培養(yǎng)法

培養(yǎng)法取決于在一個(gè)樣品設(shè)定條件的特定培養(yǎng)基中細(xì)胞的增殖能力
。最常用兩種培養(yǎng)方法是最大或然數(shù)法(MPN)和平板計(jì)數(shù)法。MPN測(cè)定是
將樣品在含有液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)管中連續(xù)稀釋至3倍、5倍和10倍，然后
通過觀察一系列稀釋樣獲得該微生物種群密度數(shù)量級(jí)的估計(jì)值。但是，
標(biāo)準(zhǔn)的MPN方案推薦，每個(gè)稀釋樣至少注入3個(gè)(最好5個(gè))平行的培養(yǎng)管
。孵化后，這些培養(yǎng)管被劃分為陽性(渾濁的——表示產(chǎn)生了生長(zhǎng)現(xiàn)象)
或陰性(清澈——沒有生長(zhǎng)跡象)。將每個(gè)陽性管稀釋液的樣品與根據(jù)統(tǒng)
計(jì)學(xué)得出的對(duì)照表對(duì)比，并按照稀釋因子進(jìn)行修正得到MPN／mL。建立M
PN排列雖然工作量大但有其優(yōu)勢(shì)。通過仔細(xì)選擇培養(yǎng)基，MPN方法能用
來量化具有特殊新陳代謝能力的微生物。在某種液體中馴化的微生物，
在用于平板計(jì)數(shù)的固體介質(zhì)中可能不形成群落。用肉湯培養(yǎng)基可提高可
培養(yǎng)計(jì)數(shù)的復(fù)活率。

平板計(jì)數(shù)是將已知樣品(可能是mg固體或mL液體)配制成一系列緩沖
稀釋液。對(duì)涂布平板而言，從稀釋樣品中取0．1mL轉(zhuǎn)移到事先用含有所
需固體培養(yǎng)基澆注的培養(yǎng)皿上，然后，用彎成曲棍狀的消毒玻璃棒，把
轉(zhuǎn)移的液滴在培養(yǎng)皿表面均勻散開。對(duì)灌澆平板而言，將0．1mL樣品或
1．0mL稀釋的樣品移入未使用過的培養(yǎng)皿，將熔化的(約45℃)培養(yǎng)基倒
人培養(yǎng)皿里。輕輕地漩渦式轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿，讓樣品逐漸分散到整個(gè)培養(yǎng)基
，然后讓培養(yǎng)基在冷卻時(shí)固化。接下來的步驟對(duì)灌澆和涂布平板都是相
同的。

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