷凍保護(hù)劑,采用液氮作為速凍劑,建立了蔗糖保護(hù)-液氮速凍法,較好地保存了植物樣品的細(xì)胞結(jié)構(gòu),從而獲得薄而結(jié)構(gòu)完整的切片。這種方法適用于植物多種花器官,并且通過某些細(xì)節(jié)上的改進(jìn),可以推廣到植物體的各種組織和器官。目前已經(jīng)有一些采用冰凍切片法制片,進(jìn)一步用激光顯微切割技術(shù)從細(xì)胞水平和分子水平研究植物的報道。另一種制片方法是石蠟制切片法。雖然石蠟切片能保存完好的組織形態(tài)學(xué)特征,但是固定液可能會改變大分子的結(jié)構(gòu)從而影響它們的完整性和可提取性。實驗表明,加入沉淀類固定劑可以改善石蠟切片的性能。沉淀類固定劑(例如乙醇或丙酮)比醛類固定劑(例如甲醛等醛類物質(zhì))要好,因為前者對核酸和蛋白質(zhì)有更好的復(fù)性作用。
石蠟包埋與冷凍組織切片相比,會對總體可提取的RNA和蛋白質(zhì)有一定的降解作用。但仍可從動植物組織中獲得相當(dāng)數(shù)量的RNA在RT-PCR擴(kuò)增之后作RNA表達(dá)分析。如Kerk等將LCM應(yīng)用到玉米、西紅柿的各種組織的石蠟切片中,從分離的不同細(xì)胞中分別提取RNA,擴(kuò)增之后可適用于基因表達(dá)研究。目前用于激光顯微切割的植物組織制片方法在不斷改進(jìn)和創(chuàng)新以適應(yīng)激光顯微切割技術(shù)的應(yīng)用。Noriko Inada用快速微波石蠟法制備擬南芥葉片的切片。此方法制作的切片完好地保存了擬南芥葉片的形態(tài),激光顯微切割之后從葉片表皮和葉肉細(xì)胞中提取的RNA在RT-PCR之后足以應(yīng)用于下游的微陣列等分析。
2.加強(qiáng)目標(biāo)細(xì)胞識別的準(zhǔn)確性
由于激光顯微切割技術(shù)的組織切片與標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)和電子顯微鏡技術(shù)的組織學(xué)標(biāo)本有差別,對操作者鑒別與標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)學(xué)有差異的目標(biāo)細(xì)胞的能力提出了更高要求。又由于在激光顯微切割技術(shù)中,載玻片上沒有蓋玻片,使得組織辨認(rèn)更加困難,有時候為了識別一些特殊的細(xì)胞,會對目的細(xì)胞群體進(jìn)行染色,但是有些染色過程不僅加快了活質(zhì)物質(zhì)的降解過程,而且可能會引起細(xì)胞成分發(fā)生未知的改變。用快速免疫染色技術(shù)則可以減少RNA的降解,另外,轉(zhuǎn)基因植物中在特殊細(xì)胞類型里報告基因的表達(dá)也可以用來識別目標(biāo)細(xì)胞。隨著更完善的技術(shù)系統(tǒng)和商業(yè)試劑盒的問世,激光顯微切割技術(shù)向著更加完善的方向發(fā)展,為植物細(xì)胞研究提供了一個便捷可靠的平臺??傊?,近年來激光顯微切割技術(shù)越來越多在植物研究中應(yīng)用,實驗質(zhì)量也在逐步提高, 使這一技術(shù)正成為植物研究者的常用工具。
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掃描電子顯微鏡的四種樣品制備
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掃描電子顯微鏡(SEM)的樣品制備
1 、塊狀試樣的制備
