相差顯微術(shù)
一般顯微鏡之所以能看見樣品的細節(jié),是因為物體上反射出來的
光線的波長(顏色)和振幅(亮度,包括它本身各部分細節(jié)與細節(jié)周
圍不同物質(zhì)對光的吸收或反射程度)不同造成明暗的對比而形成的。
而觀察無色透明的物體及其細節(jié)則較困難了,因為細節(jié)與背景一
樣亮。
一般是對物體進行染色后再觀察。
但是有些樣品一經(jīng)染色就容易變形,甚至導致活體樣品的死亡。
通過加強明暗對比(或?qū)⒕酃忡R遮掉一部分,造成偏斜照明),
雖可看到物體但不能充分利用物鏡的數(shù)值孔徑,分辨率低,且亮度大
減。
利用暗視野照明,雖可看到物體表面的反射光,但看不見內(nèi)部細
節(jié)及結(jié)構(gòu),
利用熒光顯微術(shù)可以看到活體,但只限于能發(fā)射熒光的物體。
在這種情況下,可用相差/相襯顯微鏡來有效地觀察透明無色的標本
(細菌、細胞等生物活體),甚至還可以根據(jù)觀察者的目的及標本的
光學厚度來選擇合適的反差。這是相差顯微術(shù)的突出特點。
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