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數(shù)字PCR的臨床應(yīng)用和挑戰(zhàn),檢驗(yàn)大咖有話說!

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放大字體  縮小字體    發(fā)布日期:2019-03-20  來源:儀器信息網(wǎng)  作者:Mr liao  瀏覽次數(shù):409

面對面專家

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關(guān)明:隨著分子遺傳知識的積累,DNA和RNA分子的定量變得越來越重要。人們發(fā)明了諸多方法,以便盡可能精確地量化核酸的數(shù)量。在序列特異性定量方法中,基于聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的技術(shù)一直是較為理想的選擇。實(shí)時(shí)定量PCR被認(rèn)為是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)操作,但由于其計(jì)量的靈敏度有限,無法滿足越來越嚴(yán)格的定量要求,尤其是當(dāng)目標(biāo)濃度較低或存在PCR抑制劑干擾精細(xì)測定時(shí)。此外,隨著下一代測序和單細(xì)胞分析等技術(shù)的不斷發(fā)展,人們對核酸定量的興趣已經(jīng)達(dá)到了前所未有的單分子水平,這導(dǎo)致了數(shù)字PCR技術(shù)的繁榮?!跋拗葡♂孭CR”和“單分子PCR”是最初用來描述這種方法的名稱,直到更流行、更貼切的術(shù)語“數(shù)字PCR”被提出,很快引起了生物醫(yī)學(xué)研究者的廣泛關(guān)注。數(shù)字PCR 的策略很簡單,就是“分而治之”,這是一個(gè)很好的比喻。DNA樣品分別在獨(dú)立但相同的分區(qū)中進(jìn)行擴(kuò)增,每個(gè)反應(yīng)的全或無檢測結(jié)果均遵循泊松分布。在計(jì)算陽性反應(yīng)的總和后,通過泊松校正,不僅可以得到目標(biāo)分子的濃度,還可以得到目標(biāo)分子的絕對數(shù)量。因其高靈敏度和特異性,數(shù)字PCR目前正應(yīng)用于絕對等位基因定量分析、病毒核酸檢測、罕見突變檢測、拷貝數(shù)變異分析、DNA甲基化分析、基因重排分析。組織和血液是數(shù)字PCR 技術(shù)主要應(yīng)用的標(biāo)本類型,使用腦脊液、尿液、房水等其他體液的新方法也正在開發(fā)中。

本期主持人邀請了國內(nèi)從事數(shù)字PCR 研究的多位專家,一起來探討數(shù)字PCR 目前在臨床應(yīng)用上的優(yōu)勢與挑戰(zhàn),同時(shí)也展望了今后在該技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展方向。

1、與其他傳統(tǒng)擴(kuò)增技術(shù)相比,數(shù)字PCR在臨床常規(guī)使用中有何優(yōu)勢?

郭瑋:與傳統(tǒng)熒光定量PCR技術(shù)相比,數(shù)字PCR的靈敏度高,更適合常規(guī)臨床使用。數(shù)字PCR的原理是將標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)體系分配至大量微小的反應(yīng)單元中,這能大大提高PCR反應(yīng)體系對抑制物的耐受能力。傳統(tǒng)的擴(kuò)增技術(shù)的靈敏度只有1%,但數(shù)字PCR可輕松實(shí)現(xiàn)單分子檢測,靈敏度可達(dá)0.1%甚至0.001%,這對于臨床上痕量核酸標(biāo)本檢測、復(fù)雜背景下稀有突變檢測,尤其是循環(huán)腫瘤DNA檢測特別適用。隨著檢測技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)有的數(shù)字PCR檢測平臺的工作操作流程相對簡單,兼容性強(qiáng),且二維的結(jié)果圖能更直觀地讀取數(shù)據(jù)[1]。

劉維薇:此外,數(shù)字PCR還可以實(shí)現(xiàn)絕對定量,突變擴(kuò)增阻滯系統(tǒng)(ARMS)技術(shù)只能得到定性結(jié)果,傳統(tǒng)的絕對或相對定量PCR的分析結(jié)果高度依賴于標(biāo)準(zhǔn)曲線或者內(nèi)參基因,無法做到精準(zhǔn)絕對定量。數(shù)字PCR在結(jié)果判讀時(shí)僅判斷“有/無”兩種擴(kuò)增狀態(tài),通過直接計(jì)數(shù)或泊松分布來進(jìn)行定量分析,實(shí)現(xiàn)了真正意義上的絕對定量。

