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上海光學(xué)儀器廠，曾經(jīng)為發(fā)展民族工業(yè)，填補(bǔ)國內(nèi)空白，奠定了國家光學(xué)工業(yè)的系列化， 并先后與德國蔡司-歐波同（ZEISS-OPTON）、徠卡（LEICA）等國際著名光學(xué)公司合作生產(chǎn)各類精密光學(xué)儀器。

偏光顯微鏡常識

常見問題, 技術(shù)支持

偏光顯微鏡在光學(xué)顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中插入了起偏振鏡和檢偏振器，用以檢查樣品的各向異性和雙折射性的顯微鏡。起偏振鏡和檢偏振鏡都是由偏光棱鏡或偏光板的尼科耳(nicol)棱鏡制成。前者安裝在光源與樣品之間，后者安裝在接物鏡與接目鏡之間或接目鏡之上。在生物樣品中，肌肉纖維、骨骼和牙齒等具有各向異性，淀粉粒、染色體和紡錘體等具有雙折射性，因此被用于組織細(xì)胞的化學(xué)研究。光源最好用單波長光線。由于生物樣品比金相、巖石或結(jié)晶的雙折射性顯著微弱，所以有時也借敏感的檢偏振板造成的相加相減現(xiàn)象而利用其干涉色。

偏光顯微鏡：http://www.shoif.com/old_version/industry/pianguang/

 

偏振光的基礎(chǔ)知識

一、自然光和偏振光

光是一種電磁波，屬于橫波(振動方向與傳播方向垂直)。一切實際的光源，如日光、燭光、日光燈及鎢絲燈發(fā)出的光都叫自然光。這些光都是大量原子、分子發(fā)光的總和。雖然某一個原子或分子在某一瞬間發(fā)出的電磁波振動方向一致，但各個原子和分子發(fā)出的振動方向也不同，這種變化頻率極快，因此，自然光是各個原子或分子發(fā)光的總和，可認(rèn)為其電磁波的振動在各個方向上的幾率相等。

自然光在窗過某些物質(zhì)，經(jīng)過反射、折射、吸收后，電磁波的振動波以被限制在一個方向上，其他方向振動的電磁波被大大削弱或消除。這種在某個確定方向上振動的光稱為偏振光。偏振光的振動方向與光波傳播方向所構(gòu)成的平面稱為振動面。

二、直線偏振光、圓偏振光及橢圓偏振光

1.直線偏振光

直線偏振光由于光線的振動方向都在同一個平面內(nèi)，所以這偏振光又叫作平面偏振光正對光的傳播方向看去，這種光的振動方向是一條直線，因此又叫直線偏振光或線偏振光。

2.圓偏振光和橢圓偏振光

(1)光的雙折射現(xiàn)象和晶體的光軸

當(dāng)一束光線射入各向異性的晶體中時要分裂為兩束沿不同方向傳播的挑線，這種現(xiàn)象叫雙折射現(xiàn)象發(fā)生雙折射的兩束光線都是偏振光。這兩束光線之一恒遵守光的折射定律，在改變?nèi)肷浞较驎r傳播速度不發(fā)生變化，這條光線稱為尋常光線，用o表示;另一束光線不遵守折射定律，當(dāng)入射光線方向變化時，它的傳播速度也隨之變化，光的折射率不同，這束光稱為非常光用e來表示。

在各向異性晶體中，存在有某些特殊方向，在這些方向上不發(fā)生雙折射，尋常光線和非常光線傳播方向和傳播速度相同，這些方向稱為]晶體的光軸有一個光軸的晶體叫一軸晶，有兩個光軸的晶體叫二軸晶。對于二軸晶，雙折射后的兩束光線均為非常為光線。

(2)波晶片

波晶片簡稱波片，可用來改變或檢驗光的偏振情況。當(dāng)自然光沿一軸晶光軸入射時，不發(fā)生雙折射現(xiàn)象。如果垂直于晶體光軸入射時產(chǎn)生的o光和e光仍沿原入射方向傳播，但傳播速度和折射率不同，且傳播速度相差最大。如果在平行于一軸晶光軸方向上切下一薄片，這時晶片表面與光軸平持，這樣制得的晶片叫]波晶片當(dāng)偏振光垂直于波片光軸入射時，在波片內(nèi)形成傳播方向相同但傳播速度不同的o光和e光。

