螢光顯微鏡下DAPI螢光染色法過(guò)程簡(jiǎn)易效果清晰
野外采集具有簇葉病征之罹病泡桐葉片,切下葉柄組織經(jīng)過(guò)固定及徒手切片后,
在螢光顯微鏡下,利用下列三種方法:篩管自發(fā)螢光觀察,登氏染色法及DAPI核酸螢光染色法,
鑑定篩管內(nèi)之病變情形,并與同樣方式處理過(guò)之無(wú)病泡桐種子苗葉柄組織切片相比對(duì),
以比較上述三種診斷技術(shù)之優(yōu)缺點(diǎn)及準(zhǔn)確度。結(jié)果顯示三種方法均可在罹病葉柄篩管內(nèi)觀察到病變現(xiàn)象。
由于老化或受昆蟲吸食之植物篩管內(nèi)亦會(huì)產(chǎn)生自發(fā)螢光物質(zhì),故篩管自發(fā)螢光觀察法雖然最簡(jiǎn)易可行但準(zhǔn)確性較低。
登氏染劑與DAPI螢光染劑均以核酸為染色對(duì)象故準(zhǔn)確性較高,登氏染色法之染色時(shí)間較長(zhǎng),染色結(jié)果受切片厚度,
切片角度及退染程度影響,有時(shí)不易判別罹病與否。DAPI螢光染色法過(guò)程簡(jiǎn)易,
染色時(shí)間短,染色結(jié)果辨認(rèn)容易,故為最理想之泡桐簇葉病檢驗(yàn)技術(shù)。