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上海光學(xué)儀器廠，曾經(jīng)為發(fā)展民族工業(yè)，填補(bǔ)國(guó)內(nèi)空白，奠定了國(guó)家光學(xué)工業(yè)的系列化， 并先后與德國(guó)蔡司-歐波同（ZEISS-OPTON）、徠卡（LEICA）等國(guó)際著名光學(xué)公司合作生產(chǎn)各類(lèi)精密光學(xué)儀器。

熒光顯微鏡使用注意事項(xiàng)

常見(jiàn)問(wèn)題

熒光顯微鏡是用短波長(zhǎng)的光線照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光，然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物，醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。
（1）?熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類(lèi)型。
a.?透射式：激發(fā)光來(lái)自被檢物體的下方，聚光鏡為暗視野聚光鏡，使激發(fā)光不進(jìn)入物鏡，而使熒光進(jìn)入物鏡。它在低倍情況下明亮，而高倍則暗，在油浸和調(diào)中時(shí)，較難操作，尤以低倍的照明范圍難于確定，但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。
b.落射式：透射式目前幾乎被淘汰，新型的熒光顯微鏡多為落射式，光源來(lái)自被檢物體的上方，在光路中具有分光鏡，所以對(duì)透明和不透明的被檢物體都適用。由于物鏡起了聚光鏡的作用，不僅便于操作，而且從低倍到高倍，可以實(shí)現(xiàn)整個(gè)視場(chǎng)的均勻照明。

（2）?熒光鏡檢術(shù)的注意事項(xiàng)
a.?激發(fā)光長(zhǎng)時(shí)間的照射，會(huì)發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象，因此盡可能縮短觀察時(shí)間，暫時(shí)不觀察時(shí)，應(yīng)用擋板遮蓋激發(fā)光。
b.?作油鏡觀察時(shí)，應(yīng)用 無(wú)熒光油 。
c.?熒光幾乎都較弱，應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。
d.?電源最好裝穩(wěn)壓器，否則電壓不穩(wěn)不僅會(huì)降低汞燈的壽命，也會(huì)影響鏡檢的效果。

 

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金相顯微鏡延長(zhǎng)壽命的方法

常見(jiàn)問(wèn)題

延長(zhǎng)金相顯微鏡的使用壽命的方法：使用時(shí)顯微鏡時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：(現(xiàn)以金相顯微鏡的使用方法為例作為說(shuō)明)

1、條件許可情況下，建議您的試驗(yàn)室應(yīng)具備三防條件：防震(遠(yuǎn)離震源)、防潮(使用空調(diào)、干燥器)、防塵(地面鋪上地板)；電源：220V±10%，50HZ；溫度：0°C—40°C。

2、亮度調(diào)整切忌忽大忽小，也不要過(guò)亮，影響燈泡的使用壽命，同時(shí)也有損視力。

3、所有(功能)切換，動(dòng)作要輕，要到位。

4、關(guān)機(jī)時(shí)要將亮度調(diào)到最小。

5、調(diào)焦時(shí)注意不要使物鏡碰到試樣，以免劃傷物鏡。

6、當(dāng)載物臺(tái)墊片圓孔中心的位置遠(yuǎn)離物鏡中心位置時(shí)不要切換物鏡，以免劃傷物鏡。

7、非專(zhuān)業(yè)人員不要調(diào)整照明系統(tǒng)(燈絲位置燈)，以免影響成像質(zhì)量。

8、更換鹵素?zé)魰r(shí)要注意高溫，以免灼傷；注意不要用手直接接觸鹵素?zé)舻牟Ａw。

9、關(guān)機(jī)不使用時(shí)，將物鏡通過(guò)調(diào)焦機(jī)構(gòu)調(diào)整到最低狀態(tài)。

10、關(guān)機(jī)不使用時(shí)，不要立即該蓋防塵罩，待冷卻后再蓋，注意防火。以上幾點(diǎn)僅是一些應(yīng)特別注意的地方。希望大家在使用過(guò)程中應(yīng)小心加細(xì)心，如確實(shí)在使用金相顯微鏡時(shí)有遇到難題自己無(wú)法解決時(shí)，可立即電話聯(lián)系本叁諾公司尋找解決方法。

 

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偏光顯微鏡常識(shí)

常見(jiàn)問(wèn)題, 技術(shù)支持

偏光顯微鏡在光學(xué)顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)中插入了起偏振鏡和檢偏振器，用以檢查樣品的各向異性和雙折射性的顯微鏡。起偏振鏡和檢偏振鏡都是由偏光棱鏡或偏光板的尼科耳(nicol)棱鏡制成。前者安裝在光源與樣品之間，后者安裝在接物鏡與接目鏡之間或接目鏡之上。在生物樣品中，肌肉纖維、骨骼和牙齒等具有各向異性，淀粉粒、染色體和紡錘體等具有雙折射性，因此被用于組織細(xì)胞的化學(xué)研究。光源最好用單波長(zhǎng)光線。由于生物樣品比金相、巖石或結(jié)晶的雙折射性顯著微弱，所以有時(shí)也借敏感的檢偏振板造成的相加相減現(xiàn)象而利用其干涉色。

偏光顯微鏡：http://www.shoif.com/old_version/industry/pianguang/

 

偏振光的基礎(chǔ)知識(shí)

