多功能相襯熒光顯微鏡的應(yīng)用-細(xì)胞研究光學(xué)儀器

  應(yīng)用暗視野或相襯顯微鏡可看到活的未染色的微生物。暗視野顯微
鏡中有一個(gè)暗視野擋光板（環(huán)形光欄），聚光器只能把中空的光錐匯聚
到樣本上，使得僅被樣本反射或散射的光線才能進(jìn)人目鏡，使得微生物
樣本就像反襯在黑暗背景上的明亮物體，但無法看清楚其內(nèi)部結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。
相襯顯微鏡的聚光器通常也用一個(gè)環(huán)孔擋板產(chǎn)生有一定角度的斜光，

  當(dāng)斜光匯聚到樣本平臺(tái)，通過細(xì)胞的部分光線被折射，而匯聚成像
；而未折射的光進(jìn)人鏡筒后使其匯聚在預(yù)設(shè)相位板的特定區(qū)造成相位移
動(dòng)；從而使得折射的光與未折射的光之間存在位相差（光程差），由于
光的衍射與干涉效應(yīng)從目鏡看去樣品就與背景反差加大。相襯顯微鏡下
細(xì)胞的各種結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)可由不同亮（暗）度表現(xiàn)出來，

  在熒光顯微鏡中，生物樣品用一種熒光物質(zhì)直接或間接（如通過抗
體）附著，熒光物質(zhì)吸收紫外線（激發(fā)光）后發(fā)出可見光，所發(fā)光的顏
色與所采用的熒光物質(zhì)有關(guān)；如熒光素吸收495 nm波長(zhǎng)的紫外線后發(fā)出
黃綠色（波長(zhǎng)525nm ）的可見光線。此技術(shù)采用紫外光源（如汞弧燈等），

  并有濾光片系統(tǒng)，可使紫外光投射在樣品上，但僅熒光或可見光可
進(jìn)人目鏡而被觀察到。

  應(yīng)用熒光顯微鏡除可研究被熒光染色的成分分布外也可直接觀察生
物樣品中天然熒光物質(zhì)（如葉綠素）。

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