塊狀試樣包括導(dǎo)電性材料和非導(dǎo)電性材料。導(dǎo)電性材料主要是指金屬,一些礦物和半導(dǎo)體材料也具有一定的導(dǎo)電。 這類材料的試樣制備,只要使試樣大小不得超過儀器規(guī)定(如試樣直徑最大為φ25mm,最厚不超過20mm等),經(jīng)過清洗,然后用雙面膠帶粘在載物盤,再用導(dǎo)電銀漿連通試樣與載物盤(以確保導(dǎo)電良好),等銀漿干了之后就可放到掃描電鏡中直接進(jìn)行觀察。?非導(dǎo)電性的塊狀材料試樣的制備基本可以像導(dǎo)電性塊狀材料試樣的制備一樣,只是在導(dǎo)電性材料制備基礎(chǔ)上需在樣品表面噴鍍一層導(dǎo)電層即可。對非導(dǎo)電的試樣,例如陶瓷、玻璃、有機(jī)物等,在電子束掃描下,表面會積累負(fù)電荷,使樣品表面形成一個較強(qiáng)的負(fù)電位,產(chǎn)生充電現(xiàn)象。樣品的負(fù)電位抵消掉入射電子部分能量,使二次電子發(fā)射和運(yùn)動不穩(wěn)定。在電子探針的圖像觀察、成分分析時,會產(chǎn)生電子束漂移、表面熱損傷等現(xiàn)象,使分析點(diǎn)無法定位、圖像無法法聚焦。
2、粉末試樣的制備粉末樣品制備,
首先在載物盤上粘上雙面膠帶,然后取少量粉末試樣放在膠帶上的靠近載物盤圓心部位,接著用吹氣橡膠球朝載物盤徑向朝外方向輕吹,以使粉末可以均勻分布在膠帶上,也可以把粘結(jié)不牢的粉末吹走。然后在膠帶邊緣涂上導(dǎo)電銀漿以連接樣品與載物盤,等銀漿干了之后就可以進(jìn)行最后的鍍一層導(dǎo)電膜。對于小于5μm小顆粒,要得到較好的分析結(jié)果,最好將粉體用壓片機(jī)壓制成塊狀,此時標(biāo)樣也應(yīng)用粉體壓制。對細(xì)顆粒的粉體分析時,特別是對團(tuán)聚體粉體形貌觀察時,需將粉體用酒精或水在超聲波機(jī)內(nèi)分散,再用滴管把均勻混合的粉體滴在試樣座上,待液體烘干或自然干燥后,粉體靠表面吸附力即可粘附在試樣座上。
3、溶液試樣的制備
對于溶液試樣一般采用薄銅片作為載體。首先,在載物盤上粘上雙面膠帶,然后粘上干凈的薄銅片,然后把溶液小心滴在銅片上,等干了之后觀察析出來的樣品量是否足夠,如果不夠再滴一次,等再次干了之后就可以涂導(dǎo)電銀漿和鍍膜了。
4、生物試樣的制備
掃描電鏡生物樣品的制備,必須滿足以下要求:①保持完好的組織和細(xì)胞形態(tài);②充分暴露欲觀察的部位;③良好的導(dǎo)電性和較高的二次電子產(chǎn)額;④保持充分干燥的狀態(tài)。一般采用化學(xué)方法制備樣品,其程序通常是:清洗→化學(xué)固定→干燥→鍍膜。 ? ?清洗 某些生物材料表面常附血液、細(xì)胞碎片、消化道內(nèi)的食物殘渣、細(xì)菌、淋巴液及粘液等異物,掩蓋著欲觀察的部位,因而,需要在固定之前用生理鹽水或等滲緩沖液等把附著物清洗干凈。亦可用 5%碳酸鈉沖洗或酶消化法去除這些異物。
(1)固定通常采用醛類(主要是戊二醛和多聚甲醛)與四氧化鋨雙固定,也可用四氧化鋨單固定。四氧化鋨固定不僅可良好地保存組織細(xì)胞結(jié)構(gòu),而且能增加材料的導(dǎo)電性和二次電子產(chǎn)額,提高掃描電子顯微圖像的質(zhì)量。這對高分辨掃描電子顯微術(shù)是極端重要的。
(2)干燥固定后通常采用臨界點(diǎn)干燥法。其原理是:適當(dāng)選擇溫度和壓力,使液體達(dá)到臨界狀態(tài)(液態(tài)和氣相間界面消失),從而避免在干燥過程中由水的表面張力所造成的樣品變形。對含水生物材料直接進(jìn)行臨界點(diǎn)干燥時,水的臨界溫度和壓力不能過高(37.4℃,218帕)。
(3)鍍膜將干燥的樣品用導(dǎo)電性好的粘合劑或其他粘合劑粘在金屬樣品臺上,然后放在真空蒸發(fā)器中噴鍍一層50~300埃厚的金屬膜。
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查看詳細(xì)使用顯微鏡基礎(chǔ)步驟和注意事項
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一.顯微鏡使用的一般步驟:
1、取鏡與安放:右手握鏡臂,左手托鏡座放在前方稍偏左。