如果波片越厚，o光和e光線波波長的整數(shù)倍，這種波片叫全波片。依此類推，還有半波片和1/4波片等等。

(3)圓偏振光和橢圓偏振光的形成

一束自然光以垂直于一軸晶的光軸方向入射所產(chǎn)生的振動面互相垂直的兩束偏振光是不相干的。因為自然光是由光源中的不同分子和原子產(chǎn)生的，沒有固定的位相差，所以不發(fā)生干涉。但是當(dāng)一束單色偏振光通過雙折射物質(zhì)[/url]后，所產(chǎn)生的兩束偏振光是可以相干的。相當(dāng)于兩個互相垂直的同周期的振動的合成。

當(dāng)一束偏振光垂直于一軸晶光軸入射時產(chǎn)生兩束偏振光(o光和e光)。由于o光和e光的相位差不同而合成為直線偏振光、]圓偏振光橢圓偏振光。O光和e光的相位差由兩束光在晶片中折射率和晶片的厚度決定。設(shè)No、Ne分別為o光和e光的折射率，d為晶片的厚度，所產(chǎn)生的相位差為Δφ。則。改變晶片的厚度可得不同相位差的o光和e光。當(dāng)Δφ為π/2的偶數(shù)倍時可產(chǎn)生直線偏振光;當(dāng)Δφ為π/2的奇數(shù)倍時，可產(chǎn)生圓偏振光;當(dāng)Δφ不是π/2的整數(shù)倍時均可產(chǎn)生橢圓偏振光。圓偏振光的振動端點在光的傳播方向上投影為一個圓，橢圓偏振光的振動端點在光的傳播方向上投影為一個橢圓。圓偏振光和橢圓偏振光在每一瞬間只有一個振動方向，所以仍屬偏振光。

 

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顯微鏡測微尺的使用

技術(shù)支持

如何用目鏡測微尺測量
顯微測微尺是用來測量顯微鏡視場內(nèi)被測物體大小、長短的工具, 包括目鏡測微尺(分劃目鏡)和測微臺尺。用時需兩者配合使用。目鏡測微尺系在目鏡的焦面上裝有一刻度的鏡片而成, 其每一刻度值為0.1mm, 測微臺尺為一特制的載玻片, 其中央有刻尺度, 每一小格的值為0.01mm, 使用時, 先將目鏡測微尺插入目鏡管, 旋轉(zhuǎn)前透鏡將目鏡內(nèi)的刻度調(diào)清楚, 在把測微臺尺放在載物臺上, 調(diào)焦點到看清楚臺尺的刻度。觀察時先將兩者的刻度從“0”點完全重疊, 在向右找出兩尺又在何處重疊, 然后記下兩尺重疊的格數(shù), 以便計算出測微尺每小格在該放大率下的實際大小。

測量時不再用測微臺尺, 如改變顯微鏡的放大賠率, 則需對目鏡測微尺重新進(jìn)行標(biāo)定.

計算公式: 臺尺重疊格數(shù)×10

目尺重疊格數(shù)

例如:目鏡測微尺上的第五小格與測微臺尺上的第八格重疊=8×10

則目鏡測微尺上的每小格:16um=(8×10)/5

測量時不再用測微臺尺, 如改變顯微鏡的放大賠率, 則需對目鏡測微尺重新進(jìn)行標(biāo)定.

 

 

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熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求及方法

技術(shù)支持

熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求

(一)載玻片

載玻片厚度應(yīng)在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無明顯自發(fā)熒光。有時需用石英玻璃載玻片。

(二)蓋玻片

蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對不同波長的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片，它可以使熒光順利通過，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。

(三)標(biāo)本

組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重迭或雜質(zhì)掩蓋，影響判斷。

(四)封裱劑

封裱劑常用甘油，必須無自發(fā)熒光，無色透明，熒光的亮度在pH8.5～9.5時較亮，不易很快褪去。所以，常用甘油和0.5mol/l pH9.0～9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。

(五)鏡油

一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時，必須使用鏡油，最好使用特制的無熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對圖像質(zhì)量略有影響。

三、使用熒光顯微鏡的注意事項

(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。

(2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛完全適應(yīng)暗室，再開始觀察標(biāo)本。

