制備洋蔥內(nèi)表皮切片細(xì)胞分析圖像顯微鏡廠商
制備洋蔥內(nèi)表皮切片。在兩個染色盤中分別盛入上述兩種中性紅溶液
。再準(zhǔn)備兩個盤盛相應(yīng)的沖洗液。將數(shù)個切片轉(zhuǎn)入每種染色溶液中,并使
之漂浮在液面上。10-20分鐘后,將表皮切片轉(zhuǎn)到pH相同的沖洗液盤內(nèi),靜
置30秒鐘,輕輕震蕩,最后將一小滴沖洗液加到載玻片上,蓋上蓋玻片并
在顯微鏡下觀察。為避免表皮在蓋玻片下長時問擠壓,應(yīng)立即進(jìn)行觀察。
為了清楚區(qū)分細(xì)胞的哪種成分染了色,可以用1.OM的蔗糖(或其它榴似滲
透勢的溶液)將表皮切片質(zhì)壁分離,以便使原生質(zhì)膜與細(xì)胞
在酸性條件下,中性紅只能使細(xì)胞壁染色。在堿性溶液中,只有液泡
著色,而且一些細(xì)胞會發(fā)生液泡收縮。往往是靠近表皮切片邊緣的細(xì)胞染
色較重。這可能表明在表皮切片制備過程中發(fā)生了一些變化或是表皮切片
邊緣與染色劑接觸較多使染色加重。染色后的細(xì)胞壁和液泡呈暗磚紅色。
將表皮切片從較酸溶液中轉(zhuǎn)入堿性緩沖液會使染色位點(diǎn)由細(xì)胞壁轉(zhuǎn)向
細(xì)胞液泡,反之,則情況相反。
最近強(qiáng)調(diào)膜蛋白的重要性致使對膜脂的功能有些估計過低了。然而早
已證明,膜蛋白在脂類不存在時不能行使其真正的功能。膜類脂參與對細(xì)
胞生活極其重要的三種物質(zhì)(水、氧、二氧化碳)運(yùn)輸?shù)氖聦?shí)證明,膜脂對
細(xì)胞運(yùn)輸十分重要。水、氧和二氧化碳都是通過膜脂區(qū)域被動運(yùn)輸?shù)?。?br>且,細(xì)胞膜的滲透特性(這對植物細(xì)胞是十分必要的)也是由膜的這些脂類
成分造成的。
除獲取構(gòu)成細(xì)胞膜類脂種類的較多資料外,期望通過透性測定來更清
楚地了解滲透過程。并且,這些結(jié)果亦有助于定量確定滲透劑與膜分子的
相互作用力。用良好控制而又不復(fù)雜的人工磷脂膜和復(fù)制膜進(jìn)行平行試驗(yàn)
,也將有助于解釋細(xì)胞膜試驗(yàn)資料。
很大潛力的研究領(lǐng)域是對植物細(xì)胞進(jìn)行透性比較研究。測定那些適應(yīng)
于極端環(huán)境條件(如干早、霜、熱)下的特殊植物細(xì)胞類型的透性值將能揭
示細(xì)胞透性變異盤{『量值,從而得出關(guān)于膜脂組成功能的重要結(jié)論。
最后,對因外界或內(nèi)部因子而發(fā)生了變化的細(xì)胞膜進(jìn)行透性測定,將
會促進(jìn)我們對滲透過程的了解,以及允許我們解釋所伴隨的膜結(jié)構(gòu)和膜組
成的變化。此種詹息除了在了解滲透過程方面具有價值外,在病理學(xué)、藥
理學(xué)、毒理學(xué)等方面以及對了解植物細(xì)胞吸收除草劑等,都具有”卜分重
要的實(shí)踐意義。
上述論題僅是一些期望能由將來膜透性研究所亟待解決的論題。還有
一些方面尚未提到,如脂類組成對主動運(yùn)輸系統(tǒng)功能的影響,磷脂分子在
膜內(nèi)的流動性問題,膜內(nèi)脂與蛋白相互作用問題等。
盡管我們對細(xì)胞膜的認(rèn)識有了很大進(jìn)展,但是,仍有許多重要問題至
今尚未解決。所有這些都等待著后來人花更大的努力去研究。
(本文由上海光學(xué)儀器廠編輯整理提供, 未經(jīng)允許禁止復(fù)制http://www.sgaaa.com)
合作站點(diǎn):http://www.xianweijing.org/