2、對光:(1)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對準(zhǔn)通光孔。(2)選較大的光圈對準(zhǔn)通光孔,左眼注視目鏡,轉(zhuǎn)動反光鏡,使光線通過通光孔反射到鏡筒內(nèi),通過目鏡,可以看到白亮的視野。
3低倍鏡觀察:
(1)標(biāo)本放在載物臺上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對通光孔的中心。
(2)轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止(此時實驗者的眼睛應(yīng)當(dāng)看物鏡頭與標(biāo)本之間,以免物鏡與標(biāo)本相撞)。
(3)左眼看目鏡內(nèi),同時反向轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒上升,直到看到物像為止,再稍稍轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
4.高倍鏡觀察:
(1)移動裝片,在低倍鏡下使需要放大觀察的部分移動至視野中央。
(2)轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,移走低倍物鏡,換上高倍物鏡。
(3)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使物像清晰。
(4)調(diào)節(jié)光圈和反光鏡,使視野亮度適宜。
5、使用完畢后,
取下裝片,轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器,逆時針旋出物鏡,旋進(jìn)鏡頭盒;取出目鏡,插進(jìn)鏡頭盒,蓋上。把顯微鏡放正。
二、顯微鏡使用的一些注意問題:
1、等于目鏡的放大倍數(shù)和物鏡的放大倍數(shù)的乘積,該放大倍數(shù)指的是長度或?qū)挾?,而不是面積和體積。
2、物鏡鏡頭長度與放大倍數(shù)成正比;目鏡鏡頭長度與放大倍數(shù)成反比。高倍鏡鏡面較小,低倍鏡鏡面較大
3、視野:視野是指一次所能觀察到的被檢標(biāo)本的范圍。視野的大小與放大倍數(shù)成反比,放大倍數(shù)越小,視野范圍越大,看到的細(xì)胞數(shù)目越多,工作距離越長;放大倍數(shù)越大,視野范圍越小,看到的細(xì)胞數(shù)目越少,工作距離越短。
4、鏡像亮度:鏡像亮度是指視野里所看到的像的亮暗程度。它與放大倍數(shù)成反比,即在光源一定的情況下,放大倍數(shù)越大,視野越暗。在用高倍鏡或物鏡觀察標(biāo)本時,根椐實際情況可使凹面反光鏡、大光圈來增強(qiáng)光源,以改善視野亮度而使物像明亮清晰。
5、視野中物像移動與標(biāo)本移動的關(guān)系:視野中某觀察對象位于左前方如要移到中央,應(yīng)將裝片或切片向左前方移動。也就是同向移動。原因是視野中物像移動的方向與裝片或切片移動的方向相反。
6、顯微鏡使用時的異?,F(xiàn)象與原因(1)有氣泡:制作裝片不規(guī)范;材料厚薄不均勻;水太少(2)同一視野一部分清晰另一部分不清晰:材料厚薄不均勻(3)視野太亮:光線太強(qiáng);調(diào)節(jié)光圈和反光鏡(4)視野一半亮,一半不亮,反光鏡沒有轉(zhuǎn)到位7、顯微鏡使用時異物的判斷:目鏡、物鏡或裝片上,通常通過移動玻片(是否在玻片上),轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器(是否在物鏡上)來判斷,剩下在目鏡上。
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查看詳細(xì)校準(zhǔn)金相顯微鏡示值誤差的三個方法