(3)防止紫外線對眼睛的損害，在調(diào)整光源時應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

(4)檢查時間每次以1～2h為宜，超過90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱；標(biāo)本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱；所以，最多不得超過2～3h。

(5)熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié) 省時間，保護(hù)光源。天熱時，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開始就記錄使用時間。燈熄滅后欲再用時，須待燈泡充分冷卻后才能點燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點燃光源。

(6)標(biāo)本染色后立即觀察，因時間久了熒光會逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時間，防止封裱劑蒸發(fā)。

(7)熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn)：一般分為四級，即“一”—無或可見微弱熒光?！?”—僅能見明確可見的熒光?！?+”—可見有明亮的熒光。“+++”—可見耀眼的熒光。

四、熒光圖像的記錄方法

熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態(tài)學(xué)特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結(jié)果時，必須將二者結(jié)合起來綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標(biāo)，即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展，在不同程度上采用客觀指標(biāo)記錄判斷結(jié)果，如用細(xì)胞分光光度計，圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果，也必須結(jié)合主觀的判斷。

熒光顯微鏡攝影技術(shù)對于記錄熒光圖像十分必要，由于熒光很易褪色減弱，要即時攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24。以上。因紫外光對熒光猝滅作用大，如FITC的標(biāo)記物，在紫外光下照射30s，熒光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能將熒光圖像拍攝下來。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統(tǒng)裝置。

XSP-BM22AY 科研級三目熒光顯微鏡

標(biāo)本的制作方法

樣品須經(jīng)過石蠟包埋切片，然后用鐵礬蘇木精染色，普通光鏡觀察效果還可以.

作熒光觀察需用熒光染料DAPI染色，

石蠟切片的過程：

1. 取材: 刀片要求鋒利而薄,組織厚度約2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2～0.3cm為宜. 取材時間越快越好.

2. 固定: 組織取下后應(yīng)立即放入10%福爾馬林(相當(dāng)于4%甲醛)固定.

注意: (1). 固定液量應(yīng)為組織塊體積的40倍.

(2) 固定時間固定時間與使用的固定液種類和組織塊大小, 溫度等有關(guān). 一般為3—24h.

(3)固定溫度大多可在室溫固定, 在低溫(4℃)時間應(yīng)延長.

(4)固定容器應(yīng)大些.

3. 漂洗: 流水沖洗2—10h.

4. 脫水: 從低濃度酒精到高濃度酒精.

70%(數(shù)分鐘)→80%(60-120’)→90%(60-120’)→95%(60-120’)→95%(60-120’)→100%(60-120’)→100%(60-120’).

5. 透明: 組織塊脫水后必須經(jīng)過一種既能與酒精混合又能溶解石蠟的溶劑, 而使石蠟進(jìn)入組織塊. 常用二甲苯, 一般浸泡30m即可.

6. 浸蠟: 組織經(jīng)透明后在熔化的石蠟內(nèi)浸漬的過程稱浸蠟. 一般需經(jīng)2—3次浸漬才能完成, 總時間為3—4h. 用于浸蠟的石蠟熔點為52—56℃.

7. 包埋: 先將熔化的石蠟倒入包埋框再用加熱的鑷子將組織塊放入. 包埋面必須平整. 包埋后石蠟稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.

8. 切片: 修塊→切片→展片→撈片→烤片.

也可作冰凍切片.

熒光染料的配制：

儲藏液：1mg/ml dapi(DMSO、去離子水、pbs都可以溶解)

工作液：通常1μg/ml

染色時須避光，10min左右

用pbs沖去多余染液即可觀察。

我公司熒光顯微鏡產(chǎn)品：http://www.shoif.com/old_version/life/yingguang/

 

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正確使用光學(xué)顯微鏡

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一、正確安裝的問題

使用顯微鏡前，首先要把顯微鏡的目鏡和物鏡安裝上去。目鏡的安裝較為簡單，主要的問題在于物鏡的安裝，由于物鏡鏡頭較貴重，萬一學(xué)生安裝時螺紋沒合好，易摔到地上，造成鏡頭損壞，所以為了保險起見，強(qiáng)調(diào)學(xué)生在安裝物鏡時要用左手食指和中指托住物鏡，然后用右手將物鏡裝上去，這樣即使沒安裝好，也不會摔到地上。