婁加陶:在PCR過程中影響擴(kuò)增效率的因素眾多,比如酶、引物水平、PCR抑制物等,不能保證其定量分析所依賴的基礎(chǔ)——循環(huán)閾值(Ct)的恒定性,使得相同實(shí)驗(yàn)不同次重復(fù)檢測結(jié)果的重現(xiàn)性較差,甚至可能會得到完全相反的結(jié)果。與熒光定量PCR不同的是,數(shù)字PCR通過終點(diǎn)熒光信號計(jì)算濃度,不依賴于Ct值,因此不受擴(kuò)增效率影響,能夠?qū)⒄`差控制在5%以內(nèi),實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的高度重復(fù)性。

田月如:數(shù)字PCR在減少使用通用引物或探針設(shè)計(jì)在多樣性靶序列導(dǎo)致錯(cuò)配方面也具有優(yōu)勢[2]。數(shù)字PCR平臺可以與新一代基因測序技術(shù)(NGS)對接,實(shí)現(xiàn)對測序文庫的質(zhì)量控制,提供對測序文庫的定量分析和質(zhì)量評估信息。一方面,數(shù)字PCR對NGS 的測序結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,確保測序結(jié)果可信度;另一方面,所得到的結(jié)果還包含反映測序文庫質(zhì)量的信息,如接頭與接頭二聚體、錯(cuò)誤連接片段、過長連接片段等,這是當(dāng)前其他方法所不具備的優(yōu)勢[3]。

郭永:基于以上提到的優(yōu)勢,數(shù)字PCR尤其適用于臨床低豐度核酸分子的檢測和定量。舉3個(gè)例子:(1)腫瘤的液體活檢,通過檢測血漿中的腫瘤循環(huán)DNA(ctDNA),為腫瘤的伴隨診斷、療效監(jiān)控和預(yù)后判斷提供可靠數(shù)據(jù)[4];(2)標(biāo)本中少量病原體檢測,比如腦脊液感染、術(shù)后菌血癥、HBV和HIV用藥后的檢測[5];(3)器官移植排斥的監(jiān)控,可以更早發(fā)現(xiàn)急性排斥,緊急干預(yù)[6]。

2、在所有現(xiàn)有的商業(yè)產(chǎn)品化的數(shù)字PCR平臺,數(shù)字PCR都得到了越來越多的研究,特別是對癌癥應(yīng)用領(lǐng)域,數(shù)字PCR的出現(xiàn)對癌癥研究有哪些貢獻(xiàn)?

郭瑋:數(shù)字PCR具有高靈敏地檢測痕量靶核酸的能力,有助于從分子表型層面早期發(fā)現(xiàn)腫瘤的耐藥突變,提示臨床耐藥的潛在可能性,優(yōu)化藥物治療方案。加之其能發(fā)現(xiàn)復(fù)雜背景下的稀有突變,適用于檢測各種體液標(biāo)本(如血液、胸腔積液、腦脊液、尿液)中的腫瘤相關(guān)突變,有助于了解患者體內(nèi)腫瘤突變的全貌,一定程度上克服腫瘤的異質(zhì)性[7]。相比于NGS,數(shù)字PCR對實(shí)驗(yàn)室人員和設(shè)施的要求低,操作流程簡易,報(bào)告時(shí)間快速,便于臨床實(shí)驗(yàn)室工作的開展。

劉維薇:腫瘤個(gè)體化診療已經(jīng)成為業(yè)內(nèi)的共識,基因檢測也已在臨床實(shí)踐中得到普及。數(shù)字PCR技術(shù)通過對標(biāo)本的微滴化處理,能在每個(gè)微滴中有效地降低正常體細(xì)胞DNA背景的干擾,不僅能實(shí)現(xiàn)對腫瘤標(biāo)記物的有效檢測,還能定量監(jiān)測突變頻率變化,量化檢測標(biāo)準(zhǔn)。目前已有大量文獻(xiàn)和實(shí)例報(bào)道了數(shù)字PCR技術(shù)成功應(yīng)用于EGFR、KARS、BRAF、PIK3CA、DNMT3A等各種癌基因突變檢測,以及癌癥相關(guān)的如HER2基因擴(kuò)增檢測[8-10]。