一、自然光和偏振光

光是一種電磁波，屬于橫波(振動(dòng)方向與傳播方向垂直)。一切實(shí)際的光源，如日光、燭光、日光燈及鎢絲燈發(fā)出的光都叫自然光。這些光都是大量原子、分子發(fā)光的總和。雖然某一個(gè)原子或分子在某一瞬間發(fā)出的電磁波振動(dòng)方向一致，但各個(gè)原子和分子發(fā)出的振動(dòng)方向也不同，這種變化頻率極快，因此，自然光是各個(gè)原子或分子發(fā)光的總和，可認(rèn)為其電磁波的振動(dòng)在各個(gè)方向上的幾率相等。

自然光在窗過(guò)某些物質(zhì)，經(jīng)過(guò)反射、折射、吸收后，電磁波的振動(dòng)波以被限制在一個(gè)方向上，其他方向振動(dòng)的電磁波被大大削弱或消除。這種在某個(gè)確定方向上振動(dòng)的光稱(chēng)為偏振光。偏振光的振動(dòng)方向與光波傳播方向所構(gòu)成的平面稱(chēng)為振動(dòng)面。

二、直線偏振光、圓偏振光及橢圓偏振光

1.直線偏振光

直線偏振光由于光線的振動(dòng)方向都在同一個(gè)平面內(nèi)，所以這偏振光又叫作平面偏振光正對(duì)光的傳播方向看去，這種光的振動(dòng)方向是一條直線，因此又叫直線偏振光或線偏振光。

2.圓偏振光和橢圓偏振光

(1)光的雙折射現(xiàn)象和晶體的光軸

當(dāng)一束光線射入各向異性的晶體中時(shí)要分裂為兩束沿不同方向傳播的挑線，這種現(xiàn)象叫雙折射現(xiàn)象發(fā)生雙折射的兩束光線都是偏振光。這兩束光線之一恒遵守光的折射定律，在改變?nèi)肷浞较驎r(shí)傳播速度不發(fā)生變化，這條光線稱(chēng)為尋常光線，用o表示;另一束光線不遵守折射定律，當(dāng)入射光線方向變化時(shí)，它的傳播速度也隨之變化，光的折射率不同，這束光稱(chēng)為非常光用e來(lái)表示。

在各向異性晶體中，存在有某些特殊方向，在這些方向上不發(fā)生雙折射，尋常光線和非常光線傳播方向和傳播速度相同，這些方向稱(chēng)為]晶體的光軸有一個(gè)光軸的晶體叫一軸晶，有兩個(gè)光軸的晶體叫二軸晶。對(duì)于二軸晶，雙折射后的兩束光線均為非常為光線。

(2)波晶片

波晶片簡(jiǎn)稱(chēng)波片，可用來(lái)改變或檢驗(yàn)光的偏振情況。當(dāng)自然光沿一軸晶光軸入射時(shí)，不發(fā)生雙折射現(xiàn)象。如果垂直于晶體光軸入射時(shí)產(chǎn)生的o光和e光仍沿原入射方向傳播，但傳播速度和折射率不同，且傳播速度相差最大。如果在平行于一軸晶光軸方向上切下一薄片，這時(shí)晶片表面與光軸平持，這樣制得的晶片叫]波晶片當(dāng)偏振光垂直于波片光軸入射時(shí)，在波片內(nèi)形成傳播方向相同但傳播速度不同的o光和e光。

如果波片越厚，o光和e光線波波長(zhǎng)的整數(shù)倍，這種波片叫全波片。依此類(lèi)推，還有半波片和1/4波片等等。

(3)圓偏振光和橢圓偏振光的形成

一束自然光以垂直于一軸晶的光軸方向入射所產(chǎn)生的振動(dòng)面互相垂直的兩束偏振光是不相干的。因?yàn)樽匀还馐怯晒庠粗械牟煌肿雍驮赢a(chǎn)生的，沒(méi)有固定的位相差，所以不發(fā)生干涉。但是當(dāng)一束單色偏振光通過(guò)雙折射物質(zhì)[/url]后，所產(chǎn)生的兩束偏振光是可以相干的。相當(dāng)于兩個(gè)互相垂直的同周期的振動(dòng)的合成。

當(dāng)一束偏振光垂直于一軸晶光軸入射時(shí)產(chǎn)生兩束偏振光(o光和e光)。由于o光和e光的相位差不同而合成為直線偏振光、]圓偏振光橢圓偏振光。O光和e光的相位差由兩束光在晶片中折射率和晶片的厚度決定。設(shè)No、Ne分別為o光和e光的折射率，d為晶片的厚度，所產(chǎn)生的相位差為Δφ。則。改變晶片的厚度可得不同相位差的o光和e光。當(dāng)Δφ為π/2的偶數(shù)倍時(shí)可產(chǎn)生直線偏振光;當(dāng)Δφ為π/2的奇數(shù)倍時(shí)，可產(chǎn)生圓偏振光;當(dāng)Δφ不是π/2的整數(shù)倍時(shí)均可產(chǎn)生橢圓偏振光。圓偏振光的振動(dòng)端點(diǎn)在光的傳播方向上投影為一個(gè)圓，橢圓偏振光的振動(dòng)端點(diǎn)在光的傳播方向上投影為一個(gè)橢圓。圓偏振光和橢圓偏振光在每一瞬間只有一個(gè)振動(dòng)方向，所以仍屬偏振光。

