熒光技術(shù)可應(yīng)用于各種生物材料,熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)
熒光技術(shù)可應(yīng)用于各種生物材料。熒光顯微鏡的最大優(yōu)點(diǎn)在于其靈敏度極高,可顯
示很低濃度的物質(zhì),或顯示透射光顯微鏡不能分辨的顆粒狀物質(zhì)。
染色的標(biāo)本,側(cè)如被染料染過(guò)的適于用通常透射光顯微鏡檢查的標(biāo)本,也可用熒光
顯微鏡檢查。然而,熒光顯微鏡術(shù)的應(yīng)用,擴(kuò)展了可用染料的范圍,這是因?yàn)槟苁褂昧?br>外染料的可能性,即使用一些能吸收光于紫外線(xiàn)范圍而顯現(xiàn)熒光于可見(jiàn)光范圍的染料
(如硫黃)。能透過(guò)所有波長(zhǎng)光線(xiàn)的標(biāo)本,只能用某些類(lèi)型的阻滯顯微鏡術(shù)來(lái)檢查(干
涉、相差或偏振)。不透光標(biāo)本或相對(duì)不透光標(biāo)本,例如很厚的切片,可以很方便的用
一個(gè)落身寸光源的熒光昴微鏡桌檢查
熒光顯微鏡技術(shù)可誘發(fā)標(biāo)本產(chǎn)生熒光,并在顯微鏡下檢查。其用一個(gè)波長(zhǎng)較短的
光線(xiàn)照射標(biāo)本(例如紫外線(xiàn))而用較長(zhǎng)波長(zhǎng)段觀察標(biāo)本所產(chǎn)生的熒光。
熒光顯微鏡技術(shù)在組織化學(xué)上的價(jià)值,主要是由于這種方法有測(cè)定很低濃度物質(zhì)的
能力。但是這種技術(shù)亦擴(kuò)展了它檢測(cè)的物質(zhì)范圍,或是直接檢測(cè),或是經(jīng)過(guò)化學(xué)處理后
檢測(cè)。此外,由于熒光物質(zhì)結(jié)合于底物而產(chǎn)生激發(fā)和發(fā)射光譜的變化,可以此了解有關(guān)
該底物分子構(gòu)象的情況。
熒光顯微鏡
熒光顯微鏡(fluorescence microscope)與普通透射光顯微鏡的區(qū)別在于:使
用一對(duì)互補(bǔ)濾光片。一個(gè)濾片插入照明通路,產(chǎn)生單色光以激發(fā)熒光,另一個(gè)濾片插于
觀察通路(典型者,置于顯微鏡簡(jiǎn)內(nèi))以防止激發(fā)光射到觀察者的眼,但透過(guò)從熒光標(biāo)
本射出的較長(zhǎng)波長(zhǎng)的光線(xiàn)。從黑色背景中觀看熒光。
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