視頻光學(xué)電子顯微鏡分析細(xì)胞內(nèi)復(fù)合形態(tài)的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)

  低溫免疫金電子顯微鏡術(shù)可在亞細(xì)胞水平檢測(cè)抗原，具有分辨
率高的特性。本技術(shù)涉及細(xì)胞或組織超薄冰凍切片的制備，并用免
疫金標(biāo)記切片以定位抗原。由于不需要苛刻的有機(jī)溶劑如用于可塑
性包埋的有機(jī)溶劑，蛋白質(zhì)抗原特性與精細(xì)超微結(jié)構(gòu)的保持比傳統(tǒng)
的電鏡包埋法好。低溫免疫金標(biāo)記時(shí)，葡萄球菌蛋白A結(jié)合的不同
大小的金粒子可用于標(biāo)記與抗原結(jié)合的不同抗體，故可同時(shí)定位多
種抗原，而其他免疫電子顯微鏡術(shù)標(biāo)記法則不能同時(shí)定位多種抗原
。如何運(yùn)用低溫免疫金電子顯微鏡術(shù)標(biāo)記標(biāo)本，包括固定、包埋、
冰凍切片及標(biāo)記。
  視頻光學(xué)／電子顯微鏡術(shù)(CVLEM)，它集熒光顯微鏡術(shù)和電子
顯微鏡術(shù)于一身，用于分析細(xì)胞內(nèi)具有復(fù)合形態(tài)的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。該技
術(shù)通過監(jiān)測(cè)表達(dá)熒光報(bào)告蛋白的細(xì)胞，如表達(dá)綠色熒光蛋白嵌合體
的細(xì)胞，來鑒定和監(jiān)測(cè)感興趣的結(jié)構(gòu)。首先固定細(xì)胞，然后用電子
顯微鏡通過三維結(jié)構(gòu)重建的方法來分析同一個(gè)感興趣的結(jié)構(gòu)。在標(biāo)
本制備的各個(gè)階段，都有一定的技術(shù)要求。而該技術(shù)能以驚人的高
分辨率檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)復(fù)合結(jié)構(gòu)的組織及形態(tài)，如Golgi復(fù)合體、膜轉(zhuǎn)
運(yùn)介質(zhì)及細(xì)胞骨架成分。

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