二、正確使用準(zhǔn)焦螺旋的問題

使用準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距，找到物象可以說是顯微鏡使用中最重要的一步，也是學(xué)生感覺最為困難的一步。學(xué)生在操作過程中極易出現(xiàn)以下錯誤：一是在高倍鏡下直接調(diào)焦；二是不管鏡筒上升或下降，眼睛始終在往目鏡中看視野；三是不了解物距的臨界值，物距調(diào)到２～３厘米時還在往上調(diào)，而且轉(zhuǎn)動準(zhǔn)焦螺旋的速度很快。前兩種錯誤結(jié)果往往造成物鏡鏡頭抵觸到裝片，損傷裝片或鏡頭，而第三種錯誤則是學(xué)生使用顯微鏡時最常見的一種現(xiàn)象。針對以上錯誤，教師一定要向?qū)W生強(qiáng)調(diào)，調(diào)節(jié)焦距一定要在低倍鏡下調(diào)，先轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒慢慢下降，物鏡靠近載玻片，但注意不要讓物鏡碰到載玻片，在這個過程中眼睛要從側(cè)面看物鏡，然后用左眼朝目鏡內(nèi)注視，并慢慢反向調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，直到看到物像為止，同時向?qū)W生說明一般顯微鏡的物距在１厘米左右，所以如果物距已遠(yuǎn)超過１厘米，但仍未看到物像，那可能是標(biāo)本未在視野內(nèi)或轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋速度過快，此時應(yīng)調(diào)整裝片位置，然后再重復(fù)上述步驟，當(dāng)視野中出現(xiàn)模糊的物像時，就要換用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)，只有這樣，才能縮小尋找范圍，提高找到物像的速度。

三、正確對光的問題

對光是使用顯微鏡時很重要的一步，有些學(xué)生在對光時，隨便轉(zhuǎn)一個物鏡對著通光孔，而不是按要求一定用低倍鏡對光。轉(zhuǎn)動反光鏡時喜歡用一只手，往往將反光鏡扳了下來。所以教師在指導(dǎo)學(xué)生時，一定要強(qiáng)調(diào)用低倍鏡對光，當(dāng)光線較強(qiáng)時用小光圈、平面鏡，而光線較弱時則用大光圈、凹面鏡，反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動，當(dāng)看到均勻光亮的圓形視野為止。光對好后不要再隨便移動顯微鏡，以免光線不能準(zhǔn)確地通過反光鏡進(jìn)入通光孔。

四、物鏡轉(zhuǎn)換的問題

使用低倍鏡后換用高倍鏡，學(xué)生往往喜歡用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，認(rèn)為這樣比較省力，但這樣容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜，原因是轉(zhuǎn)換器的材料質(zhì)地較軟，精度較高，螺紋受力不均勻很容易松脫。一旦螺紋破壞，整個轉(zhuǎn)換器就會報廢。教師應(yīng)指導(dǎo)學(xué)生手握轉(zhuǎn)換器的下層轉(zhuǎn)動板轉(zhuǎn)換物鏡。

五、正確用眼的問題

用顯微鏡觀察物體時，應(yīng)雙眼同時睜開，左眼往目鏡內(nèi)注視。但有不少學(xué)生往往做不到這一點，喜歡用手捂住右眼或干脆閉上右眼，這是不符合實驗的觀察要求的，這種不良習(xí)慣會造成左眼疲勞，同時也不能做到邊觀察邊畫圖。教師在指出學(xué)生這一毛病的同時，應(yīng)具體示范，告訴學(xué)生左眼要盡量貼近目鏡，右眼試圖向視野內(nèi)注視，如此反復(fù)訓(xùn)練，就會達(dá)到雙目同時睜開觀察的要求。
顯微鏡的使用或操作錯誤，是生物實驗中普遍存在的現(xiàn)象，我們只要認(rèn)真地對待，有意識地去糾正它，克服它，熟練而正確地使用顯微鏡是完全可以做的

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不同顯微鏡的介紹

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在細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查中以光學(xué)顯微鏡為常用，借助顯微鏡放大至1000倍左右可以觀察到細(xì)菌的一般形態(tài)和結(jié)構(gòu)，至于細(xì)菌內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)，則需經(jīng)電子顯微鏡放大數(shù)萬倍以上才能看清。檢查細(xì)菌常用的顯微鏡有以下幾種：

