激發(fā)濾片和濾片組合影響熒光圖像的成像效果
觀察和記錄結(jié)果
熒光顯微鏡的原理。激發(fā)濾片和阻擋濾片的最佳組合對熒光圖
像的強(qiáng)度和對比度起到了很重要的作用。另外,正確選擇合適的物
鏡也很關(guān)鍵。通常選用數(shù)值孔徑(NA)較高的平面視野物鏡,
細(xì)胞制備物
由于制備物中不同細(xì)胞之間GISH的效率有所不同。因此,必須
通過選擇正確的實驗材料,和進(jìn)行染色體預(yù)處理等方法來使有絲分
裂指數(shù)達(dá)到最大。對于熒光檢測而言,每個載玻片上細(xì)胞的絕對數(shù)
目可能要比用于染色的少一些,這是因為在同一個顯微鏡視野中,
熒光材料之間會相互干擾。最好做到,樣品中沒有細(xì)胞壁和細(xì)胞質(zhì)
,而且載玻片上沒有灰塵或其他光散射碎屑。
植物材料
若有全植株,細(xì)胞核應(yīng)當(dāng)從分裂旺盛的分生組織中分離,這里
累積的代謝物最少,例如離體培養(yǎng)物的根尖,或者是正在完全發(fā)育
的幼嫩植株的根尖??梢詮?4h前澆水的盆栽植物上,或者從水培
養(yǎng)的插條上取幼嫩的根尖。從植物組織中得到有絲分裂和減數(shù)分裂
的實驗方法將在下面介紹。也可以直接從原生質(zhì)體中收集正在分裂
的細(xì)胞核。
(本文由上海光學(xué)儀器廠編輯整理提供, 未經(jīng)允許禁止復(fù)制http://www.sgaaa.com)
合作站點:http://www.xianweijing.org/