破碎細(xì)胞膜制作勻漿-生物細(xì)胞研究顯微鏡

在破碎細(xì)胞膜的方法中，以同軸勻漿器法最為常用。此勻漿器由一
個具有精密口徑的

磨砂玻璃管，以及一個與之緊密配合的杵子所組成杵子與管壁之間
有O．05～0．5mm的間隙。當(dāng)杵子借機(jī)械力高速轉(zhuǎn)動時，組織細(xì)胞便在
杵子與管壁之間擠磨而破碎。勻漿管要浸人冰浴中借以散熱，避免因高
速轉(zhuǎn)動產(chǎn)生之熱使酶變性失活。此法比較溫和，但仍有10％的線粒體、
15％的溶酶體及過氧體受到損傷。若用高速轉(zhuǎn)動的刀片來破碎細(xì)胞，則
對細(xì)胞器的損傷更大。超聲波雖可因震動而使細(xì)胞破碎，但亦能使細(xì)胞
器受到破壞。另有一種高壓勻漿法對單細(xì)胞的破碎很有效，是將細(xì)胞懸
液置于惰性氣體(如氮)中，經(jīng)一定時間平衡后，又使之驟然降至常壓，
這時細(xì)胞內(nèi)壓大于外界，易使細(xì)胞破碎。

為了減少細(xì)胞器的破壞，制作勻漿時還必須選用適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)，以盡
量保持細(xì)胞器的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能。由于蔗糖的溶解度大，性質(zhì)又不活
潑，既能保持細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)與功能，又可防止各細(xì)胞器的彼此聚集。常
用的濃度為0．25 mol，可維持衡定的滲透壓，介質(zhì)的密度和粘度也不
太大，分離所需的(離心)轉(zhuǎn)速也不必太高。

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