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觀察原生質(zhì)需要使用什么類型的顯微鏡?
觀察原生質(zhì)體一般來說使用普通生物顯微鏡高倍鏡就可以觀察
下面是原生質(zhì)體制備實(shí)驗(yàn)步驟
原生質(zhì)體制備
所需材料
1.新鮮卷心菜(cabbage)
2.培養(yǎng)皿
3.parafilm,封住培養(yǎng)皿用
4.刻度量筒(50ml)
5.倒立式顯微鏡
藥品
1. 緩沖溶液
2. 甘露糖醇(mannitol),作為緩沖溶液用
3. 軟化酵素(macerase)
4. 纖維酵素(cellulysin)
操作步驟
1. 先在4ml的蒸餾水加入1.14g的mannitol,使其溶解后,再加蒸餾
水直到總體積為10ml
2. 用秤藥紙稱0.1g軟化酵素和0.2g纖維酵素,放入每組的試管中或
燒杯中(這兩種酵素可以混合)。
3. 將酵素加入10ml的緩沖溶液內(nèi),酵素的濃度為1%軟化酵素和2%纖維酵素。
4. 小心地注入10ml的酵素液到培養(yǎng)皿的底部。
5. 用鑷子將懸浮在酵素液的葉子壓下使其和溶液接觸
6. 用parafilm或膠帶封培養(yǎng)皿并放置在室溫(約25℃)一天。若有足夠的設(shè)備,
輕微地?fù)u晃培養(yǎng)皿可以增加溶解速度。
7. 置入離心管中,小心地離心(75Xg,2min),用滅菌過的pipette吸取原生質(zhì)體懸浮液。
8. 使用一個(gè)大孔徑的吸量管輕輕地吸取底部綠色溶液并放置在顯微鏡玻片上
用蓋玻片覆蓋,以倒立式顯微鏡觀察