婁加陶:數(shù)字PCR的出現(xiàn)有效彌補(bǔ)了第2代PCR系統(tǒng)靈敏度低、重復(fù)性差、無法進(jìn)行精確定量等缺點(diǎn),在癌癥研究領(lǐng)域潛力巨大。比如:在癌癥早篩領(lǐng)域,目前基于數(shù)字PCR對易感或高危人群的血液、尿液、唾液等體液標(biāo)本中核酸水平的腫瘤標(biāo)志物(如ctDNA、miRNA等)可以實(shí)現(xiàn)單分子水平的痕量檢測,以及表觀遺傳學(xué)的DNA甲基化定量檢測,其發(fā)現(xiàn)疾病的時(shí)間遠(yuǎn)早于影像學(xué)或其他蛋白類標(biāo)志物,大大提前了疾病發(fā)現(xiàn)的窗口期,可以更好地實(shí)現(xiàn)早診斷早治療。另外,利用數(shù)字PCR技術(shù)還可以富集標(biāo)本中的待測靶基因,用于二代測序輔助建庫、文庫質(zhì)控和測序結(jié)果驗(yàn)證等,極大地推動(dòng)了腫瘤精準(zhǔn)治療的進(jìn)步。

田月如:數(shù)字PCR由于標(biāo)本用量少,高敏感性、高特異性的特點(diǎn),克服了腫瘤組織包埋標(biāo)本DNA質(zhì)量差、標(biāo)本量有限等主要問題,為臨床檢測多種癌癥基因突變提供更客觀、自動(dòng)化程度更高的定量檢測結(jié)果[11]。目前,數(shù)字PCR已成為檢測多種癌癥基因突變最準(zhǔn)確、最可靠的工具之一,應(yīng)用于腫瘤標(biāo)本的等位基因絕對定量、罕見突變檢測、拷貝數(shù)變異分析、DNA甲基化和基因重排等,以及各種惡性腫瘤的診斷、預(yù)測和監(jiān)測[7]。

郭永:數(shù)字PCR目前對癌癥研究和治療方面的貢獻(xiàn)主要在液體活檢領(lǐng)域。WAN等[12]研究表明:血液檢測與組織檢測相比,對指導(dǎo)EGFRTKI治療的價(jià)值結(jié)果相當(dāng),數(shù)字PCR可以更好地檢出血液EGFR突變。王潔教授和吳一龍教授牽頭的BENEFIT研究結(jié)果顯示:采用數(shù)字PCR檢測血液EGFR突變狀態(tài)對指導(dǎo)一線吉非替尼靶向治療具有良好的療效和安全性[13]。這些研究為數(shù)字PCR在液體活檢的臨床應(yīng)用提供了循證醫(yī)學(xué)證據(jù),為將來腫瘤分子診斷模式改變打下了基礎(chǔ)。數(shù)字PCR有望成為癌癥療效監(jiān)控的主要技術(shù)手段。

3、作為一種標(biāo)準(zhǔn),數(shù)字PCR 在病原微生物的定量檢測上具有不可比擬的優(yōu)勢,具體表現(xiàn)在哪些方面?

郭瑋:病毒等微生物的載量對于闡釋疾病病程,后續(xù)治療及療效評估是至關(guān)重要的,即便是載量的輕微波動(dòng),因此需要數(shù)字PCR高精確和穩(wěn)定的分析。同時(shí)在缺乏標(biāo)準(zhǔn)品的檢測項(xiàng)目中,數(shù)字PCR可用于直接定量病原微生物的拷貝數(shù)。

劉維薇:在病原微生物的檢測(病毒、細(xì)菌、支原體等)方面,數(shù)字PCR利用其靈敏度高的特點(diǎn),對各種樣品中的病原微生物展開廣泛的研究。如人類免疫缺陷病毒(HIV)抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療過程中病毒殘留的監(jiān)控;丙型肝炎病毒(HCV)的分子分型;抗甲氧西林金黃色葡萄球菌的院內(nèi)感染監(jiān)控;環(huán)境微生物不同功能基因之間的連鎖分析等[14]。