1. .電子顯微鏡：電子顯微鏡以電子流代替光源，其波長極短（約為0.005nm），分辨能力大大提高，電磁圈代替普通顯微鏡的光學(xué)放大系統(tǒng)，放大倍數(shù)可達(dá)數(shù)萬至數(shù)十萬倍，能分辨lnm的物體，細(xì)菌的表面形態(tài)和內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)均能清楚地顯現(xiàn).電子顯微鏡有透射電子顯微鏡和掃描電子顯微鏡。前者適于觀察細(xì)菌內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)，后者適于對細(xì)菌表面結(jié)構(gòu)及附件的觀察。用電子顯微鏡觀察，標(biāo)本需經(jīng)特殊制片，在干燥真空的狀態(tài)下檢查，不能觀察到活的微生物。

2.暗視野顯微鏡：暗視野顯微鏡是用特制的暗視野集光器代替普通光學(xué)顯微鏡上的明視野集光器，由于暗視野集光器的中央為不透光的遮光板，光線不能直接射入鏡筒，故背景視野黑暗無光，而從集光器四周邊緣斜射到標(biāo)本部位的光線，經(jīng)菌體散射后而進(jìn)入物鏡。故在強(qiáng)光的照射下，可以在黑暗的背景中看到發(fā)亮的菌體，猶如夜空中的明亮星星。明暗反差提高了觀察的效果，多用于檢查不染色的活細(xì)菌和螺旋體的形態(tài)及運動觀察醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

3.相差顯微鏡：在進(jìn)行未染色標(biāo)本檢查時，由于細(xì)菌的折旋光性與周圍環(huán)境的折旋光性相近，明暗對比不明顯。在普通光學(xué)顯微鏡下不易看清，用暗視野顯微鏡只能看到發(fā)亮的菌體輪廓，看不清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。而相差顯微鏡依據(jù)光波穿過標(biāo)本中密度不同的部位時，引起光相差異的原理，利用相差板的光柵作用，改變直射光的光相和振幅，將光相的差異轉(zhuǎn)換成光的強(qiáng)度的差異，使細(xì)菌中的某部分結(jié)構(gòu)比其他部分深暗，襯托出鮮明的對比。本法主要用于檢查不染色活細(xì)菌的形態(tài)及某些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

相襯顯微鏡 ?http://www.shoif.com/old_version/xsp-bm16-2.shtml

4.熒光顯微鏡：熒光顯微鏡以紫外光或藍(lán)紫光為光源，能激發(fā)熒光物質(zhì)發(fā)光使之成為可見光。細(xì)菌經(jīng)熒光色素染色后，置于熒光顯微鏡下，即可激發(fā)熒光，因此在暗色的背景下可以看到發(fā)射熒光的細(xì)菌。由于紫外光與藍(lán)紫光的波長較短（0.3～0.4μm），故分辨率得到進(jìn)一步提高。熒光顯微鏡還廣泛應(yīng)用于免疫熒光技術(shù)中醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

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5.普通光學(xué)顯微鏡：普通光學(xué)顯微鏡通常以自然光或燈光為光源，其波長約0.5μm.在最佳條件下，顯微鏡的最大分辨率為波長的一半，即0.25μm，而肉眼所能看到的最小形象為0.2mm，故在普通光學(xué)顯微鏡下用油鏡放大1000倍，可將0.25μm的微粒放大到0.25mm，肉眼便可以看清，一般細(xì)菌大于0.25μm，故用普通光學(xué)顯微鏡均能清楚看到。

 

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顯微鏡中一些常用術(shù)語解釋

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1.色差：色差是透鏡成像的一個嚴(yán)重缺陷，發(fā)生在多色光為光源的情況下，單色光不產(chǎn)生色差。白光由紅橙黃綠青藍(lán)紫七種組成，各種光的波長不同所以在通過透鏡時的折射率也不同，這樣物方一個點，在象方則可能形成一個色斑。

2.球差：球差是軸上點的單色相差，是由于透鏡的球形表面造成的。球差造成的結(jié)果是，一個點成像后，不在是個亮點，而是一個中間亮邊緣逐漸模糊的亮斑。從而影響成像質(zhì)量。

