細(xì)胞外凍結(jié)和細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)
大多數(shù)微生物容易冷凍保存。
細(xì)胞的凍結(jié)方法依冷凍速度而異。以一定速度為界,凍結(jié)速度
較慢時,只有菌體外的溶液凍結(jié),細(xì)胞本身不凍結(jié)(細(xì)胞外凍結(jié))。
與此相反,凍結(jié)速度較快時,細(xì)胞內(nèi)也形成冰凍(細(xì)胞內(nèi)凍結(jié))。一
般地說,細(xì)胞越大,越容易產(chǎn)生細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)。
抗凍力強(qiáng)的菌在細(xì)胞外凍結(jié)下不受損傷,但多數(shù)細(xì)胞不論在細(xì)
胞外凍結(jié)或在細(xì)胞內(nèi)凍結(jié),都容易受到損傷。一般地說,加防凍劑
如甘油就能防止細(xì)胞外凍結(jié)所引起的損傷,也就是說,緩慢冷凍較
好。導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)的凍結(jié)速度,因細(xì)胞種類和添加的防凍劑種類
和濃度而異,就微生物而言,凍結(jié)速度為每分鐘100℃以下時,不
必那么擔(dān)心細(xì)胞內(nèi)凍結(jié)。將液體1毫升倒入試管中,使之與液氮直
接接觸時的凍結(jié)速度是大體每分鐘100℃的水平。
微生物的冷凍保存應(yīng)注意的事項(xiàng)
1)微生物的培養(yǎng)年齡,一般地說,適宜于冷凍干燥的繁殖期的
細(xì)胞,對冷凍的抵抗力強(qiáng)。
2)某些微生物對冷凍的抵抗力,根據(jù)增菌培養(yǎng)基的成分而有顯
著的差異。
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