 

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特殊顯微鏡的應(yīng)用

常見(jiàn)問(wèn)題

1．熒光顯微鏡（fluorescencemicroscope）是用來(lái)觀察標(biāo)本中的自發(fā)熒光物質(zhì)或以熒光素染色或標(biāo)記的細(xì)胞和結(jié)構(gòu)。熒光顯微鏡是以高壓汞燈產(chǎn)生的短波紫外線為光源，并配有激發(fā)、阻斷、吸熱和吸收紫外線等濾片系統(tǒng)，標(biāo)本中的熒光物質(zhì)在紫外線激發(fā)下產(chǎn)生各種顏色的熒光，借以研究該熒光物質(zhì)在細(xì)胞和組織內(nèi)的分布。組織中的自發(fā)性熒光物質(zhì)如神經(jīng)細(xì)胞和心肌細(xì)胞等內(nèi)的脂褐素呈棕黃色熒光，肝貯脂細(xì)胞和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞內(nèi)的維生素A呈綠色熒光，某些神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞和神經(jīng)纖維內(nèi)的單胺類(lèi)物質(zhì)（兒茶酚胺、5－羥色胺、組胺等）在甲醛作用下呈不同顏色的熒光，組織內(nèi)含有的奎寧、四環(huán)素等藥物也呈現(xiàn)一定的熒光。細(xì)胞內(nèi)的某些成分可與熒光素結(jié)合而顯熒光，如溴化乙錠與吖啶橙可與DNA綜合，進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)DNA含量測(cè)定。熒光顯微鏡更廣泛用于免疫細(xì)胞化學(xué)研究，即以異硫氰酸或羅丹明等熒光素標(biāo)記抗體（一抗或二抗），用該標(biāo)記抗體直接或間接地與細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原結(jié)合，以檢測(cè)該抗原的存在與分布。

 

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2．相差顯微鏡（phasecontrastmicroscope）是用于觀察組織培養(yǎng)中活細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的。活細(xì)胞無(wú)色透明，一般光鏡下不易分辨細(xì)胞輪廓及其結(jié)構(gòu)。相差顯微鏡的特點(diǎn)是將活細(xì)胞不同厚度及細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)對(duì)光產(chǎn)生的不同折射作用，轉(zhuǎn)換為光密度差異（明暗差），使鏡下結(jié)構(gòu)反差明顯，影像清楚。組織培養(yǎng)研究常用的是倒置相差顯微鏡（invertedphasecontrastmicroscope），它的光源和聚光器在載物臺(tái)的上方，物鏡在載物臺(tái)的下方，便于觀察貼附在培養(yǎng)器皿底壁上的活細(xì)胞。

3．暗視野顯微鏡（dark-fieldmicroscope）主要用于觀察因反差或分辨力不足的微小顆粒。此種顯微鏡主要是有一個(gè)暗視野集光器，使光線不直接進(jìn)入物境，故呈暗視野。而標(biāo)本內(nèi)的小顆粒產(chǎn)生的衍射光或散射光進(jìn)入物鏡，暗視野中的顆粒呈明亮小點(diǎn)，如同在暗室可見(jiàn)一束光線中的微小塵粒一般。普通通光鏡最大分辨率為0.2μm，暗視野顯微鏡則可分辨0.004～0.2μm的微粒，適用于觀察細(xì)胞內(nèi)線粒體運(yùn)動(dòng)及標(biāo)本中細(xì)菌等微粒的運(yùn)動(dòng)等。

4．共集激光掃描顯微鏡（confocallaserscanningmicroscope,CLSM）是近10年研制成的高光敏度、高分辨率的新型儀器。它以激光為光源，光束經(jīng)聚焦后落在樣品（組織厚片或細(xì)胞）不同深度的微小一點(diǎn)，并作移動(dòng)掃描，通過(guò)電信號(hào)彩色顯像，經(jīng)過(guò)微機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行二維和三維分析處理。CLSM可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行三維結(jié)構(gòu)圖像分析，細(xì)胞內(nèi)各種熒光標(biāo)記物的微量分析，細(xì)胞內(nèi)Ca2+、pH值等的動(dòng)態(tài)分析測(cè)定，細(xì)胞的受體移動(dòng)、膜電位變化、酶活性和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的測(cè)定，并以激光對(duì)細(xì)胞及其染色體進(jìn)行切割、分離、篩選和克隆。因此，CLSM是一種高技術(shù)產(chǎn)品，可對(duì)細(xì)胞的多種功能進(jìn)行全自動(dòng)、高效、快速的微量定性和定量測(cè)定。

其他如偏光顯微鏡用于研究組織晶體物質(zhì)及纖維等的光學(xué)性質(zhì)，紫外光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)核酸的分布與定量等。

 