3.象散：象散也是影響清晰度的軸外點單色相差。當(dāng)視場很大時，邊緣上的物點離光軸遠(yuǎn)，光束傾斜大，經(jīng)透鏡后則引起象散。象散使原來的物點在成象后變成兩個分離并且相互垂直的短線，在理想象平面上綜合后，形成一個橢圓形的斑點。象散是通過復(fù)雜的透鏡組合來消除。

4.萬能無限遠(yuǎn)校正光學(xué)系統(tǒng)：是目前最先進(jìn)的光路設(shè)計，它分體現(xiàn)了無限遠(yuǎn)校正方式的優(yōu)越性。光線通過物鏡后成為平行光束通過鏡筒，并在結(jié)象透鏡處折射或完成無相差的中間象。物鏡與觀察筒內(nèi)結(jié)象透鏡之間可添加光學(xué)附件，而不影響總放大倍數(shù)。另外這種光學(xué)系統(tǒng)不需要安裝附加校正透鏡，都能得到最佳的顯微圖象。

5.折射和折射率：光線在均勻的各向同性介質(zhì)中，兩點之間以直線傳播，當(dāng)通過不同密度介質(zhì)的透明物體時，則發(fā)生折射現(xiàn)象，這是由于光在不同介質(zhì)的傳播速度不同造成的。當(dāng)與透明物面不垂直的光線由空氣射入透明物體(如玻璃)時，光線在其介面改變了方向，并和法線構(gòu)成折射角。

6.數(shù)值孔徑：數(shù)值孔徑簡寫NA，數(shù)值孔徑是物鏡和聚光鏡的主要技術(shù)參數(shù)，是判斷兩者（尤其對物鏡而言）性能高低的重要標(biāo)志。其數(shù)值的大小，分別標(biāo)科在物鏡和聚光鏡的外殼上。NA值增大，視場寬度與工作距離都會相應(yīng)地變小

7.分辨率：又稱鑒別率解像力。是衡量顯微鏡性能的又一個重要技術(shù)參數(shù)。由物鏡的NA值與照明光源的波長兩個因素決定。NA值 越 大，照 明 光 線 波 長 越 短 ，則d值越小，分辨率就越高。

8.放大率：放大率就是放大倍數(shù)，是指被檢驗物體經(jīng)物鏡放大再經(jīng)目鏡放大后，人眼所看到的最終圖象的大小對原物體大小的比值，是物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。

9.工作距離：工作距離也叫物距，即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。鏡檢時，被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此，它與焦距是兩個概念，平時習(xí)慣所說的調(diào)焦，實際上是調(diào)節(jié)工作距離。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下，工作距離短孔徑角則大。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離小。

10.聚光鏡：聚光鏡又名聚光器，裝在載物臺的下方。小型的顯微鏡往往無聚光鏡，在使用數(shù)值孔徑0.40以上的物鏡時，則必須具有聚光鏡。聚光鏡不僅可以彌補(bǔ)光量的不足和適當(dāng)改變從光源射來的光的性質(zhì)，而且將光線聚焦于被檢物體上，以得到最好的照明效果。聚光鏡的的結(jié)構(gòu)有多種，同時根據(jù)物鏡數(shù)值孔徑的大小，相應(yīng)地對聚光鏡的要求也不同。

11.阿貝聚光鏡：這是由德國光學(xué)大學(xué)大師恩斯特.阿貝設(shè)計。阿貝聚光鏡由兩片透鏡組成，有較好的聚光能力，但是在物鏡數(shù)值孔徑高于0.60時，則色差，球差就顯示出來。因此，多用于普通顯微鏡上。

12.落射式照明:這種照明的光束來自物體的上方通過物鏡后射到被檢物體上，這樣物鏡又起著聚光鏡的作用。這種照明法是適用于非透明物體，如金屬，礦物等。

13. 透射式照明：分中心照明和斜射照明兩種形式：

（1）. 中心照明：又分為:.臨界照明:和柯勒照明兩種。

.臨界照明:這是普通的照明法。這種照明的特點是光源經(jīng)聚光鏡后成象在被檢物體上，光束狹而強(qiáng)，這是它的優(yōu)點。

.柯勒照明：柯勒照明克服了臨界照明的缺點，是研究用顯微鏡中的理想照明法。這中照明法不僅觀察效果佳，而且是成功地進(jìn)行顯微照相所必須的一種照明法。

（2）.斜射照明：這種照明光束的中軸與顯微鏡的光軸不在一直線上，而是與光軸形成一定的角度斜照在物體上，因此成斜射照明。相襯顯微術(shù)和暗視野顯微術(shù)就是斜射照明。

