生物材料分子的大小、形狀、質(zhì)量研究顯微鏡
生物材料中各種分子的分離是生物化學(xué)工作的一個(gè)重要 部分。它
常常要從性質(zhì)非常接近的化合物的混合物里分出一 類分子。
因此,有機(jī)化學(xué)中通常所用的方法是不適用的,而需 要使用能根
據(jù)分子性質(zhì)的細(xì)小差別分開它們的物理技術(shù)。一 般地說(shuō),處理生
物分子時(shí),應(yīng)當(dāng)避免極端的pH和溫度,避開 有機(jī)溶劑氧化劑和還
原劑,否則就有變性失活的危險(xiǎn)。本章 介紹的實(shí)驗(yàn)技術(shù),條件是
溫和的,利用了分子基本的物理性質(zhì) 的差別,
如分子的大小、形狀、質(zhì)量和電荷,以及它們的溶解度 和吸附性
質(zhì)的差別。這些方法都和要分離的混合物、一個(gè)固 相和一種溶劑
三者之間不同程度的相互作用有關(guān)情況下,這種作用可能非常小。
例如,溶質(zhì)-固相的相互作用 在離子交換層析里是主要的;溶質(zhì)-溶
劑的相互作用在分配層 析里是主要的;而在透析中,溶質(zhì)和固相之
間很少或不存在特 異性的相互作用。
透 析
透析用來(lái)分離大小不同的分子,其根據(jù)是半透膜允許小 分子通過(guò)
,而阻礙大分子通過(guò)。做法:將大分子和小分子的 混和物裝進(jìn)透
析袋,浸沒在大量水溶液里。小分子通過(guò)半透 膜跑到透析袋外面
,直至透析袋里外的濃度達(dá)到平衡為止
如果對(duì)流動(dòng)水透析,或反復(fù)更換溶劑,最后可能除去混 合物中的
小分子。透析的速度取決于許多因素,下面簡(jiǎn)要考 慮這些因素
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