熒光顯微鏡使用的重要注意事項
一、操作指南:
(1)一般需要關(guān)掉實驗室內(nèi)的電燈,開顯微鏡汞燈。需要延長汞燈的使用壽命,就要汞燈開啟不到請在15-30分鐘后再關(guān)閉汞燈。
下一次打開汞燈電源的距離這次關(guān)閉相隔時間應(yīng)該30分鐘以上,最好要禁止反復(fù)開關(guān)。
(2)根據(jù)樣品熒光素來挑選適合的熒光組件。利用減光片對熒光強度靈活進行調(diào)整(熒光強度是不可調(diào),
需要利用各種減光片來實時的調(diào)整觀測效果)
(3)不同的激發(fā)光波長應(yīng)該選擇不同的濾光片,常有綠、藍、紫、紫外等
(4)放置染色切片,調(diào)整好合適視野,可以先在明場下調(diào)校要觀察的位置再使用熒光。一般熒光狀態(tài)觀測標本,
標本熒光會很快的的衰減,所以避免較長時間的熒光下觀測,
(5)在實驗前確認好是否需要拍片,并且確認照相機實驗前已裝好節(jié)省時間。
(6)使用熒光顯微鏡結(jié)束后,關(guān)掉所有電源,而且需做好使用記錄。
二、主要事項:
(1)嚴格遵循熒光顯微鏡使用說明書要求使用,禁止隨意改變使用步驟。
(2)應(yīng)該在暗室中操作。在暗室內(nèi),等待眼睛完全適應(yīng)暗室,
再開始觀察標本。,開啟電源,啟動高壓汞燈5~15分鐘
(3)為避免紫外線對眼睛損害。再調(diào)校光源同時佩戴防護眼鏡。
(4)觀測時間每次以1~2小時最佳,超過100分鐘,熒光減弱;標本受紫外線照射3~5min后,熒光也會明顯衰退或褪色;
激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象;
(5)熒光顯微鏡的汞燈使用時間有限,實驗標本最好集中檢測,延長光源使用時間。溫度高時,應(yīng)配備降溫系統(tǒng),
新?lián)Q燈泡要進行記錄使用記錄。
(6)觀測立刻觀測在標本染色后,熒光會隨時間延長逐漸減弱。但是將標本放置于聚乙烯塑料袋中4℃保存,
可延長熒光減弱速度
(7)熒光亮度標準:為四級,即“—”——無或可見微弱自發(fā)熒光。“+”——僅能見明確可見的熒光?!?+”——可見有明亮的熒光?!?++”——可見耀眼的熒光。
(8)使用玻片等載體,厚度必須均勻,沒有明顯自發(fā)熒光,如使用油鏡,保證鏡油必須是無熒光鏡油。
(9)裝穩(wěn)壓器,電壓的不穩(wěn)定將降低汞燈的的使用時間,并影響鏡檢結(jié)果。
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