酵母、菌絲體、微藻和白細(xì)胞等單細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞顯微鏡
珠磨勻質(zhì)機(jī)
珠磨法是最常用的細(xì)胞機(jī)械破碎方法,其原理為在珠磨機(jī)中大
量的小玻璃珠劇烈振動或攪動,通過玻璃珠與細(xì)胞之間的摩擦來破
壞細(xì)胞,為振動珠磨機(jī)的原理示意圖。我們可以人工進(jìn)行細(xì)胞懸浮
液的珠磨過程,通常的方法是將玻璃珠與懸液混合后進(jìn)行渦旋,在
數(shù)分鐘內(nèi)便能完成手持式的球磨機(jī)較慢且操作較為煩瑣,因此振動
或攪動的機(jī)械裝置更為常見在珠磨后,玻璃珠會隨重力下降,而細(xì)
胞提取物便很容易分離了。
玻璃珠的尺寸是一個很重要的參數(shù),對于細(xì)菌和孢子而言,0
.1mm的大小是最合適的;對酵母、菌絲體、微藻和白細(xì)胞等單細(xì)
胞動物或組織培養(yǎng)細(xì)胞而言,0.5mm更為合適。當(dāng)使用高密度的陶
瓷小珠和氧化鋯一硅小珠代替玻璃珠時,破碎的速度可以提高50%
:小珠的量至少占懸液總體積的50%,甚至可以達(dá)到90%,以提供
足夠的攪動。一般而言,細(xì)胞懸液中小珠的量與細(xì)胞破碎的速度成
正比j
振動珠磨法。最簡單的振動裝置是米克爾振動篩,這種裝置在
振動過程中不能使樣品冷卻,因此需要頻繁的暫停以冷卻容器。
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