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顯微鏡鑒定陶瓷

常見(jiàn)問(wèn)題

早在好幾年前，有收藏家協(xié)會(huì)有發(fā)布過(guò)的《看圖識(shí)寶》圖冊(cè)，里面有52件各時(shí)期的文物，有部分陶器和陶瓷還配有微觀圖像。他們之所以配有顯微鏡下的微觀圖像，是為了宣傳和推廣科學(xué)的鑒定方法，希望廣大收藏愛(ài)好者能夠認(rèn)識(shí)并正確運(yùn)用顯微鏡來(lái)觀察文物的細(xì)部特征，如文物上的痕跡、紋理、紋飾、密度等，從而對(duì)文物的真?zhèn)巫龀稣_判斷。以下 就古瓷的方向詳盡歸納用顯微鏡鑒別的根本依據(jù)。

鑒定陶瓷主要依據(jù)的理論基礎(chǔ)：

陶瓷之美，是因?yàn)樵谕撂ヅ呱霞恿瞬煌陨案鞣N顏料繪成圖案，經(jīng)高溫?zé)坪?，形成多種顏色及有精美紋飾的器物。古人在用釉及彩料上做到精心研究，精益求精，因而產(chǎn)生了神奇效果，同時(shí)也留下了特殊的印記，形成了今天我們鑒賞鑒定要尋找的“根”。

主要依據(jù)就是古瓷的“根”提供了的三個(gè)方面的鑒賞鑒定方向：

一、陶瓷的先天性。器物燒成后，有特殊紋理。如青花瓷，若使用進(jìn)口蘇麻離青料，其包下沉，有泛錫光或棕褐色結(jié)晶斑，為必然結(jié)果。蘇料源絕已久，今人仿不出真料效果。還有黑釉瓷，因配方奧秘，古黑釉瓷微觀，有自然形成花朵狀、魚(yú)鱗狀、網(wǎng)狀等特殊紋斑，難以仿制，

二、陶瓷的后天性?，F(xiàn)存古瓷，不管傳世或出土，幾百年間與外界水、土、酸、堿接觸受腐蝕，必然產(chǎn)生各種印記，如產(chǎn)生變色泡、破口泡片紋變粗，表層有腐蝕點(diǎn)、腐蝕斑塊、脫釉露胎等現(xiàn)象，這些老化痕跡不可仿制，因而也成為我們今天鑒定古瓷的“根”，這種微小的變化在人的肉眼下是很難被察覺(jué)的，而借助陶瓷鑒定專(zhuān)用便攜式數(shù)碼顯微鏡在40倍率左右就可清晰尋找到相應(yīng)的證據(jù)。

三、“兩種根”在同一古瓷存在的情況也有：如清代粉彩瓷，當(dāng)時(shí)嫩青料，藍(lán)料，用的是琺瑯彩，開(kāi)小片，及嫩青料有細(xì)小銀灰色的魚(yú)子斑，屬先天性的“根”。而到現(xiàn)在，彩料上面有腐蝕斑色，這是以后形成的老化痕跡，成為后天性的“根”。還有明早期以前使用蘇麻離青料的青花瓷，結(jié)晶斑是先天性的根，有變色氣泡是后天性的根。

以上三方面僅是陶瓷鑒賞鑒定方法僅是應(yīng)用便攜式顯微鏡鑒定的一點(diǎn)滴總結(jié)。而對(duì)陶瓷“真不真，老不老”的問(wèn)題，本是長(zhǎng)期困擾著廣大古陶瓷收藏愛(ài)好者，且現(xiàn)在無(wú)論從出版的有關(guān)鑒定類(lèi)書(shū)籍，還是培訓(xùn)班上老師講授的“五看”，即看器型、看紋飾、看款識(shí)、看釉彩、看工藝，可這些傳統(tǒng)的鑒定方法，早已被現(xiàn)代技藝熟諳的仿古者所掌握，許多仿古作品惟妙惟肖，連專(zhuān)家也經(jīng)常看走眼，從而借助顯微鏡這種現(xiàn)代工具是收藏愛(ài)好者與專(zhuān)家學(xué)者們的必然選擇，學(xué)習(xí)與不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)是避免掏取高昂“學(xué)費(fèi)”的方法。

 

 

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顯微鏡觀察鑒別纖維

常見(jiàn)問(wèn)題

根據(jù)纖維的什么形態(tài),看纖維的一般外觀,視頻顯微鏡,檢測(cè)顯微鏡,體視顯微鏡都可以看得清楚,但看纖維切片的話,用生物顯微鏡才能更好的看清楚些,要求不同,需求不同。利用顯微鏡觀察纖維的縱向和截面形態(tài)特征來(lái)鑒別各種纖維，是廣泛采用的一種方法。

它既能單一成分的纖維，也可以用于多種成分混合而成的混紡產(chǎn)品的鑒別。天然纖維有其獨(dú)特的形態(tài)特征，如棉纖維的天然轉(zhuǎn)曲，羊毛的鱗片，麻纖維的橫節(jié)豎紋，蠶絲的三角形截面等，用生物顯微鏡能正確地辨認(rèn)出來(lái)。

還要確定想要看的東西的精度，樣品如何制備，再選擇觀察方式，再選擇不同的顯微鏡。

此外鑒別纖維的方法有顯微鏡觀察法、燃燒法、溶解法、藥品著色法、熔點(diǎn)法、密度法及雙折射法等。此外，也可以根據(jù)纖維分子結(jié)構(gòu)鑒別纖維，如X射線衍射法及紅外線吸收光譜法等。