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方法一
這一檢定法應(yīng)在不同的放大倍數(shù)條件下進(jìn)行。最寬的單刻線樣板用于檢定放大倍數(shù)最小的物鏡,其余依此類推。(本規(guī)程推薦用單刻線樣板標(biāo)準(zhǔn)器組中最寬和次寬的樣板檢定)將單刻線樣板置于儀器的工作臺上,調(diào)整儀器使樣板在視場出現(xiàn)清晰的象,借助儀器工作臺的微分筒移動樣板,使單刻線的應(yīng)用段連同兩個記號呈現(xiàn)在儀器目鏡的分劃板中;旋轉(zhuǎn)目鏡角度,使樣板的刻線方向與分劃板的刻線垂直,并讀出在單刻線寬度上所包含的分劃板的刻線數(shù)。物鏡的格值C 乘以刻線數(shù)i 即為儀器測得的單刻線寬度值。金相顯微鏡示值誤差δ 可由下式確定:δ=( L標(biāo) ? L測)/L標(biāo)×100%(式中:L 標(biāo) 檢定證書上所標(biāo)明的樣板刻線寬度)用單刻線樣板以相同的方法對各種物鏡分別進(jìn)行檢定,其示值誤差δ 均不超過相關(guān)規(guī)定。
方法二
如被檢儀器的格值是用隨機(jī)0.01mm 測微尺標(biāo)定的,我們可用標(biāo)準(zhǔn)測微尺檢定示值誤差。我們將標(biāo)準(zhǔn)測微尺置于儀器工作臺上,調(diào)整測微尺標(biāo)尺軸線與儀器目鏡分劃板標(biāo)尺軸線平行,并讀出目鏡分劃板i 條刻線里包含測微尺n 條刻線數(shù)。儀器測得的長度L 測= iC,其所對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)測微尺長度為L 標(biāo)=n×0.01mm,則金相顯微鏡的示值誤差為:δ=( L標(biāo) ? L測)/L標(biāo)×100%(式中:L 標(biāo) 檢定證書上所標(biāo)明的標(biāo)準(zhǔn)測微尺長度)用標(biāo)準(zhǔn)測微尺以相同的方法對各種物鏡分別進(jìn)行檢定,其示值誤差δ 均不超過相關(guān)規(guī)定。(實驗室及研究用金相顯微鏡推薦用此方法進(jìn)行檢定)
方法三
在檢定數(shù)碼金相顯微鏡、便攜式視頻金相顯微鏡、萬能金相顯微鏡、圖像分析儀時,我們將單刻線樣板或標(biāo)準(zhǔn)測微尺置于工作臺上,用儀器顯示器像素長度值,可直接讀出單刻線的寬度值或測微尺的長度值。金相顯微鏡示值誤差δ 可由下式確定:δ=( L標(biāo) ? L測)/L標(biāo)×100%
(式中:L 標(biāo) 檢定證書上所標(biāo)明的樣板刻線寬度和標(biāo)準(zhǔn)測微尺長度。)用上述各級樣板或標(biāo)準(zhǔn)測微尺以相同的方法對各種物鏡分別進(jìn)行檢定,其示值誤差δ 均不超過相關(guān)規(guī)定。2.7. 隨機(jī)0.01mm 測微尺示值誤差我們將測微尺置于阿貝比長儀工作臺上,調(diào)整測微尺使其標(biāo)尺軸線與工作臺移動方向平行并對好零位,按每20 格測量一次,直至第100 格,其誤差不大于3μm。
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查看詳細(xì)紫外線燈管對周圍環(huán)境的改變
業(yè)內(nèi)新聞
有媒體報道:用高硼紫外線燈與石英紫外線燈分別對已知不同種細(xì)菌進(jìn)行照射,結(jié)果細(xì)菌在石英玻璃管紫外線燈照射下的存活數(shù)均較少,而在高硼玻璃管紫外線燈照射下較高,故應(yīng)首選石英玻璃紫外線燈。目前紫外線燈的質(zhì)量也有學(xué)者作過調(diào)查,8只全新紫外線燈經(jīng)強(qiáng)度檢測儀檢測,強(qiáng)度為(47.4 ± 3.9)μW/cm,根據(jù)我國《殺菌管理條例》對新燈管的強(qiáng)度要求不得低于100μW/cm,故8只全新燈管無一符合標(biāo)準(zhǔn),所以評定紫外線燈管的優(yōu)劣不能根據(jù)新舊、是否產(chǎn)生藍(lán)色光、是否形成臭氧作判斷,必須檢測其強(qiáng)度。
