熒光顯微鏡的光源和普通光鏡有何不同
熒光顯微鏡是生物成像的一個主要工具。
熒光發(fā)射取決于激發(fā)波長,并且在單光子吸收時,激發(fā)能量要大
于發(fā)射能量(激發(fā)光的波長比發(fā)射光的波長短)。
熒光有個優(yōu)勢,即能提供較高的信噪比,這使我們能夠分辨很低
濃度樣品種類的空間分布。我們可以利用自發(fā)熒光或者用合適的分子
(熒光團(tuán),它的分布在被照射時會很明顯)來標(biāo)記樣品(例如細(xì)胞、
組織或者膠質(zhì)體)。
在透射顯微鏡中用得最普遍的照明方式是克勒照明,它能提供均
勻明亮的視場,沒有閃耀。并且對樣品的加熱最小。正如下面將提到
的那樣,為了獲得最好的分辨力,重要的是采用讓照明光錐盡可能寬
的策略??死照彰骶邆溥@個特征,,光從照明燈出發(fā)。經(jīng)過一系列光
圈和透鏡,同時產(chǎn)生了均勻的視場(平行光),使照明樣品的光錐盡
可能寬
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