 

 

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數(shù)碼顯微鏡在考古中的應(yīng)用

技術(shù)支持

數(shù)碼顯微鏡應(yīng)用于文物保護(hù)研究，隨著近年來國家對古文物保護(hù)，研究工作的深入和重視，對于這方面的研究的儀器設(shè)備也在不斷增加，呈現(xiàn)出大好的發(fā)展氣象，對于很多出土文物的鑒定。比如陶器，瓷器，金屬，古文書籍，木材等等，有很多大型分析儀器可以實現(xiàn)研究。比如電子顯微鏡，熒光顯微鏡，金相分析儀等等。目前很多文物保護(hù)研究所的科學(xué)研究開始使用數(shù)碼顯微鏡，便攜小巧，方便攜帶，實用性強(qiáng)，操作方便等特點，可實現(xiàn)現(xiàn)場數(shù)據(jù)采集分析。

在分析鑒定方面，主要以以下幾方面的應(yīng)用為主：

1，顏色分析，文物的色彩是鑒定工作的出發(fā)點，利用數(shù)碼顯微鏡對古文物顏色的鑒定可以縮小文物研究的范圍，只要選擇好合適的放大倍數(shù)，合適的顯微鏡觀察方式，很多晶體即可實現(xiàn)比較好的色彩還原。反映出最真實的文物顏色。

2，對于有形狀，實體文物來說，利用數(shù)碼顯微鏡最合適不過了，不破壞文物整體本身，觀察面積。

3，對于文物的大小測量，主要是通過顯微鏡的數(shù)碼攝像部分自帶的圖像處理軟件來實現(xiàn)，更加精確。

4，對于出土文物的紙張，顯微進(jìn)行鑒定，觀察方式可以分為兩種。一種沿纖維的方向，一種是纖維的橫截面，利用這樣的方式來制樣，可在顯微鏡上實現(xiàn)精確的觀察。

5，通過顯微鏡對木材進(jìn)行鑒定，看木材的紋理微觀。

以上就是數(shù)碼顯微鏡應(yīng)用于文物保護(hù)研究的一些最基本觀察方式，雖然利用一些大型光學(xué)顯微鏡可以實現(xiàn)這樣的研究，但是上述方法確實解決了大多數(shù)文物保護(hù)局的難題，可以實時實地對一些重要的文物進(jìn)行分析和鑒定，現(xiàn)場觀察采集分析是目前考古最需要的，這樣節(jié)省時間，專家們可以更快的分析。

文物的顯微分析研究數(shù)碼顯微鏡

數(shù)碼顯微鏡是分析鑒定和保護(hù)文物工作最常用的分析工具之一。由于其便攜小巧，結(jié)構(gòu)簡單、實用性強(qiáng)、操作簡單等特點，在各所大學(xué)考古學(xué)院，多數(shù)博物館的保護(hù)實驗室中都有配備。數(shù)碼顯微鏡分為10-200倍和450-600倍，可根據(jù)不同觀察物體，調(diào)節(jié)不同倍率。根據(jù)觀察樣品的不同，可以配置支架。也可根據(jù)環(huán)境選擇不同方式連接的顯微鏡。

 

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體視顯微鏡不同倍數(shù)狀態(tài)下觀測

技術(shù)支持

體視顯微鏡用于對電子零件\集成線路板\磁鐵等的立體檢查和觀察?；谶@些不同被測物體需要在不同倍數(shù)狀態(tài)下觀測，如何適應(yīng)這些不同要求？可通過多個方面來解決。

a.可通過光學(xué)性能 b.可選擇視頻觀察 c.可通過機(jī)械性能 d.可通過光源照明

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XTZ-03 雙目萬向支架體視顯微鏡

 

光學(xué)性能：根據(jù)被測物體被觀測要求，通過選用不同的目鏡\物鏡來解決大倍數(shù)大視場等問題。只要求大倍數(shù)時，可通過更換大倍數(shù)目鏡及物鏡，要求看大視野時可通過更換物鏡，減小目鏡來達(dá)到要求。