紫外線燈管在有無反光罩或不同材料的反光罩下所測得的強(qiáng)度差異較大,如1支在木板式反光罩下的燈經(jīng)測試強(qiáng)度 7μW/cm,應(yīng)屬不合格燈管,但改置在拋光鋁制反光罩下,強(qiáng)度升高,即可達(dá)合格要求,但這種利用反光罩提高照射強(qiáng)度而改判燈管合格是欠妥的,理由是:因燈管所放射出的紫外線強(qiáng)度實際并未改變。對新燈管的強(qiáng)度測定應(yīng)在無反光設(shè)備的條件下進(jìn)行,為方便工作,可經(jīng)實驗測定各種反光罩的修正系數(shù),將帶反光罩時測得的結(jié)果除以修正系數(shù),即可得不帶反光罩時照射強(qiáng)度值。例:1 只燈管在無罩下強(qiáng)度為100μW/cm時,而改置在拋光鉆罩下強(qiáng)度為155μW/cm,則修正系數(shù)為:155/100=1.55。以后凡在拋光鋁罩下測得的強(qiáng)度均應(yīng)除以1.55。這樣就可將部分強(qiáng)度不夠標(biāo)準(zhǔn)的燈管淘汰,以便更穩(wěn)妥、有效地實施紫外線殺菌。
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查看詳細(xì)傳感器技術(shù)
業(yè)內(nèi)新聞
在今后將有十分廣闊的發(fā)展前景。目前新型傳感器技術(shù)包括固態(tài)硅傳感器技術(shù)、光纖傳感器技術(shù)、生物芯片技術(shù)、基因芯片技術(shù)、圖像傳感器技術(shù)、全固態(tài)慣性傳感器技術(shù)、多傳感器技術(shù)等。十二五將以智能傳感器作為重點(diǎn),進(jìn)行關(guān)鍵技術(shù)攻關(guān)。
在這一領(lǐng)域,重點(diǎn)發(fā)展新原理、新效應(yīng)的傳感技術(shù),傳感器智能技術(shù),傳感器網(wǎng)絡(luò)技術(shù),微型化和低功耗技術(shù),以及傳感器陣列及多功能、多傳感參數(shù)傳感器的設(shè)計、制造和封裝技術(shù)。
1、工業(yè)無線通信網(wǎng)絡(luò)技術(shù)
工業(yè)無線通信網(wǎng)絡(luò)作為有線工業(yè)通信網(wǎng)絡(luò)的補(bǔ)充,已經(jīng)得到普遍認(rèn)同。我國在工業(yè)無線通信網(wǎng)絡(luò)方面已經(jīng)取得一定成果,繼續(xù)加強(qiáng)開發(fā)有可能在這方面走在世界前列。而在這一領(lǐng)域,宜重點(diǎn)關(guān)注工業(yè)無線通信網(wǎng)絡(luò)標(biāo)準(zhǔn)的制訂,以及工業(yè)無線通信網(wǎng)絡(luò)認(rèn)證技術(shù)。
2、功能安全技術(shù)及安全儀表
功能安全技術(shù)及安全儀表是國際上最近發(fā)展的新技術(shù),目的是防止工業(yè)設(shè)施產(chǎn)生異常事故,以致危及人身與設(shè)備的安全。這項技術(shù)及相關(guān)儀表產(chǎn)品已經(jīng)獲得用戶的廣泛關(guān)注。我國大型石化工程建設(shè)項目已經(jīng)規(guī)定必須事先進(jìn)行功能安全的評估。我國工業(yè)設(shè)施突發(fā)事故發(fā)生比較頻繁,研究安全儀表技術(shù)有很重要的意義。這一領(lǐng)域重點(diǎn)發(fā)展的產(chǎn)品包括:達(dá)到整體安全等級SIL3的控制系統(tǒng)、溫度變送器、壓力/壓差變送器、電動執(zhí)行機(jī)構(gòu)/閥門定位器的開發(fā)與應(yīng)用,同時也包括安全儀表系統(tǒng)評估技術(shù)方3、法研究和評估工具的開發(fā)。
