電子顯微鏡用以觀察一般細(xì)胞的分子生物學(xué)超微結(jié)構(gòu)
透射電鏡觀察法
電子顯微鏡,開拓了對(duì)超微觀世界的觀察,使醫(yī)學(xué)生物學(xué)有可能步
入分子生物學(xué)領(lǐng)域。它不僅可用以觀察一般細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),而且還可
用以探討其分子結(jié)構(gòu)。使用掃描電鏡還可以觀察生物細(xì)胞三維空間的立
體表面,使人們的認(rèn)識(shí)不斷深化。蚊細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,需定期進(jìn)行電鏡
檢查,以確定培養(yǎng)物是否受到病毒或支原體的污染。同時(shí)用透射電鏡可
以研究蚊細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)及其與功能的關(guān)系,研究殺蟲劑,特別是生物
殺蟲劑的作用機(jī)制等。
透射電鏡是利用電子射線穿透標(biāo)本而成像放大的一種顯微鏡,可用
來(lái)觀察細(xì)胞內(nèi)部的超微結(jié)構(gòu)以及微生物(如病毒、支原體)和生物大分子
。透射電鏡有:一般透射電鏡,用于超薄標(biāo)本的觀察,高壓電鏡,可觀
察較厚的樣品,超高壓電鏡,可直接觀察培養(yǎng)細(xì)胞的活體標(biāo)本。這里僅
介紹一般透射電鏡技術(shù),
1.取材
試劑:Palade緩沖液的配制
A液: 巴比妥鈉2.04g
取材要注意選擇生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞,這時(shí)細(xì)胞形態(tài)最好。取材必需敏
捷輕巧,避免拉、壓等機(jī)械損傷,盡量保持其活性狀態(tài)。所用的器材要
干凈,橡皮刮,盛器不要有污物。
2,固定
離體細(xì)胞易發(fā)生自溶或酶活性減低,應(yīng)以固定劑將細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與成
分固定,并保持細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)接近正常生活狀態(tài)。固定是生物電子顯微
鏡樣品中最重要的一環(huán)。
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