光學(xué)系統(tǒng)

  在落射式熒光顯微鏡中，物鏡具有激發(fā)樣品和收集熒光的雙重功能，
因此要求物鏡必須保證各波長范圍內(nèi)的透光性能。熒光效率與所用物鏡
數(shù)值孔徑N.A的4次方成正比，所以還應(yīng)配備高N.A的油浸或水浸物鏡，

以滿足采集樣品精細(xì)結(jié)構(gòu)圖像的需要。目鏡的放大倍數(shù)對熒光亮度的
影響較為明顯，熒光亮度與目鏡放大倍數(shù)的2次方成反比。

落射式熒光顯微鏡的光路是從光源發(fā)射出的激發(fā)光通過激發(fā)濾片，選擇
出合適的激發(fā)光到達(dá)二色分光鏡，較短波長的激發(fā)光被其反射下來，

經(jīng)物鏡后激發(fā)樣品:樣品產(chǎn)生的熒光再經(jīng)物鏡到達(dá)二色分光鏡，較長波長
的熒光透射過去，阻斷濾片進(jìn)一步濾除掉其中的短波長的光線，使一定
波長范圍的熒光到達(dá)目鏡供觀察。

落射式熒光顯微鏡主要由照明系統(tǒng)、熒光濾片系統(tǒng)(激發(fā)濾片、阻斷濾片、
二色分光鏡)、光學(xué)系統(tǒng)(物鏡、目鏡)等結(jié)構(gòu)組成。這種顯微鏡的進(jìn)步性
體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:

首先，構(gòu)造的新型物鏡允許更多的失真較少的激發(fā)光通過，并且還能收集
更多的發(fā)射熒光;其次，先進(jìn)濾片系統(tǒng)的發(fā)展阻止了散射的激發(fā)波長到達(dá)目鏡;

另外，還有一種濾片系統(tǒng)使研究者可以同時(shí)采集來自不同結(jié)構(gòu)的信息，每種
結(jié)構(gòu)帶有不同的熒光團(tuán)，具有截然不同的吸收和發(fā)射光譜。

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