體細(xì)胞端粒結(jié)構(gòu)的細(xì)胞學(xué)觀察電子顯微鏡應(yīng)用

端粒行為的細(xì)胞學(xué)觀察歷史比我們理解染色體分子結(jié)構(gòu)的歷史更長(zhǎng)
。19世紀(jì)后期積累的證據(jù)表明，在一個(gè)已知的生物體中，染色體的
數(shù)目和形態(tài)是每個(gè)細(xì)胞核的共同特征。為了理解這些結(jié)構(gòu)的功能，
人們開始研究如何描述染色體的運(yùn)動(dòng)、核內(nèi)的球形組構(gòu)以及彼此間
的相互關(guān)系。染色體末端(端粒)和紡錘絲附著位點(diǎn)(著絲粒)是最早
被認(rèn)識(shí)的特征。一個(gè)世紀(jì)以來，它們的行為一直是許多研究的焦點(diǎn)
。在本文備章中所述的最新研究表明，端粒是一種特殊序列，它具
有避免染色體融合、降解以及影響其遺傳活性的作用。這些發(fā)現(xiàn)激
起了人們理解端?？臻g結(jié)構(gòu)及其動(dòng)力學(xué)的新興趣。

  體細(xì)胞端粒結(jié)構(gòu)的觀察與減數(shù)分裂細(xì)胞有顯著差異。這至少部
分是由于控制端粒行為的某些過程對(duì)于減數(shù)分裂來說是特殊的。由
于這些差異，本章我們將分別論述對(duì)體細(xì)胞核和減數(shù)分裂核的觀察
。在體細(xì)胞核中的端粒組構(gòu)檢查端粒組構(gòu)的細(xì)胞學(xué)技術(shù)

  一個(gè)多世紀(jì)以來，人們?cè)噲D解釋決定間期核結(jié)構(gòu)的特征。由于
染色體去凝聚化狀態(tài)的存在使其在典型的顯微鏡切片中不易識(shí)別，
因此很難直接觀察間期的結(jié)構(gòu)。然而由于細(xì)胞核的關(guān)鍵功能、主要
基因的表達(dá)和染色體復(fù)制等在細(xì)胞周期的間期發(fā)生，因此對(duì)間期結(jié)
構(gòu)的研究又成了熱點(diǎn)，在細(xì)胞學(xué)研究中，可以在有絲分裂期凝聚化
狀態(tài)下用光學(xué)顯微鏡直接觀察染色體，進(jìn)而可以推測(cè)間期染色體結(jié)
構(gòu)。長(zhǎng)期以來，研究者利用可以與已固定的核內(nèi)的某些基因組序列
特異地結(jié)合的染料來進(jìn)行研究，以DNA堿基組成和(或)染色體包裝
程度為基礎(chǔ)。應(yīng)用這些染色方法，可以直接得到間期端粒結(jié)構(gòu)的信
息。另一種用來標(biāo)記間期核端粒的方法是將放射性標(biāo)記的核苷酸注
入有絲分裂活躍的細(xì)胞，標(biāo)記的核苷酸將滲入到晚期復(fù)制的序列，
包括染色體末端。

  除此之外，還發(fā)展了使間期染色體人工凝聚的技術(shù)，由此產(chǎn)生
的表型可以解釋并提供有關(guān)天然間期組構(gòu)的信息。在昆蟲多線染色
體內(nèi)也可以直接觀察到間期組構(gòu)的特定類型。最近，原位雜交中的
非同位素方法使不同發(fā)育階段各種二倍體核的精細(xì)序列的檢測(cè)成為
可能?！@種方法可以使間期核內(nèi)端粒的定位觀察在三維角度來進(jìn)
行。

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