顯微鏡觀察羊毛纖維：

與羊毛相同的是真絲也是蛋白質(zhì)纖維，與羊毛不同的是真絲中無(wú)硫氨基酸。天然絲可分為兩類(lèi)：

桑蠶絲（桑蠶），即為“真絲”。野蠶絲，其代表產(chǎn)品為柞蠶絲。桑蠶飼喂的是桑樹(shù)葉。

原絲也即繭絲，是山外層被稱(chēng)為絲膠的物質(zhì)和內(nèi)層的絲素組成，用作紡織材料的為絲素部分。與絲素比較，絲膠質(zhì)脆且沒(méi)有彈性，翟蓋著絲素形成漂亮的絲的光澤。

在顯微鏡下可以看到，原絲是由兩根絲素及圍繞著它們的絲膠組成的，原絲脫膠以后，便成為單根長(zhǎng)絲，沿長(zhǎng)度方向，其外觀平滑，無(wú)明顯結(jié)構(gòu)特征，每根單絲的寬度是不同的。其橫截面為略呈圓角的三角形，

有時(shí)在真絲纖維的長(zhǎng)度方向可見(jiàn)淺淺的紋理，這有助于真絲的識(shí)別。對(duì)桑蠶絲而言，絲膠的比例約為20%~25%?，個(gè)別甚至更高，如泰絲，可達(dá)到38%0絲膠可以是金黃色、淺黃色、黃棕色或黃綠色，也有可能是白色，其顏色取決于產(chǎn)地。

顯微鏡鑒別真假纖維：

借助顯微鏡觀察纖維縱向外形和截面形狀，或配合染色等方法，可以比較正確地區(qū)分天然纖維和化纖纖維。天然纖維中棉，毛，麻，絲的縱橫截面，具有不同的特征。在顯微鏡中觀察縱向外形，即能區(qū)別大類(lèi)。如果配合進(jìn)行切片，就能分清大類(lèi)總的具體纖維名稱(chēng)。

例如，麻類(lèi)纖維種類(lèi)很多，縱向觀察具有橫節(jié)豎紋的特征，經(jīng)過(guò)切片后，就可從橫截面形態(tài)不同，羊毛總的粗毛和細(xì)毛的橫截面形態(tài)亦不相同。化學(xué)纖維中的粘膠，醋脂類(lèi)纖維的斷面特征，也可以與其它纖維相區(qū)別。但截面呈橢圓形的化學(xué)纖維，如富強(qiáng)纖維，滌綸，腈綸等。

在顯微鏡中就無(wú)法確切區(qū)別，只能借助其他方法進(jìn)行鑒別。由于化學(xué)纖維的飛速發(fā)展，異形纖維種類(lèi)繁多，在顯微鏡觀察中必須特別注意，以防混淆。例如；蠶絲橫截面呈三角形，但異形纖維也能做出三角形。所以利用顯微鏡對(duì)纖維進(jìn)行初步鑒別后，還必須進(jìn)一步驗(yàn)證。

復(fù)合纖維，混抽纖維等，由于纖維中具有兩種以上不同的成分或組成，利用顯微鏡觀察，配合進(jìn)行切片和染色等，可以先確定是雙組分，多組分或混抽纖維，再用其他方法進(jìn)一步鑒別。

根據(jù)纖維的縱面、截面形態(tài)特征來(lái)識(shí)別纖維。

1.棉纖維：橫截面形態(tài)：腰圓形，有中腰；縱面形態(tài)：扁平帶狀，有天然轉(zhuǎn)曲。

2.麻（苧麻、亞麻、黃麻）纖維：橫截面形態(tài)：腰圓形或多角形，有中腔；縱面形態(tài)：有橫節(jié)，豎紋。

3.羊毛纖維：橫截面形態(tài)：圓形或近似圓形，有些有毛髓；縱面形態(tài)：表面有鱗片。

4.兔毛纖維：橫截面形態(tài)：?jiǎn)♀徯?，有毛髓；縱面形態(tài)：表面有鱗片。

5.桑蠶絲纖維：橫截面形態(tài)：不規(guī)則三角形；縱面形態(tài)：光滑平直，縱向有條紋。

6.普通粘纖：橫截面形態(tài)：鋸齒形，皮芯結(jié)構(gòu)；縱面形態(tài)：縱向有溝槽。

7.富強(qiáng)纖維：橫截面形態(tài)：較少齒形，或圓形，橢圓形；縱面形態(tài)：表面平滑。

8.醋酯纖維：橫截面形態(tài)：三葉形或不規(guī)則鋸齒形；縱面形態(tài)：表面有縱向條紋。

9.腈綸纖維：橫截面形態(tài)：圓形，啞鈴形或葉狀；縱面形態(tài)：表面平滑或有條紋。

10.氯綸纖維：橫截面形態(tài)：接近圓形；縱面形態(tài)：表面平滑。

11.氨綸纖維：橫截面形態(tài)：不規(guī)則形狀，有圓形，土豆形；縱面形態(tài)：表面暗深，呈不清晰骨形條紋。

12.滌綸、錦綸、丙綸纖維：橫截面形態(tài)：圓形或異形；縱面形態(tài)：平滑。

13.維綸纖維：橫截面形態(tài)：腰圓形，皮芯結(jié)構(gòu)；縱面形態(tài)：1~2根溝槽。

 

