顯微鏡數(shù)碼圖像的分辨率首先取決于光學(xué)圖像的分辨率
從顯微鏡獲得的數(shù)碼圖像的分辨率首先取決于光學(xué)圖像的分辨率。
分辨極限的定義是:樣品上兩個獨立的對象在光學(xué)圖像中也可清楚分開
所必需的最小距離。在顯微成像中,
數(shù)碼顯微圖像的分辨率進(jìn)一步取決于并限制于構(gòu)成CCD 芯片的單個
光電二極管的物理大小
相機像素大小決定了你需要利用放大多少倍的顯微鏡以獲得最高分
辨率的數(shù)碼圖像。讓我們利用一個實例來了解怎樣根據(jù)你所用的相機來
計算所需要的光學(xué)放大倍數(shù)。假如我們所用的物鏡的NA是1.4 ,那么在
535nm 波長的發(fā)射光下獲取綠熒光圖像的光學(xué)圖像中的分辨率極限為0.2
μm
我們假設(shè)使用的相機在技術(shù)數(shù)據(jù)表中顯示的像素大小是6.45μm 那
么我們需要將樣品上最小的可辨別的距離(0. 25m)在CCD 芯片上放大
到至少19.4μm ,占用3 個光電二極管(6.45X3=19.4 ),得到的結(jié)果
是96倍。為了得到這一放大倍數(shù),我們可以單獨使用一個l00x 1.4NA
的物鏡或者使用60 X1.4NA 的物鏡與1.5X的附加放大設(shè)備組合。顯微鏡
制造商一般都會在研究級別的顯微鏡上生產(chǎn)帶有可選范圍在1.2X-2.OX
的附加放大設(shè)備(稱為光轉(zhuǎn)換器或放大轉(zhuǎn)換器)。但是,附加的放大倍
數(shù)也可以在相機上添加一個能夠放大的鏡頭來實現(xiàn)。
(本文由上海光學(xué)儀器廠編輯整理提供, 未經(jīng)允許禁止復(fù)制,轉(zhuǎn)載須注明網(wǎng)址http://www.sgaaa.com)
合作站點:http://www.xianweijing.org/