酶動(dòng)力學(xué)

  酶提純后，首先要用動(dòng)力學(xué)的方法來研究酶促反應(yīng)的速度以及
影響此速度的各種因素。用以進(jìn)——步探討酶的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系
，酶促反應(yīng)的機(jī)理，酶在生物代謝中的作用，和酶如何調(diào)控藥物的
生理作用等。酶動(dòng)力學(xué)的數(shù)據(jù)

  酶促反應(yīng)的速度系以特定時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物生成量或底物減少量來計(jì)
算。方法很多，視酶、產(chǎn)物和底物的性質(zhì)而定。一般要在酶促反應(yīng)
開始后間隔適當(dāng)時(shí)間從反應(yīng)溶液中取樣少許，將酶的活性破壞，使
反應(yīng)停止。然后再用沉淀法，比色法、吸收光譜法、或放射性同位
素法來測(cè)定產(chǎn)物的生成量或底物的減少量。其中以吸收光譜法最為
方便，因方假若產(chǎn)物或底物本身在紫外或可見光譜區(qū)即有最大的吸
收值時(shí)，即不必再將產(chǎn)物或底物從反應(yīng)溶液中分離出來，就可以測(cè)
出它們變更的量，并且可以連續(xù)地繪出吸收曲線。有時(shí)反應(yīng)物本身
的吸收光譜不顯著，尚可以設(shè)法利用一個(gè)并行相輔的反應(yīng)。在這個(gè)
反應(yīng)中光譜吸收的變化大，于是間接便測(cè)出原來反應(yīng)的速度，得到
各種酶動(dòng)力學(xué)的數(shù)據(jù)。
 
  酶分子的失活和復(fù)活都伴隨有構(gòu)象的變化。但由實(shí)驗(yàn)上的驗(yàn)證
，失活的速度大大地快過構(gòu)象變化的速度，而復(fù)活的速度卻慢過構(gòu)
象恢復(fù)的速度。很可能是若使用變性劑使酶失活時(shí)，在酶分子一分
解為亞基時(shí)，就已失去了活性。也可能是在活性部位中參與催化反
應(yīng)的各個(gè)基團(tuán)間的完整空間關(guān)系一旦發(fā)生變化，就可以引起酶活性
的喪失。但是我們還要認(rèn)清，不是每個(gè)酶分子在失活時(shí)，其構(gòu)象變
化的情形和速度都是一佯的。也不是三維的構(gòu)象展開多少，酶活性
即失去多少。因?yàn)槊傅氖Щ詈兔總€(gè)個(gè)別分子的環(huán)境及遭遇都有關(guān)，
不是每個(gè)酶分子都會(huì)和變性劑分子即時(shí)遭遇的。

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