培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)需采取特定的方法-細(xì)胞顯微鏡

動(dòng)物細(xì)胞非常適宜用于生產(chǎn)需進(jìn)行大量且精確轉(zhuǎn)錄后加工的蛋白質(zhì)
、具有生物活性的組織(人造皮膚)、疫苗及作為殺蟲劑的病毒。
  和培養(yǎng)細(xì)菌、真菌或酵母細(xì)胞相比，培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞更加復(fù)雜、
精細(xì)。這些特點(diǎn)決定了培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)需采取特定的方法。
  關(guān)鍵區(qū)別是初級(jí)細(xì)胞系(從組織中直接得到)和從初級(jí)細(xì)胞系得
到的次級(jí)細(xì)胞系。正常的細(xì)胞系是會(huì)衰亡的，它們分裂的次數(shù)有限
。其他細(xì)胞系是轉(zhuǎn)化的或非衰亡的，可以無限制地分裂。許多細(xì)胞
系只有吸附在固體表面上才會(huì)生長，這些細(xì)胞系是貼壁依賴性細(xì)胞
。一些細(xì)胞，特別是轉(zhuǎn)化細(xì)胞系可以懸浮生長。一種特別重要的可
懸浮培養(yǎng)細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞。該細(xì)胞是能產(chǎn)生抗體的衰亡細(xì)胞與轉(zhuǎn)
化細(xì)胞雜交而成的，它是非衰亡性的、容易培養(yǎng)的細(xì)胞系，能夠生
產(chǎn)單類型的抗體，或單克隆抗體。  ·
  動(dòng)物細(xì)胞生長的培養(yǎng)基必須能夠提供多種生長因子、葡萄糖、
谷氨酰胺、氨基酸、特定無機(jī)鹽以及維生素。在特殊情況下還需添
加動(dòng)物血清(特別是哺乳動(dòng)物的血清)。但是血清價(jià)格非常昂貴，而
且增加了感染的概率，成分也不確定，產(chǎn)品批次間存在一定差異，
還增加了下游回收蛋白質(zhì)產(chǎn)品的困難。多數(shù)情況下，根據(jù)對(duì)細(xì)胞營
養(yǎng)的需求可以開發(fā)無血清培養(yǎng)基，無血清培養(yǎng)基的使用越來越重要
。
  許多潛在的生物反應(yīng)器結(jié)構(gòu)都適用于商業(yè)化的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。
設(shè)計(jì)反應(yīng)器時(shí)關(guān)鍵問題在于提供充足的氧氣和營養(yǎng)，以及足夠的表
面積(對(duì)貼壁依賴性細(xì)胞而言)來達(dá)到高細(xì)胞密度，同時(shí)盡量不要使
細(xì)胞暴露于液體剪切力下。同樣，還須努力實(shí)現(xiàn)將培養(yǎng)基完全利用
以及達(dá)到高產(chǎn)物濃度。設(shè)計(jì)時(shí)還需盡量減少有毒性副產(chǎn)物(如乳酸
、氨)形成，或者能有效將這些代謝物從細(xì)胞生長的微環(huán)境中移除

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