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顯微鏡測(cè)微尺的使用

技術(shù)支持

如何用目鏡測(cè)微尺測(cè)量
顯微測(cè)微尺是用來(lái)測(cè)量顯微鏡視場(chǎng)內(nèi)被測(cè)物體大小、長(zhǎng)短的工具, 包括目鏡測(cè)微尺(分劃目鏡)和測(cè)微臺(tái)尺。用時(shí)需兩者配合使用。目鏡測(cè)微尺系在目鏡的焦面上裝有一刻度的鏡片而成, 其每一刻度值為0.1mm, 測(cè)微臺(tái)尺為一特制的載玻片, 其中央有刻尺度, 每一小格的值為0.01mm, 使用時(shí), 先將目鏡測(cè)微尺插入目鏡管, 旋轉(zhuǎn)前透鏡將目鏡內(nèi)的刻度調(diào)清楚, 在把測(cè)微臺(tái)尺放在載物臺(tái)上, 調(diào)焦點(diǎn)到看清楚臺(tái)尺的刻度。觀察時(shí)先將兩者的刻度從“0”點(diǎn)完全重疊, 在向右找出兩尺又在何處重疊, 然后記下兩尺重疊的格數(shù), 以便計(jì)算出測(cè)微尺每小格在該放大率下的實(shí)際大小。

測(cè)量時(shí)不再用測(cè)微臺(tái)尺, 如改變顯微鏡的放大賠率, 則需對(duì)目鏡測(cè)微尺重新進(jìn)行標(biāo)定.

計(jì)算公式: 臺(tái)尺重疊格數(shù)×10

目尺重疊格數(shù)

例如:目鏡測(cè)微尺上的第五小格與測(cè)微臺(tái)尺上的第八格重疊=8×10

則目鏡測(cè)微尺上的每小格:16um=(8×10)/5

測(cè)量時(shí)不再用測(cè)微臺(tái)尺, 如改變顯微鏡的放大賠率, 則需對(duì)目鏡測(cè)微尺重新進(jìn)行標(biāo)定.

 

 

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檢測(cè)化妝品內(nèi)石棉含量的方法

常見(jiàn)問(wèn)題

近年來(lái)，隨著經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，化妝品工業(yè)也獲得了更大的發(fā)展空間，而化妝品安全也隨之成為了人們關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題。在化妝品生產(chǎn)過(guò)程中，經(jīng)常需要使用如滑石、云母等礦物質(zhì)作為輔料，而這些礦物的形成過(guò)程中常常會(huì)伴有石棉，比如閃石石棉就是滑石中較為常見(jiàn)的礦物。石棉與人的身體或者皮膚直接接觸，會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的危害，影響身體健康。隨著近年來(lái)化妝品行業(yè)的不斷發(fā)展，石棉問(wèn)題也受到了更多的關(guān)注，在歐美以及日韓等國(guó)家都對(duì)進(jìn)出口化妝品中的石棉含量進(jìn)行了嚴(yán)格的規(guī)定，并且制定了相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。我國(guó)在2009年制定了《粉狀化妝品及其原料中石棉測(cè)定方法》的暫行標(biāo)準(zhǔn)，為我國(guó)化妝品石棉檢測(cè)工作提供了參考和依據(jù)，同時(shí)也為提高化妝品品質(zhì)提供了基本的保障。本文就主要針對(duì)化妝品中石棉含量的檢測(cè)方法進(jìn)行簡(jiǎn)單的分析。

一、X-射線衍射法（XRD）

XRD的檢測(cè)原理主要是根據(jù)每種礦物都具有特殊的X-射線衍射數(shù)據(jù)這一特性而進(jìn)行檢測(cè)的，不同礦物的衍射峰的強(qiáng)度與其含量有著一定的比例關(guān)系，因此可以以此為依據(jù)對(duì)某物質(zhì)中是否含有石棉以及其含量進(jìn)行測(cè)定。這種方法可以用來(lái)鑒別是否存在石棉，以及石棉的種類(lèi)和數(shù)量。XRD具有五種度量分析的方法，較為常用的是K值和絕熱發(fā)。利用XRD檢測(cè)石棉用量較小，而且居于較好的重現(xiàn)性，檢測(cè)的速度也較快，尤其適用于對(duì)粉狀化妝品中的石棉進(jìn)行檢測(cè)，該方法也是當(dāng)前國(guó)內(nèi)使用的較為普遍的一種方法。當(dāng)然，在學(xué)術(shù)界對(duì)于XRD也存在著一定的之呢過(guò)以，有的學(xué)者認(rèn)為XRD檢測(cè)法的靈敏度較低，檢出限過(guò)低，只能夠用來(lái)檢測(cè)石棉含量不低于1%的檢測(cè)。但是關(guān)于檢出限的問(wèn)題，也是一個(gè)十分復(fù)雜的問(wèn)題，對(duì)于檢出限的影響因素也很多，只要能夠?qū)z測(cè)因素進(jìn)行有效的控制，便能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)檢出限的有效控制，將其控制在低于1%的范圍內(nèi)。目前，常用的提高XRD檢測(cè)靈敏度和分析精度的方法的主要途徑是提高光源功率、采用高強(qiáng)度的旋轉(zhuǎn)陽(yáng)極X-射線發(fā)生器等。