視頻觀察：當(dāng)光學(xué)放大倍數(shù)不夠時，可以用電子放大倍數(shù)來做補(bǔ)償。同時觀察以及希望能夠存儲保留時，我們可以選擇視頻。視頻方式有多種：A.可以直接通過監(jiān)視器 B.可以連接電腦（通過數(shù)字CCD或模擬CCD圖像采集卡）C可以連接數(shù)碼相機(jī)（不同的數(shù)碼相機(jī)要考慮到不同接口以及同顯微鏡的配套性）

機(jī)械性能：遇到一些焊接，組裝，較大集成線路板檢查領(lǐng)域以及對工作距離有要求時，我們可以通過機(jī)械性能來解決，如萬向支架，搖臂支架，大移動平臺等。借助他們的性能特點，當(dāng)檢測大物體時直接通過支架和平臺就能完成我們的檢測工作。無需移動我們的被測物體。萬向支架的功能能同時滿足這些使用要求。

光源照明：光源照明對能否看清被測物體起著至關(guān)重要的作用，當(dāng)選擇照明時一定要根據(jù)被測物體本身的特點（要考慮到它對光的要求，強(qiáng)\弱\反光等）來選擇相應(yīng)的照明工具以及打光方式。

 

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數(shù)碼顯微鏡與普通顯微鏡的區(qū)別

技術(shù)支持

數(shù)碼顯微鏡又叫數(shù)字顯微鏡、照相顯微鏡、攝像顯微鏡/視頻顯微鏡或是CCD顯微鏡等眾多不同的叫法。數(shù)碼顯微鏡是一種結(jié)合傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡及視像鏡頭而成的顯微鏡，也就是在普通光學(xué)顯微鏡上加上顯微成像裝置, 可以是數(shù)碼相機(jī)，亦可以是顯微攝像頭。它是將顯微鏡看到的實物圖像通過數(shù)模轉(zhuǎn)換，使其成像在計算機(jī)上。 數(shù)碼顯微鏡是將精銳的光學(xué)顯微鏡技術(shù)、先進(jìn)的光電轉(zhuǎn)換技術(shù)、普通的電視機(jī)完美地結(jié)合在一起而開發(fā)研制成功的一項高科技產(chǎn)品。從而，我們可以對微觀領(lǐng)域的研究從傳統(tǒng)的普通的雙眼觀察到通過顯示器上再現(xiàn)，從而提高了工作效率。主要用于教學(xué)用途。

數(shù)碼顯微鏡的主要好處在于：傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡只能供一人使用，要分享顯微鏡的影像很困難，而要拍攝顯微鏡內(nèi)的影像，亦往往需要用到特別的儀器幫助。然而，數(shù)碼顯微鏡由于可以與電腦連接，使顯微鏡內(nèi)的視像可以透過連接到課室的投影機(jī)播放，使課室內(nèi)的學(xué)生可以一同觀看影像。

數(shù)碼顯微鏡可以減少眼睛疲勞、把觀察到的景像拍攝并保存下來。而且可以實現(xiàn)低成本滿足多人同時預(yù)覽的需求。還可以實現(xiàn)測量、打印、拍照等多功能。

數(shù)碼顯微鏡與普通顯微鏡之間的區(qū)別：

1.具有顯微攝像功能，把觀察到的顯微效果保存下來，形成圖文文件，可給相關(guān)部門互相傳閱;普通顯微鏡只能通過目鏡觀察，不能進(jìn)行顯微攝像。

2.與電腦相接，可以實現(xiàn)多人同時觀察;普通顯微鏡只能一人觀察。

3.通過電腦屏幕預(yù)覽，可以減少眼睛疲勞;普通顯微鏡則需要每時每刻通過目鏡觀察，容易造成眼睛過度疲勞。

4.數(shù)碼顯微鏡的成像裝置可以有測量，打印圖文報告，錄像等功能;普通顯微鏡只能單純的進(jìn)行顯微觀察。

5.數(shù)碼顯微鏡是現(xiàn)代科學(xué)儀器儀表發(fā)展的一個新時代，具有很多普通顯微鏡沒有的功能。它在科學(xué)研究、產(chǎn)品檢測、教學(xué)演示、考古等方面都有迅速的發(fā)展。

 

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