不同菌株所使用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法都不同-細(xì)菌顯微鏡
真菌的保藏是要把培養(yǎng)條件與培養(yǎng)時(shí)間調(diào)節(jié)至細(xì)胞不過度增殖
的程度,使繁殖的細(xì)胞原樣地轉(zhuǎn)入休眠狀態(tài),為此采用隔絕空氣、降
低溫度、或使之處于干燥狀態(tài)的方法。在保藏過程中,為使菌種不
發(fā)生變異,以保存遺傳純種(純系)為好,因此應(yīng)盡量保存單孢子
或單菌絲分離菌株。還必須了解對(duì)不同菌株的適當(dāng)或不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)
基,適當(dāng)或不適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方法;而對(duì)新分離的菌株要采用其近緣種
所使用的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。
保藏用培養(yǎng)基的選擇原則:①一般認(rèn)為營(yíng)養(yǎng)稀薄的培養(yǎng)基保存
效果更好一些。真菌在自然條件下很少遇到糖分很多的條件,在含
糖的培養(yǎng)基上,條件過于優(yōu)越,最初生長(zhǎng)很快,但移植幾次往往就
退化,不再形成孢子。因此,保存菌種最好不用或少用糖,特別是
單糖。②在該培養(yǎng)基上應(yīng)容易形成孢子。半知菌的分生孢子是傳播
單元,也是休眠體,易于保存。然而蟲霉的分生孢子壽命短,只能
短期保存,但休眠孢子可長(zhǎng)期保存達(dá)數(shù)年之久。⑧能利用無(wú)機(jī)氮者
就不要使用有機(jī)氮源;不需維生親而能生長(zhǎng)的微生物可使用合成培
養(yǎng)基。④對(duì)生理缺陷型菌株,培養(yǎng)基中應(yīng)含有缺陷物質(zhì);耐藥物菌
株,培養(yǎng)基中應(yīng)含這種藥物。⑤薩氏(葡萄糖4%,蛋白胨1%,瓊
脂1.5%)培養(yǎng)基去掉葡萄糖成分,歷來作為大多數(shù)病原性真菌的保
存培養(yǎng)基而廣泛應(yīng)用。這種培養(yǎng)基去掉葡萄糖是為了防止發(fā)生變異;
但某些菌種可能會(huì)發(fā)育不佳,容易死亡。因此,可使用加1%葡萄糖
的薩氏培養(yǎng)基。此外PDA培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基也常被選用。
菌齡在菌種的保藏中也很重要,得到健壯的菌絲細(xì)胞和孢子之
后才有利于長(zhǎng)期保存,通常是培養(yǎng)4—7天后保藏。白僵菌和擬青霉
等生長(zhǎng)緩慢,往往需要培養(yǎng)10一14天。
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