二、光學(xué)顯微鏡法

1.偏光顯微鏡法（PLM）

每一種礦物中都含有獨(dú)特的礦物光性和形態(tài)特征，因此通過(guò)偏光顯微鏡的觀察，能夠?qū)ΦV物中晶體的形狀產(chǎn)生不用的表現(xiàn)，通過(guò)這些不同的特征來(lái)對(duì)石棉進(jìn)行判斷。在偏光顯微鏡下，不同的石棉也會(huì)呈現(xiàn)不同的狀態(tài)，如溫石棉為細(xì)長(zhǎng)型的纖維形狀，而且呈現(xiàn)出黃綠色。閃石類(lèi)石棉的折射率較高。利用PLM法能夠有效的實(shí)現(xiàn)對(duì)石棉種類(lèi)的鑒別，能夠?qū)χ睆匠^(guò)0.25μm的石棉進(jìn)行鑒別，也是當(dāng)前國(guó)際各國(guó)都廣泛使用的鑒別方法。從理論上說(shuō)，PLM最大能夠達(dá)到1000倍的放大效果，但是在實(shí)際從操作中會(huì)受到操作人員以及其他因素的影響，所以通常使用的PLM倍數(shù)一般是在400～600左右。

2.相差顯微鏡法（PCM）

PCM原理是將透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差，光線透過(guò)標(biāo)本后發(fā)生折射，偏離了原來(lái)的光路，同時(shí)被延遲了1/4λ，如果再增加或減少1/4λ，則光程差變?yōu)?/2λ，兩束光合軸后干涉加強(qiáng)，振幅增大或減小，提高反差，從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對(duì)比度，使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見(jiàn)，這樣得以大幅提高檢測(cè)精度。因此，該方法是各國(guó)空氣中微量石棉檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中廣泛采用的方。但PCM法不能準(zhǔn)確辨別纖維種類(lèi)，在濃度較大時(shí)，檢測(cè)精度會(huì)受到影響， NIOSH標(biāo)準(zhǔn)PCM適用于石棉纖維直徑大于0.25μm，但也有文獻(xiàn)認(rèn)為PCM適用于石棉纖維長(zhǎng)度大于5μm，長(zhǎng)徑比大于3的石棉。

三、電子顯微鏡法

電子顯微鏡法的運(yùn)用主要是利用成像原理，將其分為掃描電鏡法和投射電鏡法，其中投射電鏡的分辨率相比掃描電鏡更高。與光學(xué)顯微鏡相比，電子顯微鏡具有更大的放大倍數(shù)和更高的分辨率。電子顯微鏡是當(dāng)前國(guó)內(nèi)外使用較多的方法，尤其是針對(duì)大氣粉塵以及水中的石棉石檢測(cè)，其具有其他方法無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)。

四、紅外光譜法（IR）

IR從某些方面來(lái)說(shuō)，與XRD具有一定的相似性，其主要是利用不用的礦物所特有的紅外吸收譜的特征來(lái)對(duì)礦物進(jìn)行鑒別和分析，比如閃石的石棉一般在752-760cm1左右處有一特征吸收帶，其中青石棉藍(lán)閃石的吸收帶稍高，在777-786cm-1。該反應(yīng)帶的反應(yīng)較為靈敏，而且其強(qiáng)度與石棉的含量成澄碧，因此可以利用紅外光譜對(duì)石棉進(jìn)行檢測(cè)。但是，紅外光譜法也存在弊端，其能夠判斷出是否含有石棉，但是對(duì)石棉的類(lèi)型卻無(wú)法有效的區(qū)分，無(wú)法進(jìn)行定量分析，因此，紅外光譜法一般都被用作輔助手段，很少單獨(dú)使用。關(guān)于紅外光譜法的先關(guān)標(biāo)準(zhǔn)較為缺乏。

五、差熱分析法（DTA）

DTA指的是在程序控溫條件下，對(duì)于測(cè)量物質(zhì)和參照物的溫度差與溫度或者是時(shí)間的關(guān)系進(jìn)行測(cè)定。比如蛇紋石類(lèi)的石棉溫差特征是在750～800℃有吸熱的特征，而伴隨著這個(gè)吸熱谷的出現(xiàn)，就會(huì)出現(xiàn)一個(gè)放熱的高峰。不同的礦物中含有不同的成分，而且成分會(huì)隨著溫度的變化而出現(xiàn)規(guī)律的變化，進(jìn)而引起DTA曲線的特征發(fā)生變化。

 

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熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求及方法

技術(shù)支持

熒光顯微鏡標(biāo)本制作要求

(一)載玻片

載玻片厚度應(yīng)在0.8～1.2mm之間，太厚的坡片，一方面光吸收多，另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔，厚度均勻，無(wú)明顯自發(fā)熒光。有時(shí)需用石英玻璃載玻片。

(二)蓋玻片

蓋玻片厚度在0.17mm左右，光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光，也可用干涉蓋玻片，這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片，它可以使熒光順利通過(guò)，而反射激發(fā)光，這種反射的激發(fā)光女可激發(fā)標(biāo)本。

(三)標(biāo)本

組織切片或其他標(biāo)本不能太厚，如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部，而物鏡直接觀察到的上部不充分激發(fā)。另外，細(xì)胞重迭或雜質(zhì)掩蓋，影響判斷。

