冷凍干燥原理是使微生物快速冷凍微生物原結(jié)構(gòu)不受損

  冷凍干燥保藏法
用這種方法能在穩(wěn)定的狀態(tài)下保藏很長(zhǎng)時(shí)間，就保藏方法來(lái)說(shuō)
是極優(yōu)越的。冷凍干燥的原理是使微生物快速冷凍，然后通過(guò)蒸發(fā)
作用，使水分直接從冰轉(zhuǎn)化為蒸汽而將水分除去。因此，在處理過(guò)
程中，微生物不是在液體中，因而能夠保持原來(lái)結(jié)構(gòu)不受損害。此
法用于保藏大部分產(chǎn)生孢子的真菌(尤其是半知菌)效果很好，但
是對(duì)蟲(chóng)霉目以及主要形成菌絲體類型的真菌則不適用，保藏期可達(dá)
數(shù)年至數(shù)十年。
  冷凍干燥有專門(mén)的設(shè)備，一般是將保存的孢子懸浮在保護(hù)劑中
(血清是很好的保護(hù)劑，但是一般可用脫脂牛乳)，再把少量的懸液
在無(wú)菌條件下分裝在滅菌的安瓿中，然后接在抽氣系統(tǒng)上，安瓿與
抽氣系統(tǒng)之間，一般加一干燥器，以五氧化二磷或硅膠等作干燥劑。
安瓿沉放在干冰和乙酸乙酯的混合冷凍液中，抽氣使懸浮液完全干
燥(約5—6小時(shí))，安瓿封口后在室溫下或冰箱中保存。冷凍的方
法很多，有在一40℃低溫冰箱中冷凍1小時(shí)，也可使用冰塊加食鹽
的辦法得到低溫。
  菌種的恢復(fù)，是將安瓿用酒精消毒后打開(kāi)，加入與冷凍前懸浮
液等量的滅菌水，靜置20一30分鐘，然后用劃線或其他方法培養(yǎng)。
  液氮保藏法
  將真菌放入一196℃的液氮中，保藏期可達(dá)很多年。其做法是把
瓊脂菌種塊投入盛有10％甘油或10％二甲亞砜保護(hù)劑的安瓿或特
制的有蓋塑料管中以每分鐘降低l℃的速度緩慢冷卻到一2 5--
一40℃后浸入液氮中快速冷卻。取出使用時(shí)應(yīng)置于37℃左右的溫水
中輕輕振蕩直到冰晶完全融化(快速融化)。

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