婁加陶:在病原體鑒定方面,數(shù)字PCR的高靈敏度決定了臨床標(biāo)本無需經(jīng)過病原微生物培養(yǎng)過程即可進(jìn)行檢測,大大縮短了報(bào)告周期,使快速檢測潛在的病原微生物成為可能,且利于從大量不同的背景核酸中檢出病原微生物,對于感染性疾病的診斷和控制意義重大。另外,在耐藥基因檢測方面,相對于敏感性差、分辨率低的實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),數(shù)字PCR能早期(痕量)檢測罕見藥物抗性相關(guān)序列變異,如:乙型肝炎病毒(HBV)、結(jié)核分枝桿菌的耐藥突變檢測、及時(shí)、準(zhǔn)確地動(dòng)態(tài)監(jiān)測各種耐藥表型和基因型,給臨床研究和患者管理帶來潛在影響,有助于及時(shí)減少患者服用無效藥物的數(shù)量,及早采用其他備用藥物[15]。

田月如:數(shù)字PCR技術(shù)尤其在病原體待測標(biāo)本較難獲取且稀有的情況下尤為有用。復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院一項(xiàng)將數(shù)字PCR用于青光眼睫狀體炎綜合征(PSS)患者的房水中病原體檢測的研究發(fā)現(xiàn),人巨細(xì)胞病毒(HCMV)可能是我國PSS的最主要致病因素,高達(dá)45%的PSS患者的房水標(biāo)本中檢出了HCMV,比例顯著高于國內(nèi)的相關(guān)報(bào)道[16],未發(fā)現(xiàn)PSS患者房水中存在單純皰疹病毒(HSV)、巨細(xì)胞病毒(EBV)和水痘帶狀皰疹病毒(VZV)。該研究發(fā)現(xiàn)微滴式數(shù)字PCR法比熒光定量PCR的檢測結(jié)果更加靈敏、準(zhǔn)確,更適合用于房水標(biāo)本中微量病毒的檢測,此外,微滴式數(shù)字PCR法的高靈敏度可以避免對患者進(jìn)行重復(fù)穿刺取樣,減少患者在被穿刺取樣過程中的恐懼和痛苦。這也是全球首家關(guān)于在房水這樣的特殊體液中應(yīng)用數(shù)字PCR 的報(bào)道。

郭永:在細(xì)菌/病毒的核酸載量測定方面,熒光定量PCR技術(shù)的最大瓶頸在于需要依賴標(biāo)準(zhǔn)曲線,而且擴(kuò)增效率的差異會直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室內(nèi)或者不同實(shí)驗(yàn)室之間的熒光定量PCR檢測結(jié)果的偏差。數(shù)字PCR基于單分子層面的計(jì)數(shù)可以擺脫對標(biāo)準(zhǔn)品的依賴,且不受PCR抑制物的影響,從而實(shí)現(xiàn)對病原微生物核酸的精準(zhǔn)絕對定量,表現(xiàn)出較高的可重復(fù)性。利用數(shù)字PCR進(jìn)行核酸的病毒載量測定,依賴其靈敏度高的特點(diǎn),可以用于早期診斷和用藥的低拷貝病毒的監(jiān)控。

4、毫無疑問,作為一種新型核酸檢測技術(shù),數(shù)字PCR 即將進(jìn)入臨床使用,在進(jìn)入臨床前還有哪些質(zhì)量管理問題需要解決?

郭瑋:性能確認(rèn)方面,數(shù)字PCR屬于實(shí)驗(yàn)室自建檢測方法,正式進(jìn)入臨床使用前,臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行全面的性能確認(rèn)[17]。臨床指南和建議的缺失使得各實(shí)驗(yàn)室間對性能確認(rèn)的要素和判斷標(biāo)準(zhǔn)存在差異,導(dǎo)致臨床使用結(jié)果的差異,因此不同分液原理的數(shù)字PCR平臺間需要進(jìn)行檢測結(jié)果比對。各種數(shù)字PCR方法與傳統(tǒng)檢測方法之間的檢測結(jié)果的一致性也需要大量的比對和驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。只有如此,才能保證數(shù)字PCR技術(shù)可以成熟地進(jìn)入臨床檢測。