(四)封裱劑

封裱劑常用甘油，必須無(wú)自發(fā)熒光，無(wú)色透明，熒光的亮度在pH8.5～9.5時(shí)較亮，不易很快褪去。所以，常用甘油和0.5mol/l pH9.0～9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。

(五)鏡油

一般暗視野熒光顯微鏡和用油鏡觀察標(biāo)本時(shí)，必須使用鏡油，最好使用特制的無(wú)熒光鏡油，也可用上述甘油代替，液體石蠟也可用，只是折光率較低，對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。

三、使用熒光顯微鏡的注意事項(xiàng)

(1)嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序。

(2)應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查。進(jìn)入暗室后，接上電源，點(diǎn)燃超高壓汞燈5～15min，待光源發(fā)出強(qiáng)光穩(wěn)定后，眼睛完全適應(yīng)暗室，再開(kāi)始觀察標(biāo)本。

(3)防止紫外線對(duì)眼睛的損害，在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡。

(4)檢查時(shí)間每次以1～2h為宜，超過(guò)90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱；標(biāo)本受紫外線照射3～5min后，熒光也明顯減弱；所以，最多不得超過(guò)2～3h。

(5)熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié) 省時(shí)間，保護(hù)光源。天熱時(shí)，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再用時(shí)，須待燈泡充分冷卻后才能點(diǎn)燃。一天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。

(6)標(biāo)本染色后立即觀察，因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā)。

(7)熒光亮度的判斷標(biāo)準(zhǔn)：一般分為四級(jí)，即“一”—無(wú)或可見(jiàn)微弱熒光?！?”—僅能見(jiàn)明確可見(jiàn)的熒光?！?+”—可見(jiàn)有明亮的熒光?！?++”—可見(jiàn)耀眼的熒光。

四、熒光圖像的記錄方法

熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態(tài)學(xué)特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結(jié)果時(shí)，必須將二者結(jié)合起來(lái)綜合判斷。結(jié)果記錄根據(jù)主觀指標(biāo)，即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術(shù)科學(xué)的發(fā)展，在不同程度上采用客觀指標(biāo)記錄判斷結(jié)果，如用細(xì)胞分光光度計(jì)，圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結(jié)果，也必須結(jié)合主觀的判斷。

熒光顯微鏡攝影技術(shù)對(duì)于記錄熒光圖像十分必要，由于熒光很易褪色減弱，要即時(shí)攝影記錄結(jié)果。方法與普通顯微攝影技術(shù)基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24。以上。因紫外光對(duì)熒光猝滅作用大，如FITC的標(biāo)記物，在紫外光下照射30s，熒光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能將熒光圖像拍攝下來(lái)。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動(dòng)或全自動(dòng)顯微攝影系統(tǒng)裝置。

XSP-BM22AY 科研級(jí)三目熒光顯微鏡

標(biāo)本的制作方法

樣品須經(jīng)過(guò)石蠟包埋切片，然后用鐵礬蘇木精染色，普通光鏡觀察效果還可以.

作熒光觀察需用熒光染料DAPI染色，

石蠟切片的過(guò)程：

1. 取材: 刀片要求鋒利而薄,組織厚度約2—3mm, 大小1.5×1.5×0.2～0.3cm為宜. 取材時(shí)間越快越好.

2. 固定: 組織取下后應(yīng)立即放入10%福爾馬林(相當(dāng)于4%甲醛)固定.

注意: (1). 固定液量應(yīng)為組織塊體積的40倍.

(2) 固定時(shí)間固定時(shí)間與使用的固定液種類(lèi)和組織塊大小, 溫度等有關(guān). 一般為3—24h.

(3)固定溫度大多可在室溫固定, 在低溫(4℃)時(shí)間應(yīng)延長(zhǎng).

(4)固定容器應(yīng)大些.

3. 漂洗: 流水沖洗2—10h.

4. 脫水: 從低濃度酒精到高濃度酒精.

70%(數(shù)分鐘)→80%(60-120’)→90%(60-120’)→95%(60-120’)→95%(60-120’)→100%(60-120’)→100%(60-120’).

5. 透明: 組織塊脫水后必須經(jīng)過(guò)一種既能與酒精混合又能溶解石蠟的溶劑, 而使石蠟進(jìn)入組織塊. 常用二甲苯, 一般浸泡30m即可.

6. 浸蠟: 組織經(jīng)透明后在熔化的石蠟內(nèi)浸漬的過(guò)程稱(chēng)浸蠟. 一般需經(jīng)2—3次浸漬才能完成, 總時(shí)間為3—4h. 用于浸蠟的石蠟熔點(diǎn)為52—56℃.

7. 包埋: 先將熔化的石蠟倒入包埋框再用加熱的鑷子將組織塊放入. 包埋面必須平整. 包埋后石蠟稍凝后可移入冷水或冰箱中加速凝固.

8. 切片: 修塊→切片→展片→撈片→烤片.

也可作冰凍切片.

熒光染料的配制：

儲(chǔ)藏液：1mg/ml dapi(DMSO、去離子水、pbs都可以溶解)

工作液：通常1μg/ml

染色時(shí)須避光，10min左右

用pbs沖去多余染液即可觀察。

我公司熒光顯微鏡產(chǎn)品：http://www.shoif.com/old_version/life/yingguang/

 

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