熒光顯微鏡技術(shù)常識-顯微定量測量熒光顯微光度計

熒光顯微技術(shù)

  在熒光顯微鏡下，觀察和測量物質(zhì)熒光性的技術(shù)，稱為熒
光顯微技術(shù)，在普通顯微鏡上，裝配可以激發(fā)熒光和接收熒光
的裝置，就能成了熒光顯微鏡，若配以定量測量裝置，則稱為
熒光顯微光度計。

  熒光顯微鏡技術(shù)有兩個核心問題：一是熒光的激發(fā)，二中
熒光的接收，所謂熒光的激發(fā)，就是能使被觀察樣品產(chǎn)生足夠
的熒光，而熒光的接收，就是使激發(fā)光和熒光相分離，獲得適
合眼睛觀察和光電倍增管接受的清晰明亮的熒光。

  熒光顯微鏡和配的熒光裝置的顯微光度計，我國石油、煤
炭和地質(zhì)部門引進的熒光顯微設(shè)備以顯微光度計為主。

  熒光顯微鏡地反射條下的工作原理其關(guān)鍵配件及功能如下
：照明光源光源為100W高壓汞燈根據(jù)斯托克斯法則，物質(zhì)發(fā)射
出的熒光光波的波長總是長于激發(fā)光波的波長，為了保證有機
質(zhì)的發(fā)射光譜落在可見光范圍內(nèi)（400-750nm ），在有機質(zhì)熒
光分析過程中，主要利用汞燈在360-500nm 之間的三條強的譜
線，即365nm 、405nm 和435nm.雙光束分光器熒光顯微鏡與普
通顯微鏡的重要區(qū)別之一，就是在垂直照明器中，用雙光束分
光器代替直角棱鏡，雙光束分光器為一種透明的鏡片，分光鏡
片的一特定的臨界值，波長大于臨界值的光波可以通過，波長
小于臨界值的光波被反射。例如，常用的比光束分光器的臨界
值為430nm ，也就是說波長小于430nm 的激發(fā)光被反射，通過
物鏡到達樣品，而樣品發(fā)射的熒光被物鏡接收后到達雙光束分
光器，由于樣品的熒光波長大于430nm ，因而能通過雙光束分
光器到達目鏡，雙光束分光器的臨界值總是要大于激發(fā)光波的
波長值。

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