光學(xué)顯微鏡有景深對于CCD 影像 z 軸拍攝清晰度的影像
CCD 影像的 z 軸間距與顯微物鏡之聚焦深度的關(guān)系一般光學(xué)顯微鏡有景深(Depth of Field)的緣故,
顯微物鏡的聚焦深度(Depth of Focus)為 3.5 微米,亦即待測物在景深
范圍內(nèi),CCD 攝影機(jī)皆能擷取到聚焦清晰的影像。
所用到的聚焦度計(jì)量法則,主要是根據(jù) CCD 攝影機(jī)所擷取影像中的像素
灰階值變化劇烈的程度,來判別是否在焦平面上,所以若影像的 z 軸
間距小于景深,對同一 CCD 像素而言,在景深范圍內(nèi)的灰階強(qiáng)度值
較無劇烈的變化,導(dǎo)致重建出來的結(jié)果較差;
若影像的 z 軸間距大于景深,即我們不是以上下間隔 3.5 微米的影像,來求得每層影像中的
焦平面區(qū)域,而是以上下間隔 7 微米的影像,來推得每層影像中焦平
面的區(qū)域,重建出來的結(jié)果,CCD 重複擷取影像 90 張?jiān)偃∑淦骄?,影像張?shù)共 23 張,
重建的演算法則為最小相鄰反捲積。
可以察知當(dāng)影像間距大于景深時(shí),雖然影像中灰階強(qiáng)度劇烈地變化,但相對地 z
軸解析度就不好,當(dāng)然重建出來的待測物三維表面結(jié)果,其整體解析度就較差,
顯微物鏡的規(guī)格,來決定影像間的 z 軸間距,故本文第四章節(jié)所重建的結(jié)果,其影像間的 z 軸間距
大小為顯微鏡物鏡焦深 3.5 微米,使得 CCD 在擷取影像過程中,能同
時(shí)兼顧到影像中灰階強(qiáng)度變化的程度與 z 軸解析度