劉維薇:數(shù)字PCR臨床檢測尚無國家或行業(yè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),且缺乏商品化的室內(nèi)質(zhì)控品,因此需要建立適宜的室內(nèi)質(zhì)控措施,建立規(guī)范化的標(biāo)準(zhǔn)檢測分析流程。數(shù)字PCR的靈敏度較高,操作過程極易受到外源污染,因此做好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量控制,建立規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)的檢測操作流程和結(jié)果評估分析體,是保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性和可靠性的前提。

婁加陶:數(shù)字PCR操作對技術(shù)要求相對較高,需要加強(qiáng)人員培訓(xùn)。因?yàn)閿?shù)字PCR的靈敏度很大程度上取決于生成的反應(yīng)單元的數(shù)目,而反應(yīng)單元的生成數(shù)目比如微滴式數(shù)字PCR的微滴生成數(shù)則高度依賴于技術(shù)人員的操作熟練程度,目前數(shù)字PCR尚不能很好地實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,因此對技術(shù)人員的操作培訓(xùn)尤為重要;結(jié)果報(bào)告方面,如何合理地審核和報(bào)告低豐度的檢測結(jié)果,也是臨床實(shí)驗(yàn)室在臨床實(shí)踐前需要考慮的要點(diǎn)。

田月如:數(shù)字PCR每個(gè)反應(yīng)有限的標(biāo)本體積限制了分析的檢測下限,由于有限數(shù)量的分區(qū)限制了小動(dòng)態(tài)范圍。分區(qū)中并非所有模板均被擴(kuò)增,任何時(shí)候均可能出現(xiàn)分子斷流導(dǎo)致假性低量化,這在定量RNA時(shí)尤其突出,某些RNA靶點(diǎn)逆轉(zhuǎn)錄可能不完整,標(biāo)本中并非所有拷貝均被檢測到。此外,對于較大的擴(kuò)增子數(shù)字PCR尚不能準(zhǔn)確量化。標(biāo)本吞吐量較低,污染風(fēng)險(xiǎn)高均是數(shù)字PCR面臨的主要問題。目前,大多數(shù)數(shù)字PCR儀器只能測量兩種熒光,限制了同一樣品中不同目標(biāo)的多重檢測能力。如果數(shù)字PCR的具體應(yīng)用需要納入內(nèi)部控制,則可能需要基于不同染料濃度或染料混合物的更復(fù)雜的多重策略。數(shù)字PCR平臺反應(yīng)液的選擇仍受商業(yè)儀器的限制,不同廠家試劑和平臺的結(jié)果尚存在差異[18]。

郭永:數(shù)字PCR技術(shù)極其靈敏,需要進(jìn)行技術(shù)設(shè)計(jì)防污染管理,通過芯片和其他耗材的設(shè)計(jì),盡量避免微液滴和外界環(huán)境接觸的機(jī)會,做到不開蓋擴(kuò)增檢測,減少假陽性。

5、目前已經(jīng)商業(yè)化的數(shù)字PCR 是或者基于“油包水”分散液滴,或者基于芯片分散,基于“泊松”分布的理論,隨著微流控方法被用于數(shù)字PCR平臺的開發(fā),可以設(shè)想未來還有哪些在技術(shù)上能促進(jìn)數(shù)字PCR的新技術(shù)和新算法?

郭瑋:微流控技術(shù)的發(fā)展使得數(shù)字PCR的操作相對便捷,且液滴生成的固相體系相對穩(wěn)定。隨著新技術(shù)和算法的發(fā)展,數(shù)字PCR將獲得卓越的置信水平和真實(shí)可信的數(shù)據(jù)結(jié)果,同時(shí)推動(dòng)其在不同檢測和應(yīng)用需求方面的應(yīng)用,如單細(xì)胞核酸檢測、T790M/C797S的順式或反式的鑒定。數(shù)字PCR是一種新興的檢測方法。作為一種全新的思路和手段,臨床對其應(yīng)保持一種包容的心態(tài)。此檢測平臺將有助于臨床深入到分子生物學(xué)研究的更高層次。

