顯微技術(shù)

人體的細(xì)胞一般小于20腳，是肉眼無法分辨的，因此需借助顯微鏡
進(jìn)行觀察分析。目前普遍使用的是復(fù)式光學(xué)顯微鏡，它是根據(jù)光學(xué)原理
，使用一組玻璃透鏡再加上精密的機(jī)械工藝制成的儀器。光學(xué)顯微技術(shù)
是指通過光學(xué)顯微鏡觀察物體的技術(shù)。由于細(xì)胞一般無色透明，直接用
顯微鏡觀察不易分辨其結(jié)構(gòu)，而往往需要經(jīng)過制片處理。因此，光學(xué)顯
微技術(shù)包括光學(xué)顯微鏡技術(shù)和光學(xué)顯微制片技術(shù)兩部分。

  光學(xué)顯微鏡技術(shù)

光學(xué)顯微鏡是利用可見光作光源，通過一組玻璃透鏡包括目鏡、物
鏡、聚光鏡放大被觀察物體，提高分辨力的儀器。所謂分辨力，指人眼
在25cm的明視距離處分辨物體結(jié)構(gòu)最小間距的能力。一般光鏡的分辨力
為0．39μm，放大倍數(shù)可達(dá)1600倍。根據(jù)不同的用途，光學(xué)顯微鏡可分
為以下幾種類型：①普通光學(xué)顯微鏡，用于細(xì)胞一般形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察，
可看到細(xì)胞核、核仁、細(xì)胞膜、線粒體、中心體、高爾基體、染色體等
。是應(yīng)用最為廣泛的顯微鏡。②相差顯微鏡，在普通光鏡的聚光器上加
一個(gè)環(huán)形光闌，在物鏡的后焦面加一個(gè)相板制成。其原理是通過改變光
線的振幅差，提高細(xì)胞結(jié)構(gòu)的對比度而提高分辨力。主要用于活體細(xì)胞
的觀察。③暗視野顯微鏡，可在普通光鏡的聚光器中央加一塊遮光板，
使照明光線不直接進(jìn)入物鏡，只有經(jīng)過標(biāo)本的散射光進(jìn)入，這樣視野的
背景是黑暗的，而被檢物體為亮點(diǎn)，暗視野顯微鏡也適于觀察活細(xì)胞，
但不能用于細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的觀察。④熒光顯微鏡，以非可見光紫外光和
藍(lán)紫外光作光源，激發(fā)標(biāo)本中的熒光物質(zhì)使其發(fā)射熒光，可用于細(xì)胞特
殊結(jié)構(gòu)的觀察。紫外光或藍(lán)紫外光由特制的濾光器或?yàn)V光系統(tǒng)產(chǎn)生。細(xì)
胞中的某些物質(zhì)如葉綠體能自發(fā)產(chǎn)生紅色熒光，而有些結(jié)構(gòu)如男性人體
細(xì)胞的Y染色體等則需經(jīng)過熒光染料如口丫啶橙等染色才能產(chǎn)生熒光。

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