3、精密加工技術(shù)和特殊工藝技術(shù)
我國高中檔檢測設(shè)備與國外的差距很大程度上是精密加工和特殊工藝技術(shù)的差距。當(dāng)前的重點(diǎn)是多維精密加工工藝,精密成型工藝,球面、非球面光學(xué)元件精密加工工藝,晶體光學(xué)元件磨削工藝,特殊光學(xué)薄膜設(shè)計與制備工藝,精密光柵刻劃復(fù)制工藝,特殊焊接、粘接、燒結(jié)等特殊連接工藝,專用芯片加工技術(shù),MEMS技術(shù),全自動微量、痕量樣品分析與處理技術(shù)等。
4、分析儀器功能部件及應(yīng)用技術(shù)
對分析儀器的關(guān)鍵部件,如檢測器、四級桿、高壓泵、閥門、磁體、專用光源和電源、全自動進(jìn)樣器、長壽命高靈敏電極、中階梯光柵、高精度電子引伸計等關(guān)鍵零部件進(jìn)行攻關(guān),提高儀器整機(jī)的穩(wěn)定性和可靠性。同時開發(fā)針對不同應(yīng)用領(lǐng)域的譜圖和數(shù)據(jù)庫。
5、智能化技術(shù)
智能化技術(shù)的特點(diǎn)是:具有自校準(zhǔn)、自檢測、自診斷、自適應(yīng)功能具有復(fù)雜運(yùn)算和誤差修正的數(shù)據(jù)處理能力具有自動完成指定測量任務(wù)的功能用于科學(xué)測試儀器和控制系統(tǒng)的專家系統(tǒng)軟件等。
6、系統(tǒng)集成和應(yīng)用技術(shù)
當(dāng)前應(yīng)重點(diǎn)發(fā)展不同生產(chǎn)廠商控制系統(tǒng)之間的無縫連接集成技術(shù)大型項目的自動化設(shè)備主供應(yīng)商應(yīng)具備的項目策劃、設(shè)計、組織、采購、驗收、調(diào)試等項目管理技術(shù)。
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出自: 金相顯微鏡 轉(zhuǎn)載時請標(biāo)明出處。
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熒光顯微鏡選擇光源問題
業(yè)內(nèi)新聞
我們在選擇熒光顯微鏡的光源時,要注意的是弧光的尺寸,就是光源發(fā)光區(qū)的大小,例如50W的汞燈,它的弧光尺寸為110X0.13MM,200W的弧光尺寸為212X0.15MM,而100W的弧光尺寸為0.125×0.125m,能否正好充滿系統(tǒng)的入瞳使光能充分的利用,對一個優(yōu)良的熒光顯微鏡,以及各種倍率的物鏡“光能”皆可充分有效的利用是一個值得關(guān)注的指標(biāo)。在熒光顯微鏡設(shè)計中,光源的選擇在總體設(shè)計中是至關(guān)重要的,它決定了儀器的使用范圍和成本,也反映了儀器的檔次。實驗室以上的顯微鏡應(yīng)以汞燈為主光源,簡易型(專用)的顯微鏡則常用以鹵素?zé)糇鳛橹鞴庠础?/p>
其次我們還要考慮的問題就是它的功率,是采用大功率的燈泡,還是選擇低瓦數(shù)的燈泡呢?原則上講應(yīng)盡可能選用低瓦數(shù)的光源,無疑這對結(jié)構(gòu)設(shè)計和成本是有利的。但過低的瓦數(shù)在激發(fā)時不能激發(fā)出熒光或者發(fā)出的熒光不穩(wěn)定,就不能使用了。但是能否激發(fā)出熒光又與整個成像系統(tǒng)的光能利用有關(guān)系,如何能充分合理有效地利用光能,瓦數(shù)是可以降下來,但是如果我們單純地追求大功率光源作為熒光檢測并不可取,因為它會引發(fā)熒光的衰減和猝滅。當(dāng)前供應(yīng)的落射熒光顯微鏡僅配備100W的汞燈或氙燈和鹵素?zé)簟?/p> 查看詳細(xì)