葉綠體基質(zhì)研究技術(shù)-電子顯微鏡的應(yīng)用

葉綠體生成的關(guān)卡：蛋白質(zhì)在被膜處的轉(zhuǎn)運
  被膜位于質(zhì)體與胞質(zhì)的交界處地方，此關(guān)鍵位置協(xié)調(diào)著細(xì)胞分
化、質(zhì)體發(fā)育，而且調(diào)節(jié)葉綠體的生成。在外膜和內(nèi)膜上分別有由
蛋白質(zhì)構(gòu)成的輸入裝置(Toc復(fù)合體和Tic復(fù)合體)，將核基因編碼的
蛋白質(zhì)輸入進(jìn)來。多數(shù)在胞質(zhì)中合成的送往葉綠體的蛋白質(zhì)，其N
端有一段可被切除的前體序列。前體蛋白與胞質(zhì)中的因子一起先到
達(dá)細(xì)胞器表面，然后進(jìn)入基質(zhì)中，這顯然采用的是跨越被膜時所使
用的一般輸入途徑。在葉綠體基質(zhì)中前體序列的切除標(biāo)志著前體蛋
白轉(zhuǎn)運的完成，而進(jìn)一步到達(dá)最終位置是由其他的定向信號引導(dǎo)實
現(xiàn)。

  胞質(zhì)中的運輸控制
  胞質(zhì)不是一個開放的空間。相反，去往葉綠體的蛋白質(zhì)就像上
班高峰時要去上班的人們。由于幾種細(xì)胞器的形成有賴于核編碼的
蛋白質(zhì)，需要特殊的定向信息幫助葉綠體蛋白避免陷入混亂。同時
，要保持蛋白質(zhì)處于一種松散折疊的狀態(tài)，以確保蛋白質(zhì)符合輸入
的條件。根據(jù)對放射性標(biāo)記的前體蛋白進(jìn)入被分離葉綠體的實驗觀
察，研究人員已對定向信號的一級結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究。采用固定化多
肽技術(shù)，將固定化多肽與胞質(zhì)提取物保溫，鑒定出前體序列可與特
殊的胞質(zhì)因子和分子伴侶結(jié)合

  前體序列的多種功能
  核編碼葉綠體蛋白的定向信息位于其氨基酸序列中：多數(shù)已知
的葉綠體蛋白含有可切除的N端前體序列。前體序列的N端起始處富
含不帶電的氨基酸；中間部分主要是帶正電的和帶羥基的殘基，如
絲氨酸和蘇氨酸℃端部分富含精氨酸。

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