劉維薇:數(shù)字PCR更擅長對已知極微量核酸標(biāo)本、復(fù)雜背景下稀有突變和表達(dá)量微小差異的標(biāo)本進(jìn)行檢測,而測序技術(shù)主要針對未知核酸或復(fù)雜標(biāo)本進(jìn)行分析。如果未來可以有對液滴的檢測更加直觀的檢測技術(shù),無疑能更好地推動(dòng)數(shù)字PCR在臨床的實(shí)際應(yīng)用[19]。

婁加陶:首先,比較容易想到的是開發(fā)多靶點(diǎn)檢測的多重?cái)?shù)字PCR檢測,可以通過兩種方式實(shí)現(xiàn),(1)使用多種熒光染料來標(biāo)記不同的待測靶基因,利用多個(gè)熒光檢測通道來實(shí)現(xiàn);(2)采用單波長多強(qiáng)度技術(shù),使用一種熒光染料,但是擴(kuò)增結(jié)束時(shí)不同靶基因?qū)?yīng)染料的熒光強(qiáng)度不同[20]。其次,目前的數(shù)字PCR大多采用熒光檢測手段,雖然較為便捷和靈敏,但需要依賴昂貴的光學(xué)儀器和攝像設(shè)備,而且PCR結(jié)束后離線檢測耗時(shí)耗力且容易引入污染,設(shè)想未來可以發(fā)展一種能夠在線監(jiān)測、且低成本、高速度、高通量的檢測方法,比較有前景的是電化學(xué)生物傳感器。另外3D打印微流控芯片技術(shù)相對于傳統(tǒng)的微流控加工技術(shù)具有設(shè)計(jì)加工快速、材料適應(yīng)性廣、集成化程度高、精度更高、成本更低的特點(diǎn),對于微流控芯片數(shù)字PCR技術(shù)的推廣應(yīng)用具有積極的意義[21]。

田月如:與已有分散方法相比,基于打印的樣品分散法具有更好的效果,該平臺具有自動(dòng)化和反復(fù)使用的特點(diǎn)。液體彈珠樣品分散法可以滿足手持?jǐn)?shù)字PCR設(shè)備的所有要求,各種移動(dòng)技術(shù)均可用于液體彈珠。該方法將惰性疏水物質(zhì)包裹在內(nèi)部含PCR混合物的液滴上,使得進(jìn)行熱循環(huán)相對簡單。此外,惰性疏水粉末不與PCR混合物反應(yīng),避免污染。焦耳加熱法因其加熱時(shí)間控制簡易,與活性TEC結(jié)合,使加熱、冷卻的最佳斜坡速率優(yōu)化了擴(kuò)增效率,不失為一種理想的數(shù)字PCR熱循環(huán)方法。基于LED的照明系統(tǒng)幾乎可以滿足未來數(shù)字PCR系統(tǒng)的所有要求。低成本數(shù)碼相機(jī)作為探測器。數(shù)據(jù)處理模塊及整個(gè)設(shè)備可以由低廉的微型計(jì)算機(jī)控制。使用自主開發(fā)的圖像處理和輸出量化的軟件大大降低系統(tǒng)成本。基于智能手機(jī)的熒光檢測儀也在一定程度上降低硬件復(fù)雜性和成本。這些新技術(shù)都將在未來促進(jìn)數(shù)字PCR的發(fā)展[22]。

郭永:數(shù)字PCR的發(fā)展方向包括:(1)提高檢測通量,可對多個(gè)靶標(biāo)多個(gè)標(biāo)本并行檢測;(2)提高檢測自動(dòng)化程度,實(shí)現(xiàn)一鍵式檢測的自動(dòng)化檢測流程;(3)提高檢測速度,進(jìn)一步降低檢測時(shí)間;(4)提高檢測動(dòng)態(tài)范圍;(5)降低檢測成本。這些提高,將會使數(shù)字PCR用于更多分子檢測。目前,非常需要國產(chǎn)高端科學(xué)儀器和醫(yī)療器械能夠站起來。人們高興地看到有識專家,與國產(chǎn)技術(shù)合作、評估和指導(dǎo),一起推動(dòng)技術(shù)的進(jìn)步,體現(xiàn)了新時(shí)代專家的氣度和遠(yuǎn)見。

 
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